Az IgG4-RD betegeknél nem találtunk IgG4+ ANA-t, de IgG1+ és IgG2+ ANA-t igen (1. és 2. ábra). Azt is megállapítottuk, hogy az IgG4+ ANA nagyon ritka, míg a szisztémás autoimmun betegségekben IgG1/2/3+ ANA-t detektáltunk (2. és 3. ábra). A Fluoro-HepANA™-tesztben citoplazmatikus mintázatú autoantitestek nem egzakt ANA; “anti-citoplazmatikus” antitestek – pl. anti-SS-A/Ro, anti-aminoacil-tRNS-szintetáz és anti-szignálfelismerő részecske antitestek – ismertek SS-ben és PM-ben. Az alosztály alapú ANA-tesztek IgG1/2/3+ anti-citoplazmatikus antitesteket találtak, de IgG4-et nem (2., 3. ábra).

IgG4+ ANA nagyon ritka szisztémás autoimmun betegségekben, valószínűleg azért, mert a szérum IgG4/IgG arány alacsony, kevesebb mint 5 % ezekben a betegségekben (2. táblázat). IgG4+ ANA-t azonban az IgG4-RD-ben a magas szérum IgG4/IgG arány (43 %) ellenére sem mutattak ki. Ez arra utal, hogy maga az IgG4 nem használódik fel az ANA előállításához.

Szisztémás autoimmun betegségekben több tanulmány is vizsgálta az ANA alosztályait. Zouali és munkatársai arról számoltak be, hogy SLE-ben és kevert kötőszöveti betegségben a kettősszálú DNS (dsDNS) elleni antitest IgG1/3-domináns, az anti-RNP pedig IgG2-domináns volt . Az anti-Sm, anti-RNP és anti-dsDNS SLE-ben , az anti-SS-A/Ro és anti-SS-B/La SS-ben , valamint az anti-Scl-70 SSc-ben állítólag IgG1-domináns. IgG4-típusú ANA-t azonban alig mutattak ki a fenti jelentésekben. Rigopoulou és munkatársai primer epeúti cirrózisos eseteket vizsgáltak, és azt találták, hogy az ANA IgG1/3-domináns, de az IgG4 nem volt kimutatható az alosztály-alapú IIF segítségével. Az ok, amiért az IgG2-típusú ANA feltűnően gyakori volt a mi vizsgálatunkban, míg a korábbi tanulmányokban az IgG1 és IgG3 dominált, az lehet, hogy a másodlagos antitestek affinitása különbözött a tanulmányok között. Az alosztály-alapú ANA-tesztben a titerek nem hasonlíthatók össze pontosan az alosztályok között, mivel a második antitestek különbözőek. A korábbi vizsgálatokban az IgG2-típusú ANA-t is mérsékelt mértékben mutatták ki, míg az IgG4-típusú ANA folyamatosan negatív vagy alacsony szinten volt kimutatható. Vizsgálatunkban az IgG4-típusú ANA szintén alig volt kimutatható.

Autoimmun pancreatitis (AIP) az IgG4-RD-ben megfigyelhető szervspecifikus rendellenesség. Az AIP-ben különböző autoantitestek, például anti-laktoferrin és anti-karbon anhidráz II antitestek figyelhetők meg. Asada és munkatársai anti-pankreatikus szekréciós tripszin inhibitor (PSTI) antitestet találtak AIP-ben, és kimutatták, hogy az anti-PSTI antitest titerek a szérum IgG4-szintekkel párhuzamosan mozognak. Az IgG4-szintek az IgG4-RD betegség aktivitásával párhuzamosan változnak, amint arról számos tanulmány, köztük a mi korábbi tanulmányunk is beszámolt . Asada és munkatársai úgy gondolták, hogy az anti-PSTI fontos tényező lehet a patofiziológiában. Az alosztályok anti-IgG1 vagy anti-IgG4 mint második antitestekkel végzett immunoblotting azonban kimutatta, hogy az alosztály nem IgG4, hanem IgG1. Lehetséges, hogy IgG4-típusú autoantitestek nehezen termelődnek IgG4-RD-s betegeknél.

