Abstract

Rijst is een van ’s werelds belangrijkste voedingsgewassen, en het verbouwen ervan is een belangrijke bezigheid in Anambra State, Nigeria. Deze rijstboeren worden blootgesteld aan verschillende agentia die hen predisponeren tot cutane mycosen. Het doel van dit werk was rijstboeren te screenen op laesies die wijzen op cutane mycose en schimmelagentia die met de infectie in verband worden gebracht, te isoleren en te identificeren. Dit onderzoek werd uitgevoerd tussen november 2009 en juni 2011 in Anambra State, Nigeria. Klinische monsters van 201 boeren met laesies die op cutane mycosen wezen, werden verwerkt en de organismen werden geïdentificeerd. Vragenlijsten werden gebruikt om andere noodzakelijke gegevens te verkrijgen en werden statistisch geanalyseerd. Van de 2.580 gescreende rijstboeren vertoonden 201 (7,79%) positieve laesies. De volgende organismen werden aangetroffen: Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp, Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum, en Penicillium pinophilum. Aan het einde van dit werk werd onychomycosis waargenomen als de meest prevalente met nietmatofyt schimmels nu zeer belangrijke agentia van cutane mycosen onder rijstboer.

1. Inleiding

Rijstteelt is een van de belangrijkste beroepen in het noordelijke deel van Anambra State, Nigeria. Dit graan, een van de belangrijkste voedingsgewassen ter wereld, wordt geteeld in moerassige laaggelegen gebieden met veel water, of op een plateau of in heuvelachtige streken waar de natuurlijke regenval voor voldoende water zorgt. De voorbereiding van het land, het ploegen van het veld, het gebruik van mest, meststoffen, pesticiden en herbiciden, het zaaien van rijstzaden, het uitplanten van rijstzaailingen en het oogsten worden door deze boeren handmatig gedaan, waardoor ze vatbaar zijn voor cutane mycosen.

Cutane mycosen zijn pathogene schimmelinfecties die de keratinelagen van de huid en de aanhangsels (nagels, haar) aantasten. Ze tasten de levende weefsels niet aan. Deze infecties worden hoofdzakelijk veroorzaakt door dermatofyten en gisten. Naast de algemeen aanvaarde ziekteverwekkers worden nu ook niet-matofyt schimmels belangrijk bij cutane mycosen.

Er zijn berichten over een schrikbarende toename van de incidentie van schimmelinfecties in de afgelopen tijd. Deze zijn in verband gebracht door Terrell , Meis en Verweij , en Rolston met medische behandelingen, immuun-gecompromitteerde omstandigheden, ondervoeding, bepaalde operaties, en zware metalen zoals kwik. Andere factoren die volgens Gugnani , Shenoi e.a. , en Oyeka en Eze schimmelinfecties kunnen veroorzaken zijn persoonlijke hygiëne, druk leven en slechte hygiënische omstandigheden, grootte van het gezin, leeftijd, warm vochtig klimaat, sociaal-economische status, en internationale reizen. Landarbeiders die worden blootgesteld aan verschillende irriterende stoffen, namelijk modder, koeienmest of andere soorten mest, kunstmest, herbiciden, pesticiden, stof en grond (die wordt beschouwd als een reservoir van de meeste pathogene organismen, waaronder dermatofytische en niet-matofytische schimmels) zijn ook vatbaar voor schimmelinfecties. Dit kan echter niet nog steeds worden benadrukt als de besmettelijke aard onder dierlijke gemeenschappen, hoge kosten van behandeling, moeilijk te controleren, en de gevolgen voor de volksgezondheid verklaren hun grote belang . Vandaar dat deze studie werd opgezet om de dermatofyten en niet-matofyten schimmels geassocieerd met cutane mycosen bij rijstboeren in Anambra State, Nigeria te rapporteren.

2. Materialen en Methode

Tweeduizend, vijfhonderd en tachtig (2.580) rijstboeren, inclusief volwassenen en kinderen werden gescreend op laesies die duiden op cutane mycosen. De laesies werden geëvalueerd op jeuk, schilfering, fissuren, roodheid van de huid, en dystrofie van de nagels. Vragenlijsten werden gebruikt om informatie te verkrijgen over geslacht, leeftijd, plaats van de laesie, opleidingsniveau, grootte van het gezin, aard van de woonaccommodatie van het gezin, aanwezigheid van huisdieren/huisdieren in huis, en duur van de laesie, indien de boer mest, kunstmest, herbiciden of pesticiden gebruikt.

