Abstract

Grâul de orez este una dintre cele mai importante culturi alimentare din lume, iar cultivarea sa este o ocupație majoră în statul Anambra, Nigeria. Acești cultivatori de orez sunt expuși la diverși agenți care îi predispun la micoze cutanate. Scopul acestei lucrări a fost de a depista leziuni sugestive de micoze cutanate la cultivatorii de orez și de a izola și identifica agenții fungici asociați cu infecția. Acest studiu a fost realizat între noiembrie 2009 și iunie 2011 în statul Anambra, Nigeria. Probele clinice colectate de la 201 fermieri cu leziuni sugestive de micoze cutanate au fost procesate, iar organismele au fost identificate. Chestionarele au fost utilizate pentru a obține alte date necesare și au fost analizate statistic. Din cei 2.580 de cultivatori de orez examinați, 201 (7,79%) au prezentat leziuni pozitive. Organismele recuperate au inclus Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp, Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum și Penicillium pinophilum. La finalul acestei lucrări, s-a observat că onicomicoza este cea mai răspândită, mucegaiurile nondermatofite devenind acum agenți foarte importanți ai micozelor cutanate în rândul cultivatorilor de orez.

1. Introducere

Cultura orezului este una dintre ocupațiile majore în partea de nord a statului Anambra, Nigeria. Această cereală care este una dintre cele mai importante culturi alimentare din lume este cultivată fie în zone mlăștinoase de terenuri joase cu multă apă, fie pe un platou sau în regiuni colinare unde precipitațiile naturale asigură o cantitate adecvată de apă . Pregătirea terenului, aratul câmpului, utilizarea gunoiului de grajd, a îngrășămintelor, a pesticidelor și a erbicidelor, însămânțarea semințelor de orez, transplantarea răsadurilor de orez și recoltarea se fac manual de către acești agricultori, ceea ce îi predispune la micoze cutanate.

Micozele cutanate sunt infecții fungice patogene care afectează straturile keratinizate ale pielii și anexele acesteia (unghii, păr). Nu afectează țesuturile vii. Aceste infecții sunt cauzate în principal de dermatofiți și drojdii. În plus față de agenții patogeni acceptați, mucegaiurile nondermatofite devin acum semnificative în micozele cutanate .

Au fost raportate creșteri înspăimântătoare ale incidenței infecțiilor fungice în ultimul timp. Acestea au fost puse în legătură de către Terrell , Meis și Verweij , și Rolston cu tratamentele medicale, stările de imunitate compromisă, malnutriția, anumite intervenții chirurgicale și metale grele precum mercurul. Alți factori care pot predispune la infecții fungice, potrivit lui Gugnani , Shenoi et al. și Oyeka și Eze, includ igiena personală, locuirea înghesuită și condițiile sanitare precare, mărimea familiei, vârsta, climatul cald și umed, statutul socio-economic și călătoriile internaționale. Lucrătorii agricoli care sunt expuși la diverși agenți iritanți, și anume noroi, balegă de vacă sau alte tipuri de gunoi de grajd, îngrășăminte, erbicide, pesticide, praf și sol (care este considerat rezervor al majorității organismelor patogene, inclusiv al ciupercilor dermatofite și nondermatofite) sunt, de asemenea, predispuși la infecții fungice .

Infecțiile fungice cauzate de mucegaiurile dermatofite și nondermatofite au fost raportate pe scară largă ca fiind o problemă de sănătate publică în Nigeria și în întreaga lume . Cu toate acestea, acest lucru nu poate fi încă supraevaluat, deoarece natura contagioasă în rândul comunităților de animale; costul ridicat al tratamentului, dificultatea controlului și consecințele asupra sănătății publice explică marea lor importanță . Prin urmare, acest studiu a fost conceput pentru a raporta mucegaiurile dermatofite și nondermatofite asociate cu micozele cutanate în rândul cultivatorilor de orez din statul Anambra, Nigeria.

2. Materiale și metodă

Două mii cinci sute optzeci (2.580) de cultivatori de orez, inclusiv adulți și copii, au fost examinați pentru leziuni sugestive de micoze cutanate. Leziunile au fost evaluate pentru prurit, descuamare, fisuri, înroșirea pielii și distrofia unghiilor. S-au folosit chestionare pentru a obține informații despre sex, vârstă, localizarea leziunii, nivelul de educație, mărimea familiei, natura locuinței familiilor, prezența animalelor de companie/animale domestice în casă și durata leziunii, dacă fermierul folosește gunoi de grajd, îngrășăminte, erbicide sau pesticide.

