1.Introduzione

Il rapporto tra ematocrito (Hct) ed emoglobina (Hb) è stato generalmente accettato come 2,941 per molto tempo, ed è semplificato come 3,0 nella pratica clinica quotidiana. Questa cifra può essere applicata alle persone che hanno una morfologia normale dei globuli rossi (RBC). Nel caso delle alfa-talassemie, i pazienti hanno sempre RBC microcitici, ipocromici, anisopoikilocitici e il loro rapporto medio Hct/Hb è stato recentemente trovato a 3,5+0,2 (range 3,25 da 4,12) che è totalmente diverso da 3,02+0,08 (range 2,86 – 3,17) del controllo normale. La causa dell’alto rapporto Hct/Hb tra i pazienti con le alfa-talassemie è supposta essere l’effetto della sovra-idratazione uniforme dei loro RBCs mentre i RBCs dei pazienti con beta talassemia / malattia Hb E hanno un’idratazione eterogenea.
La diagnosi delle alfa-talassemie che comprende le malattie H, Hb H -Constant-Spring (CS), HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart e HbEFBart-CS, è per lo più fatta in base al ritrovamento delle bande di Hb H e/o Hb Bart con o senza Hb CS o Hb E dai vari metodi di analisi Hb che possono richiedere alcune ore o giorni per realizzare il test. Se il dato del rapporto Hct/Hb elevato può essere usato per distinguere le alfa-talassemie da altre talassemie e/o emoglobinopatie con precisione, sarà più conveniente e più rapido per i medici pianificare la gestione dei pazienti. Questo studio ha lo scopo di verificare la validità del rapporto Hct / Hb al cut point di 3.25 o più per la diagnosi delle alfa-talassemie, cioè Hb H, H-CS, HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart e HbEFBart-CS in pazienti con talassemia clinicamente e/o ematologicamente sospetta.

2.Patients And Method

Questo studio trasversale ha reclutato i pazienti con 20 anni di età o più anziani che hanno frequentato la clinica di ematologia, dipartimento di medicina, Maharat Nakhon Ratchasima Hospital, con il sospetto clinico o ematologico di talassemia, cioè, anemia emolitica cronica, epatosplenomegalia, talassemia, MCV basso, MCH basso o la morfologia dei globuli rossi microcitica ipocromica anisopoikilocitica sullo striscio di sangue periferico. Tutti i pazienti sono stati esaminati di routine per il CBC con l’analizzatore ematologico automatizzato (Sysmex, XT 1800i®) e l’analisi dell’Hb con il metodo HPLC (strumento Bio-Rad). I risultati dell’analisi dell’Hb, interpretati dal tecnologo medico ben addestrato e dall’ematologo, sono stati utilizzati come gold standard. Le alfa-talassemie includevano: Hb H, Hb H-CS, HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart e HbEFBart-CS.

Il valore del rapporto Hct/Hb è stato calcolato dall’emocromo eseguito lo stesso giorno dell’analisi Hbanal. Il rapporto di 3,25 o più è stato usato come punto di cut-off per essere positivo per le alfa-talassemie.
I pazienti che avevano malattie epatiche o renali croniche concomitanti, gravidanza, o la trasfusione precedente in meno di 3 mesi sono stati esclusi. Lo studio è stato approvato dal comitato etico dell’ospedale Maharat Nakhon Ratchasima.

3.Risultati

C’erano 300 pazienti con sospetto clinico o ematologico di talassemie. La loro età variava da 20 a 81 anni, media 38.5 + 15.6 anni. Il rapporto tra maschi e femmine era di 125 a 175. Le loro medie di concentrazione di Hb, Hct, MCV e MCH erano 8.0 + 2.7 g%, 25.9 + 8.2 %, 64.7 + 8.9 fl e 20.0 + 1.8 pg, rispettivamente. Da 300 pazienti, c’erano 130 con le alfa-talassemie e 170 non alfa-talassemie che consistevano in 101 con beta talassemia / malattia dell’emoglobina E e 69 con malattia dell’emoglobina E. Il rapporto medio complessivo Hct/Hb era 3,260 + 0,368. Il rapporto Hct/Hb di 3.25 o più è stato trovato in 126 da 130 con le alfa-talassemie e 15 nel gruppo non alfa-talassemia; tutti e 15 trovati nella beta-talassemia / malattia di Hb E, nessuno nel gruppo della malattia di Hb E. È stato trovato negativo in 4 con le alfa-talassemie, e in 155 con la non-alfa-talassemia; 86 con la malattia beta-talassemia/Hb E e 69 con la malattia Hb E.
Di tutti i 69 pazienti con malattia Hb E, il rapporto medio Hct/Hb era 2,87+0,14, inoltre nessuno aveva il rapporto vicino a 3,25 o globuli rossi nucleati (NRBC).
Tabella 1

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Tabella1.

