Bei IgG4-RD-Patienten fanden wir keine IgG4+ ANA, aber IgG1+ und IgG2+ ANA (Abb. 1 und 2). Wir stellten auch fest, dass IgG4+ ANA sehr selten waren, während IgG1/2/3+ ANA bei systemischen Autoimmunerkrankungen nachgewiesen wurden (Abb. 2 und 3). Autoantikörper mit zytoplasmatischen Mustern im Fluoro-HepANA™-Test sind keine exakten ANA; „anti-zytoplasmatische“ Antikörper – z. B. Anti-SS-A/Ro, Anti-Aminoacyl-tRNA-Synthetase und Anti-Signalerkennungspartikel-Antikörper – sind bei SS und PM bekannt. Subklassen-basierte ANA-Tests fanden IgG1/2/3+ Anti-Zytoplasma-Antikörper, aber nicht IgG4 (Abb. 2, 3).

IgG4+ ANA ist bei systemischen Autoimmunerkrankungen sehr selten, möglicherweise weil die Serum-IgG4/IgG-Verhältnisse bei diesen Erkrankungen niedrig sind, weniger als 5 % (Tabelle 2). Bei der IgG4-RD wurde jedoch trotz hoher IgG4/IgG-Serumquotienten (43 %) kein IgG4+ ANA nachgewiesen. Dies deutet darauf hin, dass IgG4 selbst nicht zur Herstellung von ANA verwendet wird.

In mehreren Studien wurden ANA-Subklassen bei systemischen Autoimmunerkrankungen untersucht. Zouali et al. berichteten, dass bei SLE und gemischten Bindegewebserkrankungen Anti-Doppelstrang-DNA (dsDNA)-Antikörper IgG1/3-dominant waren und Anti-RNP IgG2-dominant. Anti-Sm, Anti-RNP und Anti-dsDNA bei SLE, Anti-SS-A/Ro und Anti-SS-B/La bei SS und Anti-Scl-70 bei SSc sind Berichten zufolge IgG1-dominant. ANA des Typs IgG4 wurde jedoch in allen oben genannten Berichten kaum nachgewiesen. Rigopoulou et al. untersuchten Fälle von primärer biliärer Zirrhose und stellten fest, dass ANA vom IgG1/3-Typ dominierten, aber IgG4 durch subklassenbasierte IIF nicht nachgewiesen wurde. Der Grund dafür, dass ANA vom Typ IgG2 in unserer Studie auffallend häufig vorkamen, während in früheren Studien IgG1 und IgG3 vorherrschten, könnte darin liegen, dass die Affinitäten der zweiten Antikörper in den verschiedenen Studien unterschiedlich waren. Bei dem auf Unterklassen basierenden ANA-Test können die Titer nicht genau zwischen den Unterklassen verglichen werden, da die zweiten Antikörper unterschiedlich sind. In früheren Studien wurde ANA des Typs IgG2 auch in mäßigen Konzentrationen nachgewiesen, während ANA des Typs IgG4 konstant negativ oder in niedrigen Konzentrationen war. In unserer Studie wurden ANA vom Typ IgG4 ebenfalls kaum nachgewiesen.

Die autoimmune Pankreatitis (AIP) ist eine organspezifische Störung, die bei IgG4-RD auftritt. Bei der AIP treten verschiedene Autoantikörper auf, wie z. B. Anti-Lactoferrin- und Anti-Carbonsäureanhydrase-II-Antikörper. Asada et al. fanden bei AIP Antikörper gegen den sekretorischen Trypsininhibitor der Bauchspeicheldrüse (PSTI) und zeigten, dass sich die Titer der Anti-PSTI-Antikörper parallel zu den IgG4-Serumspiegeln bewegen. Der IgG4-Spiegel verändert sich parallel zur Krankheitsaktivität der IgG4-RD, wie in vielen Studien, einschließlich unserer früheren Studie, berichtet wurde. Asada et al. vermuteten, dass Anti-PSTI ein wichtiger Faktor in der Pathophysiologie sein könnte. Immunoblotting von Unterklassen mit Anti-IgG1 oder Anti-IgG4 als zweite Antikörper zeigte jedoch, dass die Unterklasse nicht IgG4, sondern IgG1 war. Möglicherweise sind Autoantikörper vom Typ IgG4 bei IgG4-RD-Patienten nur schwer zu produzieren.

