1.Introduction

De verhouding tussen hematocriet (Hct) en hemoglobine (Hb) is lange tijd algemeen aanvaard als 2.941, en het wordt in de dagelijkse klinische praktijk vereenvoudigd tot 3.0. Dit cijfer kan worden toegepast voor mensen met een normale morfologie van de rode bloedcellen (RBC). In het geval van alfa-thalassemieën hebben de patiënten altijd microcytaire, hypochrome, anisopoikilocytaire RBC en hun gemiddelde Hct/Hb-verhouding wordt onlangs 3,5+0,2 (tussen 3,25 en 4,12) gevonden, wat totaal verschilt van 3,02+0,08 (tussen 2,86 – 3,17) van de normale controle. De oorzaak van de hoge Hct/Hb verhouding bij de patiënten met de alfa-thalassemieën wordt verondersteld het effect te zijn van de uniforme over-hydratie van hun RBC’s, terwijl de RBC’s van de patiënten met beta thalassemie / Hb E ziekte een heterogene hydratie hebben.
De diagnose van de alfa-thalassemieën, die de ziekten H, Hb H -Constant-Spring (CS), HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart en HbEFBart-CS omvat, wordt meestal gesteld op grond van het vinden van de banden van Hb H en/of Hb Bart met of zonder Hb CS of Hb E van de verschillende Hb-analysemethoden, waarvan de uitvoering van de test enkele uren of dagen in beslag kan nemen. Als het cijfer van de hoge Hct/Hb ratio kan worden gebruikt om de alfa-thalassemieën te onderscheiden van andere thalassemieën en/of hemoglobinopathieën met nauwkeurigheid, zal het handiger en sneller zijn voor de clinici om de behandeling van de patiënten te plannen. Deze studie is bedoeld om de validiteit van de Hct / Hb-ratio bij een cut point van 3,25 of meer voor de diagnose van de alfa-thalassemieën, te weten Hb H-, H-CS-, HbAEBart-, HbAEBart-CS-, HbEFBart- en HbEFBart-CS-ziekten bij patiënten met klinisch en/of hematologisch verdachte thalassemie te verifiëren.

2.Patiënten en methode

Voor deze cross-sectionele studie werden de patiënten gerekruteerd van 20 jaar of ouder die de hematologiekliniek, afdeling geneeskunde, Maharat Nakhon Ratchasima Hospital, bezochten met de klinische of hematologische verdenking van thalassemie, d.w.z, chronische hemolytische anemie, hepatosplenomegalie, thalassemie, laag MCV, laag MCH of de microcytaire hypochromische anisopoikilocytotische rode bloedcel morfologie op het perifere bloed uitstrijkje. Alle patiënten werden routinematig onderzocht op CBC met de geautomatiseerde hematologie-analysator (Sysmex, XT 1800i®) en de Hb-analyse met de HPLC-methode (Bio-Rad instrument). De resultaten van de Hb-analyse die werd geïnterpreteerd door de goed opgeleide medisch technoloog en de hematoloog, werd gebruikt als de gouden standaard. De alfa-thalassemieën omvatten: Hb H-, Hb H-CS-, HbAEBart-, HbAEBart-CS-, HbEFBart- en HbEFBart-CS-ziekten.

De waarde van Hct/Hb-ratio werd berekend op basis van de CBC die op dezelfde dag van de Hb-analyse werd uitgevoerd. De ratio van 3.25 of meer werd gebruikt als het afkappunt om positief te zijn voor de alfa-thalassemieën.
De patiënten die gelijktijdig chronische lever- of nierziekten hadden, zwanger waren, of de vorige transfusie in minder dan 3 maanden hadden gehad, werden uitgesloten. De studie werd goedgekeurd door het ethisch comité van het Maharat Nakhon Ratchasima ziekenhuis.