2.1. Colectarea specimenelor clinice

Leziunile au fost curățate cu alcool de 70%, iar raclajele au fost colectate aseptic din apropierea marginilor de avansare ale acestor leziuni cu bisturiu steril. Probele de unghii de la degetele de la mâini și de la picioare au fost colectate cu ajutorul unor clești de unghii, după ce unghiile au fost curățate cu alcool de 70%. Probele au fost colectate în buzunare de prelevare a probelor, transferate la laboratorul de microbiologie, Universitatea Nnamdi Azikiwe, Awka, Nigeria, și procesate în termen de 2 h. Tampoanele au fost, de asemenea, colectate de pe pânza de la degetele de la picioare și de la mâini după ce au fost curățate cu alcool de 70%, folosind un baston de tampon steril.

2.2. Prelucrarea specimenelor

Lacini de microscopie directă au fost pregătite cu KOH 20% pentru unele porțiuni de resturi de piele și unghii tăiate. Porțiunile rămase și tampoanele de la degetele de la picioare și de la mâini au fost inoculate în plăci duplicate care conțin Sabouraud Dextrose Agar (SDA) (Biotech) suplimentat cu 0,05 mg/mL cloramfenicol și 0,5 mg/mL cicloheximidă. O altă placă duplicată cu 0,05 mg/mL cloramfenicol singur a fost, de asemenea, inoculată cu eșantionul. Plăcile au fost incubate la 27°C timp de 4 săptămâni. Plăcile pozitive cu creștere fungică au fost purificate prin subcultură a diferitelor colonii în pânze SDA proaspete fără antibiotice.

2.3. Identificarea izolatelor

Isolatele au fost identificate pe baza unui studiu detaliat al morfologiilor lor grosiere și microscopice și comparate cu descrierea standard dată de Campbell și Stewart , Guy St-Germain și Richard , și De Hoog și colab. Zece dintre izolate au fost identificate cu ajutorul secvențierii regiunii spacer transcrise interne a ADN-ului ribozomal al izolatului la Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Germania.

2.4. Analiză statistică

Rezultatele și datele obținute din chestionarul distribuit cultivatorilor de orez afectați au fost analizate statistic folosind testele chi-pătrat, Kruskal-Wallis și Mann-Whitney. Rezultatele au fost testate pentru un nivel semnificativ de 0,05.

3. Rezultate

Din totalul de 2.580 de fermieri examinați pentru infecții cutanate, s-a constatat că 201 (7,79%) persoane (7,79%) prezentau leziuni sugestive de infecții fungice. Probele recoltate au fost pozitive prin KOH și cultură. Montajul KOH a arătat fragmente de hife septate în unele probe și neseptate în altele. Dintre populația studiată cu infecție cutanată, 78 (38,81%) au fost bărbați, în timp ce 123 (61,19%) au fost femei. Nouăzeci (44,78%) din cele 201 eșantioane proveneau de la infecția unghiilor de la degete, 45 (22,39%) de la unghiile de la picioare, 27 (13,43%) de la infecția pielii glabre, 20 (9,95%) de la infecția picioarelor, 12 (5,97%) de la infecția pielii de la degetele de la mâini și de la picioare, iar 7 (3,48%) de la infecția scalpului. Tabelul 1 prezintă distribuția micozelor cutanate în funcție de locul de infecție, sex și vârstă la cultivatorii de orez. Analiza cazurilor de infecție în funcție de vârsta cultivatorilor de orez a arătat că infecția a fost semnificativă din punct de vedere statistic cu vârsta () și a fost înregistrată mai mult în grupa de vârstă 16-30 de ani (47,76%), urmată de grupa de vârstă 31-45 de ani (35,82%) (Tabelul 1). Infecția a fost, de asemenea, raportată mai mult în rândul familiilor care trăiesc în locuințe aglomerate (), al fermierilor care împart instalații () și al celor care dețin animale de companie/animale domestice ().

.

.

