IgG4-RD 患者において、IgG4+ ANAは検出されず、IgG1+および IgG2+ ANAを検出した（図1，2）． また、IgG4+ ANAは非常に稀であり、IgG1/2/3+ ANAは全身性自己免疫疾患で検出されることがわかった（図2、図3）。 SSやPMでは、抗SS-A/Ro抗体、抗アミノアシルtRNA合成酵素抗体、抗シグナル認識粒子抗体などの「抗サイトプラズム」抗体が知られている。 サブクラスに基づくANA検査では、IgG1/2/3+抗細胞質抗体が検出されるが、IgG4は検出されない（図2、3）。

全身性自己免疫疾患では血清IgG4/IgG比が5 %未満と低いためか、IgG4+ANAは非常にまれである（表2）。 しかし、IgG4-RDでは血清IgG4/IgG比が高い（43 %）にもかかわらず、IgG4+ ANAは検出されなかった。 このことは、IgG4そのものがANAを作るのに使われていないことを示唆している。

全身性自己免疫疾患におけるANAサブクラスについては、いくつかの研究がなされている。 Zoualiらは、SLEと混合性結合組織病では、抗二本鎖DNA（dsDNA）抗体がIgG1/3優勢で、抗RNP抗体がIgG2優勢であることを報告した。 SLEの抗Sm、抗RNP、抗dsDNA、SSの抗SS-A/Ro、抗SS-B/La、SScの抗Scl-70はIgG1優位であると報告されている。 しかし、いずれの報告でもIgG4型ANAはほとんど検出されない。 Rigopoulouらは原発性胆汁性肝硬変の症例を検討し、ANAはIgG1/3優位であるが、IgG4はサブクラスベースのIIFでは検出されないことを明らかにした。 先行研究ではIgG1やIgG3が優位であったのに対し、本研究でIgG2型ANAが顕著に多かったのは、研究によって2次抗体の親和性が異なるためかもしれない。 サブクラスベースのANA検査では、2次抗体が異なるため、サブクラス間で力価を正確に比較することはできない。 過去の研究では、IgG2型ANAは中程度のレベルでも検出されたが、IgG4型ANAは常に陰性または低レベルであった。 本研究ではIgG4型ANAもほとんど検出されなかった。

自己免疫性膵炎（AIP）はIgG4-RDに見られる臓器特異的な疾患である。 AIPでは抗ラクトフェリン抗体や抗炭酸脱水酵素II抗体など、さまざまな自己抗体が認められる。 Asadaらは、AIPに抗膵臓分泌型トリプシンインヒビター（PSTI）抗体を見出し、抗PSTI抗体価は血清IgG4値と平行して移動することを示しました 。 IgG4 値は IgG4-RD の疾患活動性と平行して変化することが、我々の先行研究を含む多くの研究により報告されている . 浅田らは、抗PSTIが病態の重要な因子である可能性を考えていた。 しかし、抗IgG1抗体あるいは抗IgG4抗体を2次抗体としてサブクラスのイムノブロット解析を行ったところ、そのサブクラスはIgG4ではなくIgG1であることが判明した。 IgG4-RD患者ではIgG4型の自己抗体ができにくい可能性がある