3.Resultaten

Er waren 300 patiënten met klinische of hematologische verdenking van thalassemieën. Hun leeftijd varieerde van 20 tot 81 jaar, gemiddeld 38,5 + 15,6 jaar. De verhouding tussen mannen en vrouwen was 125 tot 175. Hun gemiddelden van Hb-concentratie, Hct, MCV en MCH waren respectievelijk 8,0 + 2,7 g%, 25,9 + 8,2 %, 64,7 + 8,9 fl en 20,0 + 1,8 pg. Van de 300 patiënten waren er 130 met de alpha-thalassemieën en 170 non-alpha-thalassemieën die bestonden uit 101 met beta thalassemie / hemoglobine E ziekte en 69 met hemoglobine E ziekte. De totale gemiddelde Hct / Hb verhouding was 3,260 + 0,368. De Hct/Hb verhouding van 3,25 of meer werd gevonden in 126 van 130 met de alfa-thalassemieën en 15 in de niet alfa-thalassemie groep; alle 15 gevonden in beta-thalassemie /Hb E ziekte, geen in Hb E ziekte groep. Het werd negatief gevonden in 4 met de alpha-thalassemieën, en in 155 met non-alpha- thalassemie; 86 met beta-thalassemie/Hb E ziekte en 69 met Hb E ziekte.
Van alle 69 patiënten met de ziekte van Hb E was de gemiddelde Hct/Hb-verhouding 2,87+0,14, verder had niemand de verhouding in de buurt van 3,25 of nucleated red blood cell (NRBC).
Tabel 1

×

Tabel 1.

sluiten

De sensitiviteit, de specificiteit, de positief voorspellende waarde (PPV), de negatief voorspellende waarde (NPV), de positieve likelihood ratio (PLR) en de negatieve likelihood ratio (NLR) werden berekend op 96.9% (95% betrouwbaarheidsinterval of CI: 92,3-99,1), 91,2% (95% CI: 85,9-95,0), 89,4% (95% CI: 83,1-93,9), 97,5% (95% CI: 93,7-99,3), 11,0 (95% CI: 6,8-17,8) en 0,03 (95% CI: 0,01-0,09), respectievelijk.
Van de 126 alfa-thalassemiepatiënten met een positief testresultaat hadden er 5 gekernde rode bloedcellen (NRBC), variërend van 1 tot 320 cellen, mediaan 6 cellen/100 WBC in het perifere bloed, terwijl geen van de 4 alfa-thalassemiepatiënten met een negatief testresultaat NRBC had.

Tabel 2

×

Tabel2

sluiten

Van beta-thalassemie/Hb E patiënten, hadden alle 15 gevallen met een positief testresultaat NRBC, variërend van 2 tot 480, mediaan 132.5 cellen/100 WBC terwijl 14 van de 86 met bèta-thalassemie/Hb E met negatief testresultaat (16,3%) NRBC hadden, variërend van 3 tot 248 cellen, mediaan 51,0/100 WBC. De eerstgenoemden hadden veel meer NRBC dan de laatstgenoemden met statistische significantie (p-waarde
Als de patiënten die NRBC hadden allemaal van elke groep werden uitgesloten, kon de nieuwe contingentietabel worden verkregen. De sensitiviteit, de specificiteit, de PPV en de NPV van Hct/Hb-verhouding van 3,25 of meer voor de diagnose van de alfa-thalassemieën konden opnieuw worden berekend nadat de patiënten met NRBC in elke groep waren uitgesloten, en wel als volgt: 96,8%, 100%, 100%, en 97,2%, respectievelijk.