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La sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo (PPV), il valore predittivo negativo (NPV), il rapporto di probabilità positivo (PLR) e il rapporto di probabilità negativo (NLR) sono stati calcolati come 96.9% (95% Intervallo di Confidenza o CI: 92,3-99,1), 91,2% (95% CI: 85,9-95,0), 89,4% (95% CI: 83,1-93,9), 97,5% (95% CI: 93,7-99,3), 11,0 (95% CI: 6,8-17,8) e 0,03 (95% CI: 0,01-0,09), rispettivamente.
Dei 126 pazienti alfa-talassemia con risultato positivo del test, 5 avevano globuli rossi nucleati (NRBC), che vanno da 1 a 320 cellule, mediana 6cells/100 WBC nel sangue periferico mentre nessuno dei 4 pazienti alfa-talassemia con risultato negativo del test aveva NRBC.

Tabella 2

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Tabella2

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Dai pazienti con beta-talassemia/Hb E tutti i 15 casi con risultato positivo del test avevano NRBC, che vanno da 2 a 480, mediana 132.5 cellule/100 WBC mentre 14 da 86 con beta talassemia /Hb E con risultato negativo del test (16.3%) avevano NRBC, che vanno da 3 a 248 cellule, mediana 51.0/100 WBC. I primi avevano l’NRBC molto più dei secondi con significato statistico (p-value
Se i pazienti che avevano NRBC erano tutti esclusi da ogni gruppo, la nuova tabella di contingenza potrebbe essere prodotta. La sensibilità, la specificità, il PPV e il NPV del rapporto Hct/Hb di 3,25 o più per la diagnosi delle alfa-talassemie potrebbero essere nuovamente calcolati dopo che i pazienti con NRBC in qualsiasi gruppo sono stati esclusi come segue: 96,8%, 100%, 100%, e 97,2%, rispettivamente.

4.Discussione

Il rapporto Hct/Hb di 3,25 o più può principalmente distinguere i pazienti con alfa-talassemie dalle malattie beta-talassemia/ Hb E e Hb E con alta sensibilità, specificità, PPV e NPV. Probabilmente perché i globuli rossi alfa talassemici sono uniformemente meno densi del normale, mentre i globuli rossi beta talassemici hanno una distribuzione ad ampia densità. La minore densità di RBCs di alfa talassemia può causare il falsamente alto Hct3 e il livello di Hb diminuito rispetto al livello di Hb sia diminuito che aumentato di RBCs beta talassemici.
Tutti i 15 pazienti beta talassemia/Hb E con il risultato del test positivo hanno NRBC (100%) nella periferia e il tasso di NRBC positivo è significativamente più comune del 16,3 % del gruppo beta talassemi /Hb E con risultato del test negativo. Quando si escludono i pazienti con NRBC positivo da ogni gruppo, la sensibilità, la specificità, il PPV e il NPV sono cambiati dal 96,9%, 91,2%, 89,4% e 97,5%, rispettivamente per essere 96,8%, 100%, 100% e 97,2%, rispettivamente. Questo può essere spiegato dal fatto che i numerosi NRBC che si trovano più frequentemente nei pazienti con beta-talassemia/Hb E, possono causare Hct falsamente alta determinata dall’analizzatore ematologico automatizzato, con conseguente rapporto Hct/Hb alto in alcuni casi con malattia beta talassemia/Hb E.
Inoltre, quando il rapporto Hct/Hb dei tratti alfa talassemia-1 è calcolato, è anche trovato alto, 3,317 per i maschi e 3,324 per le femmine6. Se coincide con la beta-talassemia/Hb E, può anche causare l’alto rapporto Hct/Hb in questo gruppo. Questo può essere il motivo per cui alcuni casi di pazienti con beta talassemia/Hb E hanno un risultato del test falsamente positivo. Il ruolo dell’alfa talassemia-1 hetrozygosity nei casi di beta talassemia/Hb E in questo aspetto deve essere chiarito nello studio ulteriore. Quattro dei 130 casi (3.0 %) delle alfa talassemie hanno il risultato negativo del test senza la spiegazione adeguata finora.25 o più ha un forte potere diagnostico per distinguere le alfa-talassemie dalle malattie beta-talassemia/Hb E e Hb E nei casi di sospetta talassemia con la sensibilità, la specificità, il valore predittivo positivo, il valore predittivo negativo, il rapporto di probabilità positivo e il rapporto di probabilità negativo del 96,9%, 91,2%, 89,4%, 97,5%, 11,0 e 0,03.

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  3. Schrier SL, Rachmilewitz E, Mohandas N. Proprietà cellulari e di membrana di eritrociti alfa e beta talassemici sono diversi: implicazione per le differenze nelle manifestazioni cliniche. Sangue 1989; 74: 2194-202.
  4. Bunyaratvej A, Fucharoen S, Greenbaum A, Mohandas N. Idratazione dei globuli rossi in alfa e beta talassemie differisce. Un approccio utile per distinguere tra questi fenotipi di cellule rosse. Am J ClinPathol 1994; 102: 217-22.
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