しかし、一部の自己免疫疾患ではIgG4型の自己抗体が見られると報告されている。 Rockらは、落葉状天疱瘡患者の血清から検出される抗デスモグレイン（Dsg）-1抗体のうちIgG4が最も多く（100 %）、Balb/cマウスを用いてIgG4型抗Dsg-1抗体の病原性を明らかにしたと報告しています。 また、尋常性天疱瘡の抗 Dsg-3 抗体は IgG4 が優勢であった。 Beck らは、特発性膜性腎症の抗ホスホリパーゼ A2 受容体 (PLA2R) 抗体が主に IgG4 であることをイムノブロッティングにより示しました . 抗好中球細胞質抗体(ANCA)はIgG4が優勢であると報告されている。 多発性血管炎性肉芽腫症の C-ANCA（IIF），Proteinase-3（PR3）-ANCA（ELISA），myeloperoxidase（MPO）-ANCA（ELISA），propylthiouracil 誘発血管炎の MPO-ANCA（ELISA）は IgG1/4 優性であった． また、IIF の C-ANCA や ELISA の PR3-ANCA は IgG4 が主体であることも報告されている。 Engelmann らは、RA では抗環状シトルリン化ペプチド（CCP）抗体が IgG1/4 優性であることを報告している。 しかし、血管炎や RA における IgG4 は病態生理的に重要でない可能性がある。 ANCA の機能解析では、IgG1 と IgG3 PR3-ANCA は好中球を刺激するが、IgG4 PR3-ANCA は好中球に対して弱い刺激性であった。 HLA-DR4 共有のエピトープを持つ RA 患者では、Engelmann らは IgG3 抗CCP 抗体が優勢であることを見出し、IgG3 型抗体が RA の病態生理においてより重要である可能性があると考えた。 IgG4 は補体や抗体依存性細胞傷害を活性化する能力が低いため、IgG4 は自己免疫疾患における組織損傷のメカニズムに関与していないと考えられる。 ANCA関連血管炎では、IgG4型ANCAは他のサブクラスANCAと比較して、病原性が低いと考えられている。 IgG4 型と他のサブクラス ANCA の親和性は等しいはずですが、補体活性化の能力が異なるため、IgG4 型 ANCA の役割は他のサブクラス ANCA の役割よりも小さくなる可能性があります。 一方、IgG4型抗PLA2R抗体は親和性が高く、特発性膜性腎症では病原性があると考えられている 。 IgG4抗PLA2R抗体が補体活性化能を持たずに病原性を発揮できるのは、糸球体基底膜の電気的バリアーが破壊されることで病原性が発揮されるためと考えられる。 IgG4は抗Dsg-1/3抗体、抗PLA2R抗体、抗CCP抗体、ANCAと関連するが、AIPでは抗PTSI抗体、IgG4-RDや全身性自己免疫疾患ではANAとは関連がない（表3）。 この非対称性は、IgG4が未知ではあるが一定の生理的あるいは病的機能を有していることを示唆している。

Table 3 IgG4-RDと自己免疫疾患における自己抗体の優勢なサブクラスのまとめ

今回の研究では、一部の症例でANAパターンはIgGサブクラス間で異なっていた（図3、図4）。 複数の自己抗体を有する症例では、利用されるサブクラスが自己抗原によって異なる。 これは、各IgGサブクラスが、それぞれの抗原のスペクトルをカバーすることを好むという仮説によって説明することができる。 ANAでIgG4がほとんど検出されないのは、IgG4がANA検査で検出される抗原、すなわち核抗原や関連する微生物抗原をカバーしないためかもしれない。 IgG2サブクラスの選択的欠損は、しばしばNeisseria meningitidisやStreptococcus pneumoniaeによる細菌感染と関連しており、IgG2はこれらの細菌からの保護に関与していると考えられている。 一方、IgG4については、その役割が十分に解明されていない。 もしIgG4が何らかの微生物の種類と関係があり、Dsg-1/3、PLA2R、PR3、シトルリン化蛋白のように微生物抗原と自己抗原が類似していれば、これらの蛋白に対するIgG4型抗体が優位に生成されていることが説明できる。

我々の結果はIgG4-RDが自己免疫疾患でないこと、またIgG4-RDにおける血清IgG4高値は単なる非特異性であることを示唆している。 本研究のサブクラスベースのANA検査は，HEp-2細胞の核抗原と細胞質抗原の両方をカバーしており，修飾されていないユビキタス抗原を幅広くスクリーニングすることができる。 しかし、この分析には限界がある。シトルリン化タンパク質や臓器特異的抗原のような修飾抗原はスクリーニングされていない。 また、本研究では症例数が限られている。 IgG4-RDには、未知のIgG4型自己抗体が存在する可能性がある。 さらなる解析が必要である

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