Mindenesetre egyes autoimmun betegségeknél állítólag IgG4-típusú autoantitesteket mutatnak. Rock és munkatársai arról számoltak be, hogy a pemphigus foliaceusban szenvedő betegek szérumában kimutatott anti-deszmoglein (Dsg)-1 antitestek közül az IgG4 volt a leggyakoribb (100 %), és Balb/c egerek segítségével kimutatták az IgG4-típusú anti-Dsg-1 antitestek patogenitását . A pemphigus vulgarisban az anti-Dsg-3 antitest szintén IgG4-predomináns volt . Beck és munkatársai immunoblottinggal kimutatták, hogy az anti-foszfolipáz A2 receptor (PLA2R) ellenes antitest idiopátiás membrános nefropátiában főként IgG4-ekből állt . Az IgG4 a jelentések szerint túlsúlyban van az anti-neutrofil citoplazmatikus antitestekben (ANCA). A C-ANCA (IIF), a proteináz-3 (PR3)-ANCA (ELISA) és a myeloperoxidáz (MPO)-ANCA (ELISA) a granulomatosis polyangiitisben (GPA) , és az MPO-ANCA (ELISA) a propiltiuracil-indukált vasculitisben IgG1/4-domináns volt. Mások hasonlóképpen arról számoltak be, hogy az IgG4 alkotja a legtöbb C-ANCA-t (IIF) és PR3-ANCA-t (ELISA) vaszkulitiszekben . Engelmann és munkatársai arról számoltak be, hogy az anticiklikus citrullinált peptid (CCP) antitest IgG1/4-domináns volt RA-ban . Az IgG4 azonban vaszkulitiszekben és RA-ban nem biztos, hogy patofiziológiailag fontos. Az ANCA funkcionális elemzése során az IgG1 és IgG3 PR3-ANCA képes stimulálni a neutrofileket , míg az IgG4 PR3-ANCA csak gyengén stimulálta a neutrofileket . A HLA-DR4 közös epitóppal rendelkező RA betegeknél Engelmann és munkatársai az IgG3 anti-CCP antitestet találták dominánsnak, és úgy vélték, hogy az IgG3 típusú antitest fontosabb lehet az RA patofiziológiájában . Mivel az IgG4-nek gyenge a komplementek és az antitest-függő sejtes citotoxicitás aktiválására való képessége , az IgG4 valószínűleg nem vesz részt az autoimmun betegségek szövetkárosító mechanizmusaiban.

Érdekes, hogy úgy tűnik, hogy vannak patogén és nem funkcionális IgG4-típusú autoantitestek. Az IgG4-típusú ANCA kevésbé tekinthető patogénnek, összehasonlítva más alosztályú ANCA-val az ANCA-asszociált vaszkulitiszben . Az IgG4-típusú és más alosztályú ANCA közötti affinitásoknak azonosnak kell lenniük, de a komplementaktivációs képességek eltérőek, így az IgG4-típusú ANCA szerepe kevésbé jelentős lehet, mint a más alosztályú ANCA-é. Másrészt az IgG4 anti-PLA2R antitest nagy affinitással rendelkezik, és patogénnek tekinthető az idiopátiás membrános nefropátiában . Hogy az IgG4 anti-PLA2R antitest miért képes patogenitást kifejteni a komplementaktiváció képessége nélkül, annak oka az lehet, hogy a patogenitást a glomeruláris bazálmembrán elektromos gátjainak pusztulása hozza.

Az IgG4 felhasználási aránya összességében eltér az autoantitestek és a betegségek között. Az IgG4 társul az anti-Dsg-1/3, anti-PLA2R, anti-CCP antitestekkel és az ANCA-val, de nem társul az anti-PTSI antitesttel az AIP-ben vagy az ANA-val az IgG4-RD-ben és a szisztémás autoimmun betegségekben (3. táblázat). Ez az aszimmetria arra utal, hogy az IgG4-nek ismeretlen, de bizonyos fiziológiai vagy patológiai funkciói vannak. Szerepének megismeréséhez további elemzésekre van szükség.

3. táblázat Az IgG4-RD-ben és autoimmun betegségekben előforduló autoantitestek domináns alosztályainak összefoglalása

A jelen vizsgálatban megfigyeltük, hogy az ANA mintázata az IgG-alosztályok között néhány esetben különbözött (3., 4. ábra). Ha egy esetben több autoantitest van, a felhasznált alosztályok autoantigének szerint különböznek. Ez azzal a hipotézissel magyarázható, hogy az egyes IgG-alosztályok előszeretettel fedik le a saját antigénspektrumukat. Annak oka, hogy alig találtunk IgG4-et az ANA-ban, az lehet, hogy az IgG4 nem fedezi le azokat az antigéneket, amelyeket az ANA-teszttel kimutathatunk – azaz a nukleáris antigéneket vagy a rokon mikrobiális antigéneket. A szelektív IgG2 alosztály hiánya gyakran társul Neisseria meningitidis és Streptococcus pneumoniae okozta bakteriális fertőzéshez, így az IgG2-nek szerepet tulajdonítanak az e baktériumokkal szembeni védelemben. Az IgG4 szerepe nem eléggé tisztázott. Ha az IgG4 valamilyen mikroorganizmus-típushoz kapcsolódik, és ha a mikroorganizmus-antigének és az autoantigének hasonlóak, mint a Dsg-1/3, a PLA2R, a PR3 és a citrullinált fehérjék esetében, akkor ez megmagyarázná, hogy miért keletkeztek dominánsan IgG4-típusú antitestek ezen fehérjék ellen.

Eredményeink arra utalnak, hogy az IgG4-RD nem autoimmun betegség, és hogy a szérum IgG4 magas szintje az IgG4-RD-ben csak nem specifikus. Az alosztály-alapú ANA-tesztek ebben a vizsgálatban mind a nukleáris, mind a citoplazmatikus antigéneket lefedték HEp-2 sejtekben, és a nem módosított ubiquitárius antigének széles skáláját képesek szűrni. Ennek az elemzésnek azonban vannak korlátai: a módosított antigének, mint a citrullinált fehérjék és a szervspecifikus antigének nem kerültek szűrésre. Az esetek száma korlátozott ebben a tanulmányban. Továbbra is fennáll annak a lehetősége, hogy az IgG4-RD-ben ismeretlen IgG4-típusú autoantitestek is megtalálhatók. További elemzésre van szükség.