2.1. Verzameling van klinische monsters

De laesies werden gereinigd met 70% alcohol, en schraapsel aseptisch verzameld uit de buurt van de oprukkende randen van deze laesies met een steriele scalpel. Vinger- en teennagelmonsters werden verzameld met behulp van nagelklemmen nadat de nagels waren gereinigd met 70% alcohol. De monsters werden verzameld in monsterzakken, overgebracht naar het microbiologisch laboratorium, Nnamdi Azikiwe University, Awka, Nigeria, en binnen 2 uur verwerkt. Swabs werden ook verzameld van teen/vinger web na reiniging met 70% alcohol met behulp van een steriele swab stick.

2.2. Verwerking van het monster

Directe microscoopglaasjes werden bereid met 20% KOH voor sommige delen van huidschraapsel en nagelknipsels. De resterende porties en teen/vinger web swabs werden geënt op duplicaat platen met Sabouraud Dextrose Agar (SDA) (Biotech) aangevuld met 0.05 mg/mL chlooramfenicol en 0.5 mg/mL cycloheximide. Een andere duplo-plaat met alleen 0,05 mg/mL chlooramfenicol werd ook met het monster geïnoculeerd. De platen werden gedurende 4 weken bij 27°C geïncubeerd. Positieve platen met schimmelgroei werden gezuiverd door de verschillende kolonies te subculturen in verse SDA slants zonder antibiotica.

2.3. Identificatie van de isolaten

Isolaten werden geïdentificeerd op basis van een gedetailleerde studie van hun bruto en microscopische morfologie en vergeleken met de standaardbeschrijving gegeven door Campbell en Stewart , Guy St-Germain en Richard , en De Hoog et al. . Tien van de isolaten werden geïdentificeerd met behulp van sequencing van de interne getranscribeerde spacer-regio van het ribosomale DNA van het isolaat in het Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlijn, Duitsland.

2.4. Statistische Analyse

De resultaten en gegevens verkregen uit de vragenlijst verspreid onder de getroffen rijstboeren werden statistisch geanalyseerd met behulp van chi-kwadraat, Kruskal-Wallis, en Mann-Whitney tests. De resultaten werden getest op een significant niveau van 0,05.

3. Resultaten

Op een totaal van 2.580 boeren die werden gescreend op cutane infecties, bleken 201 (7,79%) personen laesies te hebben die wezen op een schimmelinfectie. De verzamelde monsters werden positief bevonden door KOH en kweek. Het KOH preparaat toonde fragmenten van septate hyphae in sommige monsters en niet-septate in andere. Onder de studiepopulatie met huidinfectie waren 78 (38,81%) mannen, terwijl 123 (61,19%) vrouwen waren. Negentig (44,78%) van de 201 monsters waren afkomstig van een infectie van de vingernagels, 45 (22,39%) van een infectie van de teennagels, 27 (13,43%) van een infectie van de glacieuze huid, 20 (9,95%) van een infectie van de voeten, 12 (5,97%) van een infectie van het vingeren teenweb, en 7 (3,48%) van een infectie van de hoofdhuid. Tabel 1 toont de verdeling van cutane mycosen volgens plaats van infectie, geslacht en leeftijd van de rijstboeren. Analyse van gevallen van infectie volgens de leeftijd van de rijstboeren toonde aan dat infectie statistisch significant was met leeftijd () en meer werd waargenomen in de leeftijdsgroep 16-30 jaar (47,76%), gevolgd door de leeftijdsgroep 31-45 jaar (35,82%) (Tabel 1). Infectie werd ook meer gerapporteerd bij gezinnen die in een overvolle accommodatie woonden (), boeren die faciliteiten deelden () en degenen die huisdieren/huisdieren hielden ().