Bei einigen Autoimmunkrankheiten werden jedoch auch Autoantikörper vom Typ IgG4 nachgewiesen. Rock et al. berichteten, dass IgG4 der häufigste (100 %) der Anti-Desmoglein (Dsg)-1-Antikörper war, die in Seren von Patienten mit Pemphigus foliaceus nachgewiesen wurden, und zeigten die Pathogenität von Anti-Dsg-1-Antikörpern vom IgG4-Typ anhand von Balb/c-Mäusen. Anti-Dsg-3-Antikörper bei Pemphigus vulgaris waren ebenfalls IgG4-prädominant. Beck et al. zeigten durch Immunoblotting, dass Anti-Phospholipase-A2-Rezeptor (PLA2R)-Antikörper bei idiopathischer membranöser Nephropathie hauptsächlich aus IgG4 bestanden. IgG4 ist Berichten zufolge bei anti-neutrophilen zytoplasmatischen Antikörpern (ANCA) vorherrschend. C-ANCA (IIF), Proteinase-3 (PR3)-ANCA (ELISA) und Myeloperoxidase (MPO)-ANCA (ELISA) bei Granulomatose mit Polyangiitis (GPA) und MPO-ANCA (ELISA) bei Propylthiouracil-induzierter Vaskulitis waren IgG1/4-dominant. In ähnlicher Weise berichteten andere, dass IgG4 bei Vaskulitiden die meisten C-ANCA (IIF) und PR3-ANCA (ELISA) ausmachte. Engelmann et al. berichteten, dass die Antikörper gegen zyklische citrullinierte Peptide (CCP) bei RA eine IgG1/4-Dominanz aufweisen. Allerdings ist IgG4 bei Vaskulitiden und RA möglicherweise pathophysiologisch nicht von Bedeutung. In funktionellen Analysen von ANCA konnten IgG1 und IgG3 PR3-ANCA neutrophile Granulozyten stimulieren, während IgG4 PR3-ANCA nur eine schwache Stimulanz für neutrophile Granulozyten darstellte. Bei RA-Patienten mit HLA-DR4-geteiltem Epitop stellten Engelmann et al. fest, dass IgG3-Anti-CCP-Antikörper vorherrschend sind, und vertraten die Ansicht, dass Antikörper vom Typ IgG3 für die Pathophysiologie der RA wichtiger sein könnten. Da IgG4 kaum in der Lage ist, Komplemente und antikörperabhängige zelluläre Zytotoxizität zu aktivieren, ist es unwahrscheinlich, dass IgG4 an den Mechanismen der Gewebeschädigung bei Autoimmunkrankheiten beteiligt ist.

Interessanterweise scheint es pathogene und nicht-funktionelle Autoantikörper vom Typ IgG4 zu geben. ANCA vom Typ IgG4 gelten im Vergleich zu anderen ANCA-Unterklassen bei ANCA-assoziierter Vaskulitis als weniger pathogen. Die Affinitäten zwischen ANCA vom IgG4-Typ und anderen Unterklassen sollten gleich sein, aber die Fähigkeiten der Komplementaktivierung sind unterschiedlich, so dass die Rolle der ANCA vom IgG4-Typ weniger bedeutend sein kann als die der anderen Unterklassen. Andererseits hat der IgG4-Anti-PLA2R-Antikörper eine hohe Affinität und wird bei der idiopathischen membranösen Nephropathie als pathogen angesehen. Der Grund, warum IgG4 Anti-PLA2R-Antikörper Pathogenität ausüben können, ohne Komplement zu aktivieren, könnte darin liegen, dass die Pathogenität durch die Zerstörung der elektrischen Barrieren der glomerulären Basalmembran hervorgerufen wird.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Verwendungsraten von IgG4 bei den verschiedenen Autoantikörpern und Krankheiten unterschiedlich sind. IgG4 ist mit Anti-Dsg-1/3-, Anti-PLA2R-, Anti-CCP-Antikörpern und ANCA assoziiert, aber nicht mit Anti-PTSI-Antikörpern bei AIP oder ANA bei IgG4-RD und systemischen Autoimmunerkrankungen (Tabelle 3). Diese Asymmetrie deutet darauf hin, dass IgG4 unbekannte, aber bestimmte physiologische oder pathologische Funktionen hat. Weitere Analysen sind erforderlich, um seine Rolle zu ermitteln.

Tabelle 3 Zusammenfassung der vorherrschenden Unterklassen bei Autoantikörpern in IgG4-RD und Autoimmunerkrankungen

In der vorliegenden Studie beobachteten wir, dass sich die ANA-Muster in einigen Fällen zwischen den IgG-Unterklassen unterscheiden (Abb. 3, 4). Wenn ein Fall mehrere Autoantikörper aufweist, unterscheiden sich die verwendeten Subklassen nach Autoantigenen. Dies kann durch die Hypothese erklärt werden, dass jede IgG-Subklasse bevorzugt ihr eigenes Antigenspektrum abdeckt. Der Grund, warum wir bei ANA kaum IgG4 gefunden haben, könnte darin liegen, dass IgG4 keine Antigene abdeckt, die mit dem ANA-Test nachgewiesen werden können, d. h. nukleäre Antigene oder verwandte mikrobielle Antigene. Ein selektiver Mangel an IgG2-Unterklassen wird häufig mit bakteriellen Infektionen durch Neisseria meningitidis und Streptococcus pneumoniae in Verbindung gebracht, so dass man davon ausgeht, dass IgG2 eine Rolle beim Schutz vor diesen Bakterien spielt. Die Rolle von IgG4 ist noch nicht ausreichend geklärt. Wenn IgG4 mit irgendeinem Mikroorganismustyp verwandt ist und wenn die Antigene der Mikroorganismen und die Autoantigene ähnlich sind, wie bei Dsg-1/3, PLA2R, PR3 und citrullinierten Proteinen, würde dies erklären, warum Antikörper vom Typ IgG4 gegen diese Proteine dominant gebildet wurden.

Unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass IgG4-RD keine Autoimmunerkrankung ist und dass hohe IgG4-Serumspiegel bei IgG4-RD nur unspezifisch sind. Die auf Unterklassen basierenden ANA-Tests in dieser Studie deckten sowohl nukleäre als auch zytoplasmatische Antigene in HEp-2-Zellen ab und können ein breites Spektrum an unveränderten ubiquitären Antigenen untersuchen. Diese Analyse hat jedoch Einschränkungen: modifizierte Antigene wie citrullinierte Proteine und organspezifische Antigene wurden nicht untersucht. Die Zahl der Fälle in dieser Studie ist begrenzt. Es besteht weiterhin die Möglichkeit, dass unbekannte Autoantikörper vom Typ IgG4 bei IgG4-RD gefunden werden. Eine weitere Analyse ist erforderlich.