Locul infecției Numărul de probe recoltate Sexul Vârsta
Bărbați Femei <15 16-30 31-45 >45
Unghiile degetelor 90 (44.78%) 19 71 1 48 32 9 9
Unghiile de la picioare 45 (22.39%) 20 25 23 16 6 6
Pelea glabră 27 (13.43%) 10 17 15 8 4
Picior 20 (9.95%) 16 4 6 10 4 4
Pânza degetelor de la mâini și picioare 12 (5.97%) 8 4 4 6 2 2
Scalp 7 (3.48%) 5 2 7
Total (nu) 201 78 123 8 96 72 25
Total (%) 100 38.81 61.19 3.98 47.76 35.82 12.44
Tabelul 1
Distribuția micozelor cutanate în funcție de focarul de infecție, sex și vârstă la cultivatorii de orez.

Un total de 225 de izolate fungice, cuprinzând 48 (21,33%) dermatofite (tabelul 2) și 177 (78,67%) mucegaiuri nondermatofite (tabelul 3) au fost recuperate din probe. T. rubrum (11,11%) și A. candidus (16,44%) au fost cele mai frecvent izolate mucegaiuri dermatofite și, respectiv, nondermatofite. Izolații identificați la Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Germania, au aparținut speciilor Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum și Fusarium.

.

Specii de dermatofiți Număr de izolate Număr de izolate Penoritate de apariție (%)
Microsporum audouinii 5 2.22
Microsporum ferrugineum 2 0,89
Trichophyton megnini 6 2.67
Trichophyton tonsurans 10 4,44
Trichophyton rubrum 25 11.11
Total 48 21.33
Tabelul 2
Specii de mucegaiuri dermatofite izolate și procentul de prezență al acestora.

Specii de nondermatofiți Număr de izolate Penoritate de apariție (%)
Aspergillus terrus 24 10.67
Aspergillus candidus 37 16.44
Aspergillus scleriotorum 26 11.56
Aspergillus niger 11 4,89
Aspergillus flavus 26 11.56
Scopulariopsis sp. 18 8
Chrysosporium sp. 12 5.33
Eupenicillium javanicum 2 0,89
Fusarium sp. 11 4.89
Penicillium aculeatum 4 1,77
Penicillium pinophilum 6 2.67
Total 177 78.67
Tabelul 3
Specii de mucegaiuri nondermatofite izolate și procentul de prezență a acestora.

4. Discuție

Studiul de față servește la sublinierea importanței pentru sănătatea publică a infecției fungice în rândul cultivatorilor de orez din statul Anambra, Nigeria. Infecția unghiilor de la degetele de la mâini și de la picioare a fost mai mare decât cea din alte părți ale corpului și mai răspândită la femei. Prevalența mai mare a acestei infecții în rândul femeilor poate fi atribuită faptului că femeile folosesc mai multe degete la cultivarea și recoltarea orezului decât bărbații. Acest lucru este în concordanță cu rapoartele lui El Sayed și colab. și Souza și colab. Souza et al. au raportat că 72,25% din cazurile de onicomicoză din studiul lor din Japonia au fost în rândul femeilor, în timp ce Kazemi și Charles au raportat o prevalență mai mare a acestei infecții în rândul bărbaților, chiar dacă studiile lor nu au fost în rândul cultivatorilor de orez. Acest lucru este, de asemenea, susținut de constatările lui Blank et al. și Shenoi et al. care au raportat o rată ridicată de infecție a unghiilor în rândul muncitorilor din câmpurile de orez din India.

Infecția scalpului a fost observată numai la copii și, probabil, ar fi putut fi transmisă prin intermediul mâinilor infectate ale mamelor lor și ale altor rude. Bărbații (71,43%) au avut mai multe cazuri de infecție decât femeile (28,57%). Oyeka a făcut aceeași observație și a legat-o de igiena personală scăzută a bărbaților în comparație cu omologii lor de sex feminin.

Agricultorii din intervalul de vârstă 16-30 de ani au înregistrat mai multe infecții decât alte grupuri de vârstă și ar putea fi explicat prin faptul că acest grup de vârstă este implicat mai activ în cultivarea orezului decât grupurile de vârstă mai tinere și mai în vârstă și au tendința de a transpira mai mult.