Plaats van infectie Aantal verzamelde monsters Sekse Leeftijd
mannen vrouwen <15 16-30 31-45 >45
vingernagels 90 (44.78%) 19 71 1 48 32 9
Teennagels 45 (22.39%) 20 25 23 16 6
Gelabberde huid 27 (13.43%) 10 17 15 8 4
Voet 20 (9.95%) 16 4 6 10 4
Vinger/tenen web 12 (5.97%) 8 4 4 6 2
Scalp 7 (3.48%) 5 2 7
Totaal (geen) 201 78 123 8 96 72 25
Totaal (%) 100 38.81 61.19 3.98 47.76 35.82 12.44
Tabel 1
Distributie van cutane mycosen volgens plaats van infectie, geslacht, en leeftijd van de rijstboeren.

Er werden in totaal 225 schimmelisolaten, bestaande uit 48 (21,33%) dermatofyten (tabel 2) en 177 (78,67%) niet-matofyten schimmels (tabel 3) uit de monsters gehaald. T. rubrum (11,11%) en A. candidus (16,44%) waren respectievelijk de meest frequent geïsoleerde dermatofytische en niet-matofytische schimmels. De isolaten geïdentificeerd in het Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlijn, Duitsland, behoorden tot Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum, en Fusarium-soorten.

Soorten dermatofyten Aantal isolaten Percentage voorkomen (%)
Microsporum audouinii 5 2.22
Microsporum ferrugineum 2 0,89
Trichophyton megnini 6 2.67
Trichophyton tonsurans 10 4.44
Trichophyton rubrum 25 11.11
Totaal 48 21.33
Tabel 2
Soorten van geïsoleerde dermatofyt schimmels en hun procentueel voorkomen.

Soorten niet-dermatofyten Aantal isolaten Percentage voorkomen (%)
Aspergillus terrus 24 10.67
Aspergillus candidus 37 16.44
Aspergillus scleriotorum 26 11.56
Aspergillus niger 11 4,89
Aspergillus flavus 26 11.56
Scopulariopsis sp. 18 8
Chrysosporium sp. 12 5.33
Eupenicillium javanicum 2 0.89
Fusarium sp. 11 4.89
Penicillium aculeatum 4 1.77
Penicillium pinophilum 6 2.67
Totaal 177 78.67
Tabel 3
Soorten van geïsoleerde niet-matofyt schimmels en hun procentueel voorkomen.

4. Discussie

De huidige studie dient om het volksgezondheidsbelang te benadrukken van schimmelinfectie bij rijstboeren in Anambra State, Nigeria. Infectie van de vinger- en teennagels was meer dan die van andere lichaamsdelen en kwam meer voor bij vrouwen. De hogere prevalentie van deze infectie bij vrouwen kan worden toegeschreven aan het feit dat vrouwen meer van hun vingers gebruiken bij het verbouwen en oogsten van rijst dan mannen. Dit komt overeen met de verslagen van El Sayed et al. en Souza et al. Souza et al. meldden dat 72,25% van de gevallen van onychomycose uit hun studie in Japan bij vrouwen voorkwamen, terwijl Kazemi en Charles een hogere prevalentie van deze infectie bij mannen meldden, hoewel hun studies niet bij rijstboeren plaatsvonden. Dit wordt ook ondersteund door de bevindingen van Blank et al. en Shenoi et al. die een hoog percentage van nagelinfectie onder rijstveldwerkers in India rapporteerden.

Scalp infectie werd alleen gezien bij kinderen en kan waarschijnlijk zijn overgedragen via de geïnfecteerde handen van hun moeders en andere relaties. Mannen (71,43%) hadden meer van de infectie dan de vrouwen (28,57%). Oyeka deed dezelfde waarneming en bracht het in verband met de lage persoonlijke hygiëne van mannen in vergelijking met hun vrouwelijke tegenhangers.

Landbouwers in de leeftijdsgroep 16-30 jaar registreerden meer infecties dan andere leeftijdsgroepen en dit zou verklaard kunnen worden door het feit dat deze leeftijdsgroep actiever betrokken is bij de rijstteelt dan de jongere en oudere leeftijdsgroepen en de neiging heeft om meer te zweten.