4.Discussie

De Hct/Hb-ratio van 3,25 of meer kan de patiënten met alfa-thalassemieën meestal onderscheiden van beta-thalassemie/ Hb E en Hb E ziekten met de hoge sensitiviteit, specificiteit, PPV en NPV. Waarschijnlijk omdat de alfa-thalassemische RBC’s uniform minder dicht zijn dan de normale, terwijl de bèta-thalassemische RBC’s een brede dichtheidsverdeling hebben. De geringere dichtheid van de RBC’s van alfa-thalassemie kan de oorzaak zijn van het ten onrechte hoge Hct3 en het verlaagde Hb-gehalte in vergelijking met zowel het verlaagde als het verhoogde Hb-gehalte van bèta-thalassemische RBC’s.
Alle 15 bèta-thalassemie/Hb E-patiënten met het positieve testresultaat hebben NRBC (100%) in de periferie en het percentage positieve NRBC komt significant vaker voor dan 16,3% van de bèta-thalassemi /Hb E groep met negatief testresultaat. Wanneer de patiënten met positieve NRBC uit elke groep worden uitgesloten, veranderen de sensitiviteit, de specificiteit, de PPV en de NPV van respectievelijk 96,9 %, 91,2 %, 89,4 % en 97,5 % in respectievelijk 96,8 %, 100 %, 100 % en 97,2 %. Dit kan worden verklaard door het feit dat de talrijke NRBC die vaker bij bèta-thalassemie/Hb E-patiënten worden aangetroffen, ten onrechte een hoog Hct kunnen veroorzaken dat door de geautomatiseerde hematologieanalysator wordt bepaald, waardoor de Hct/Hb-verhouding in sommige gevallen met bèta-thalassemie/Hb E wordt verhoogd.
Daarnaast wordt, wanneer de Hct/Hb-verhouding van de alfa-thalassemie-1-kenmerken wordt berekend, deze ook hoog gevonden, 3,317 voor mannen en 3,324 voor vrouwen6. Als het samenvalt met bèta-thalassemie/Hb E, kan het ook de oorzaak zijn van de hoge Hct /Hb-verhouding in deze groep. Dit kan de onderliggende reden zijn waarom een paar gevallen van de bèta-thalassemie/Hb E-patiënten een vals-positief testresultaat hebben. De rol van de alfa thalassemie-1 hetrozygositeit in gevallen van beta thalassemie/Hb E in dit aspect moet worden opgehelderd in de verdere studie.Vier van de 130 gevallen (3,0 %) van de alfa-thalassemieën hebben het negatieve testresultaat zonder de juiste verklaring tot nu toe.

5.Samenvatting

De Hct/Hb ratio van 3.25 of meer heeft een sterk diagnostisch vermogen om de alfa-thalassemieën te onderscheiden van beta-thalassemie/Hb E en Hb E ziekten in de gevallen van verdachte thalassemie met de sensitiviteit, de specificiteit, de positief voorspellende waarde, de negatief voorspellende waarde, de positief likelihood ratio en de negatief likelihood ratio van 96,9%, 91,2%, 89,4%, 97,5%, 11,0 en 0,03.

  1. Weatherall MS, Sherry KM. An evaluation of the Spuncrit™ infra-red analyzer for measurement of haematocrit. Clin Lab Haem 1997; 19: 183-86.
  2. Insiripong S, Supattarobol T, Jetsrisuparb A. Comparison of hematocrit / hemoglobin ratios in subjects with alpha-thalassemia, with subjects having chronic kidney disease and normal subjects. Southeast Asian J Trop Med Public Health 2013; 44: 707-11.
  3. Schrier SL, Rachmilewitz E, Mohandas N. Cellular and membrane properties of alpha and beta thalassemic erythrocytes are different: implication for differences in clinical manifestations. Blood 1989; 74: 2194-202.
  4. Bunyaratvej A, Fucharoen S, Greenbaum A, Mohandas N. Hydration of red cells in alpha and beta thalassemias differs. A useful approach to distinguish between these red cell phenotypes. Am J ClinPathol 1994; 102: 217-22.
  5. Thomas L. Hematocriet (HCT). In: Thomas L, ed. Klinische laboratoriumdiagnostiek, gebruik en beoordeling van klinische laboratoriumresultaten. Frankfurt/Main: TH-Books-Verl.-Ges, 1998: 479-82.
  6. Pornpatkul M, Wasi P, Na-Nakorn S. Hematologic parameters in obligatory alpha-thalassemia. J Med Assoc Thai 1969; 52: 801-11.