Transmisibilitatea infecțiilor fungice în rândul membrilor de familie a fost raportată pe larg în Nigeria și susține constatările acestui studiu în care a fost raportată o rată mai mare de infecție în rândul familiilor care trăiesc în locuințe supraaglomerate (), a celor care au împărțit facilități () și a celor care au deținut animale de companie/animale domestice (). Aceste facilități și animale pot acționa ca rezervoare de ciuperci/spori prin care infecția poate fi ușor transferată la fermieri.

O observație importantă făcută în timpul acestui studiu a fost aceea că fermierii cultivatori de orez nu foloseau nici cizme și nici mănuși de mână în timpul lucrărilor agricole, deoarece cizmele se scufundă în noroi și reduc viteza de lucru, potrivit acestor fermieri. Neutilizarea articolelor de protecție a picioarelor și a mâinilor îi expune pe acești fermieri la agenții de infecții. O observație similară a fost făcută de Shenoi et al. De asemenea, a fost observată o igienă personală precară în rândul acestor fermieri, care este un factor cunoscut ca predispunând persoanele la toate tipurile de infecții, inclusiv la infecții fungice .

Trichophyton rubrum a fost dermatofitul cel mai frecvent recuperat (11,11%) în acest studiu. Acesta a fost singurul organism fungic recuperat din toate zonele corpului, cu excepția pielii degetelor de la mâini și picioare. Acest lucru este în concordanță cu lucrările altor cercetători care au raportat T. rubrum ca fiind cel mai frecvent agent etiologic al dermatofitozelor din diferite părți ale corpului. Acest studiu a demonstrat, de asemenea, că, în plus față de dermatofitele care provoacă infecții fungice cutanate, mucegaiurile nondermatofite devin agenți etiologici foarte importanți ai infecțiilor cutanate. S-a constatat că mucegaiurile nondermatofite au fost izolate mai frecvent (78,67%) în acest studiu decât dermatofiții obișnuiți (31,33%), în special în onicomicoză. Deși unii lucrători au raportat că dermatofiții reprezintă majoritatea cazurilor de onicomicoză, studiile epidemiologice au arătat, de asemenea, că Aspergillus sp. sunt agenți fungici emergenți ai onicomicozei unghiilor de la picioare. Acesta se situează acum pe locul al doilea, după Scopulariopsis sp. și apoi Fusarium solani în onicomicoza nondermatofită . Aspergillus sp. a fost cel mai predominant mucegai nondermatofită izolat în acest studiu, urmat de Scopulariopsis sp. și apoi de Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum și Eupenicillium javanicum care au fost izolate în această lucrare nu fuseseră, conform literaturii de specialitate, implicate în infecții cutanate. Acestea au fost raportate ca fiind frecvent izolate din sol și sunt implicate în producerea și sacarificarea diferitelor enzime industriale, cum ar fi B-D-maninaza, endoglucaninaza, -glucozidaza și pectinaza, precum și în sacarificarea polizaharidelor din paie de orz, ovăz și grâu și Solka-Floc . Capacitatea acestor organisme de a produce enzimele menționate mai sus ar putea explica capacitatea lor de a degrada și zonele keratinizate ale pielii. Frecvența ridicată de izolare a mucegaiurilor nondermatofite observată în acest studiu ar putea fi atribuită izolării regulate a acestora din apă, aer, sol și vegetație, așa cum au înregistrat Oyeka și Okoli și Cribier și Bakshi . Acest lucru face ca șansele lor de a intra în contact cu pielea umană să fie ridicate, dând naștere la infecții oportuniste.

5. Concluzie

La finalul acestui studiu, s-a observat că infecția fungică cutanată a unghiilor a fost cea mai răspândită. Prin urmare, trebuie avut grijă să se controleze răspândirea acestei infecții, deoarece acești fermieri împart utilitățile publice cu masele. De asemenea, s-a observat că, în plus față de dermatofite, mucegaiurile nondermatofite sunt acum agenți etiologici foarte importanți ai infecțiilor cutanate, în special în onicomicoză. Se vor efectua teste suplimentare pentru a determina patogenitatea lui Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum și Eupenicillium javanicum recuperate în această lucrare.

Recunoștințe

Autorii doresc să mulțumească Dr. Yvonne Graeser de la Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlin, Germania, care a ajutat la identificarea izolatelor fungice.