De overdraagbaarheid van schimmelinfecties onder gezinsleden is uitgebreid gerapporteerd in Nigeria en ondersteunt de bevindingen van deze studie waar een hoger infectiepercentage werd gerapporteerd onder gezinnen die in overbevolkte accommodatie woonden (), die faciliteiten deelden () en die huisdieren/huisdieren hielden (). Deze faciliteiten en dieren kunnen fungeren als reservoir van schimmels/sporen waardoor de infectie gemakkelijk kan worden overgedragen op boeren.

Een belangrijke observatie tijdens dit onderzoek was dat rijstboeren noch laarzen, noch handhandschoenen gebruikten tijdens hun werk op de boerderij, omdat de laarzen in de modder wegzakken en volgens deze boeren hun werksnelheid verminderen. Het niet gebruiken van beschermende voet- en handkleding stelt deze boeren bloot aan agentia van infecties. Een soortgelijke observatie werd gedaan door Shenoi et al. Ook werd een slechte persoonlijke hygiëne waargenomen bij deze boeren, een factor waarvan bekend is dat hij mensen vatbaar maakt voor allerlei soorten infecties, waaronder schimmelinfecties.

Trichophyton rubrum was de meest voorkomende dermatofyt (11,11%) in deze studie. Het was het enige schimmelorganisme dat op alle plaatsen van het lichaam werd aangetroffen, behalve op het vinger-tenen web. Dit komt overeen met het werk van andere onderzoekers die T. rubrum rapporteerden als de meest voorkomende etiologische verwekker van dermatofytosen op verschillende plaatsen van het lichaam. Deze studie toonde ook aan dat naast de cutane schimmelinfectie veroorzakende dermatofyten, niet-matofyt schimmels zeer belangrijke etiologische agentia van huidinfectie aan het worden zijn. Schimmels die niet tot de matofyten behoren, werden in deze studie vaker geïsoleerd (78,67%) dan de gewone dermatofyten (31,33%), vooral bij onychomycose. Hoewel sommige onderzoekers hadden gemeld dat dermatofyten verantwoordelijk zijn voor de meerderheid van de gevallen van onychomycose, hebben epidemiologische studies ook aangetoond dat Aspergillus sp. opkomende schimmelverwekkers van teennagelonychomycose zijn. Aspergillus sp. komt nu op de tweede plaats na Scopulariopsis sp. en vervolgens Fusarium solani in niet-matofytische onychomycose. Aspergillus sp. was de meest voorkomende niet-matofyt schimmel in deze studie, gevolgd door Scopulariopsis sp. en dan Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum, en Eupenicillium javanicum die in dit werk geïsoleerd werden, waren volgens de literatuur niet betrokken bij huidinfectie. Zij worden vaak uit de bodem geïsoleerd en zijn betrokken bij de productie en versuikering van verschillende industriële enzymen zoals B-D-mannase, endoglucanase, -glucosidase en pectinase en bij de versuikering van polysacchariden van gerst, haver- en tarwestro en Solka-Floc . Het vermogen van deze organismen om de bovengenoemde enzymen te produceren zou hun vermogen kunnen verklaren om ook de keratineachtige delen van de huid af te breken. De hoge frequentie in isolatie van niet-matofyt schimmels zoals waargenomen in deze studie zou kunnen worden toegeschreven aan hun regelmatige isolatie uit water, lucht, bodem en vegetatie zoals vastgelegd door Oyeka en Okoli en Cribier en Bakshi . Hierdoor is de kans groot dat ze in contact komen met de menselijke huid, wat leidt tot opportunistische infecties.

5. Conclusie

Aan het eind van deze studie werd vastgesteld dat cutane schimmelinfectie van de nagels het meest voorkwam. Men moet dus voorzichtig zijn om de verspreiding van deze infectie tegen te gaan, want deze boeren delen de openbare voorzieningen met de massa. Er werd ook opgemerkt dat naast dermatofyten, schimmels zonder matofyten nu zeer belangrijke etiologische agentia van huidinfectie zijn, vooral in onychomycosis. Verdere tests zullen worden uitgevoerd om de pathogeniciteit te bepalen van Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum, en Eupenicillium javanicum die in dit werk zijn teruggevonden.

Erkenning

De auteurs danken Dr. Yvonne Graeser van het Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlijn, Duitsland, die geholpen heeft bij de identificatie van de schimmelisolaten.