Getimede zwangere muizen en ratten zijn belangrijke onderzoeksinstrumenten, met toepassingen in ontwikkelingsonderzoek, genetische manipulatie en het genereren van weefselculturen. Ze zijn de meest efficiënte manier om een cohort van embryo’s, foetussen of pups te verkrijgen met een nauwkeurig bepaalde, op elkaar afgestemde leeftijd. Maar wat zijn nu precies tijdzwangere muizen?
Wat zijn tijdzwangere muizen en ratten?
Een tijdzwanger vrouwtje is een muis of rat met een precies bekende paringsdatum. Dit maakt de oogst van embryo’s of foetussen op een gewenste zwangerschapsduur mogelijk, of de productie van nesten die op een gewenste dag worden geboren.
Deze getimede paringen worden tot stand gebracht door paringen op een bepaalde dag uit te voeren en de volgende dag te controleren op tekenen van copulatie. Vrouwtjes die tekenen van paring vertonen (sperma pluggen bij muizen, positieve vaginale uitstrijkjes bij ratten) worden geïsoleerd. Dit lokaliseert de paring – en vermoedelijk de bevruchting – tot een bepaalde periode van 24 uur.
Bij Taconic Biosciences wordt de dag waarop spermacellen bij wijfjes worden gedetecteerd de “sperma-positieve datum” genoemd en beschouwd als de eerste dag van de dracht (alle getimede zwangere modellen moeten worden besteld volgens de sperma-positieve datum).
Tijdens de eerste stadia van de dracht is het moeilijk de dracht te bevestigen door visuele observatie of palpatie. Na veertien dagen kan de zwangerschap worden bevestigd door visuele observatie en palpatie van de pups in utero.
Embryonic Diapause in Timed Pregnant Mice and Rats
Er worden verschillende methoden gebruikt om de zwangerschapsduur te bepalen, waaronder ontwikkeling, gewicht, grootte en uiterlijk, maar de grootte van het nest beïnvloedt deze factoren. Een uitstekende referentie is online beschikbaar bij UNSW voor ratten en muizen.
De ontwikkeling van embryo’s en foetussen verloopt meestal volgens een welbepaalde tijdlijn, maar onderzoekers merken af en toe dat een oogst lijkt te bestaan uit embryo’s of foetussen die jonger zijn dan de bekende zwangerschapsduur zou suggereren.
Embryonale diapauze kan de waarschijnlijke boosdoener zijn in die gevallen waarin embryo’s of foetussen jonger lijken dan verwacht. Embryonale diapauze is een tijdelijke stop in de embryonale ontwikkeling die optreedt vóór de innesteling van de blastocyst. Deze kan worden veroorzaakt door stressfactoren in het milieu of door input van de moeder, zoals borstvoeding1. Als gevolg daarvan kan het werkelijke tempo van de embryonale ontwikkeling verschillen van de nominale zwangerschapsduur.
Voorkeur voor stammen en bestanden voor tijdige dekking
| Model | Fokleeftijd | Nestgrootte | Typische dracht |
| Zwitserse Webster | 8 weken | 11 pups | 19 – 20 dagen |
| Zwitserse Webster | 19 – 20 dagen | . 20 dagen | |
| Zwarte 6 | 8 weken | 7 pups | 18 – 20 dagen |
| Sprague Dawley® | 8 – 10 weken | 10 pups | 21 – 23 dagen |
Ratten
Dankzij de uitstekende voortplantingsprestaties van het Sprague Dawley®-model geniet dit model de voorkeur voor het genereren van getimede drachtige vrouwelijke ratten. Embryo’s van tijdige drachtige Sprague-Dawley®-ratten worden gebruikt bij de bestudering van embryonale ontwikkeling, teratologie en reproductietoxicologie, alsook bij experimenten waarbij foetaal weefsel van specifieke embryonale leeftijden wordt gebruikt.
Muizen
De raszuivere Zwitserse Webster-muis heeft ook superieure voortplantingsprestaties en is een uitstekende keuze voor experimenten waarbij een raszuiver muismodel aanvaardbaar is. Als een ingeteelde stam nodig is, wordt meestal de Black 6-muis gebruikt. Getimede zwangere Swiss Webster-muizen leveren in de regel een grotere opbrengst aan embryo’s en foetussen op dan de Black 6-muis, die kleinere worpen heeft.
Toepassingen van getimede zwangere muizen en ratten
Timede zwangere dieren worden op grote schaal gebruikt bij genetische manipulatie, de ontwikkeling van weefselculturen en ontwikkelingsonderzoek. De mogelijkheid om embryo’s en foetussen in bepaalde zwangerschapsstadia te oogsten is van cruciaal belang voor deze studies.
- De oogst van embryo’s (gewoonlijk na superovulatie en getimede paring) is een kritieke stap bij het creëren van genetisch gemodificeerde diermodellen. Zygoten worden meestal gebruikt voor pronucleaire micro-injectie (met inbegrip van CRISPR-genbewerking), terwijl blastocysten op een later tijdstip worden geoogst en gebruikt als donorembryo’s voor injectie van gemodificeerde embryonale stamcellen.
- Muis- en ratembryo’s en foetussen worden vaak gebruikt om primaire weefselculturen te genereren, zoals neuronale culturen of muisembryofibroblasten.
- Drachtige muizen en ratten worden vaak gebruikt om de invloed van voeding of andere inputs tijdens de zwangerschap en op de daaruit voortkomende nakomelingen te bestuderen.
Bekijk de webinars van Taconic Biosciences:
- The Most Important Mouse in the World – Your Guide to the C57BL/6 Mouse
- Rapid Generation of Mouse and Rat Mutants by CRISPR/Cas in One-Cell Embryos
Geef een antwoord