DISZCUSSION

Az S. Agonanal+ és S. Typhimuriumnal+ kórokozóknak a kísérletek során a jelzősertésekből történő visszanyerése bizonyítja, hogy ezek a kórokozók a levegő útján terjedhetnek és rövid úton megfertőzhetik az elválasztott sertéseket. Továbbá a kromoszómális DNS makroresztrikciója és a plazmidprofilok elemzése az egyes vizsgálatokban az őrszemsertésekből és a beoltott sertésekből kinyert izolátumok esetében megkülönböztethetetlen mintázatot mutatott az inokulumként használt törzsekhez képest (az adatok nem láthatóak). Ez elegendő volt a nullhipotézis elutasításához, ezért más statisztikai elemzéseket nem kíséreltünk meg. Ezek az eredmények megerősítik a S. enterica sertésekben a levegő útján történő átvitelének lehetőségére vonatkozó korábbi jeleket. Továbbá a S. enterica aeroszolos átvitelét már kimutatták baromfi , borjú , juh és egér esetében .

Noha hasonló kísérleteket végeztek már más kórokozók sertésekben történő levegő útján történő átvitelének vizsgálatára, a jelen jelentés ismereteink szerint az első, amely a S. enterica sertésekben történő levegő útján történő átvitelét írja le izolációs szekrények használatával.

Az egyes rektális tamponokból vett mintákat annak meghatározására végezték, hogy a sertések mikor kezdték a Salmonella kiválasztását. Eredményeink szerint a beoltott sertésekből mindkét kísérletben a szalmonellát a fertőzést követő első nap elején izolálták (1. és 2. táblázat), ami összhangban van a kísérleti beoltást követő gyors szalmonellaürítésről szóló korábbi jelentésekkel .

Az I. kísérletben egy őrsertés (P6) következetes S. Agonanal+ ürítési mintát mutatott 11 és 15 DPI között. A II. kísérletben azonban P11-ből 5 DPI-nél S. Typhimuriumot izoláltak, amelyet csak PCR segítségével mutattak ki P12-ből 2, 5 és 18 DPI-nél vett rektális kenetből. A S. Typhimurium sertésekben a levegő útján történő átviteléről szóló egyetlen rendelkezésre álló jelentésben nem izoláltak baktériumot a fertőzött sertésekkel teli helyiségből származó légáramlásnak kitett őrszemállatokból, és csak szerokonverziót figyeltek meg .

Annak ellenére, hogy a kitett sertésekben a Salmonella-kiválás ideje és gyakorisága nagymértékben változik, a S. Typhimurium gyorsan izolálható az ürülékből nem sokkal azután, hogy a sertések e kórokozót kibocsátó állatokkal keveredtek, vagy amikor fertőzött környezetbe kerültek. Amikor azonban a fertőzött és az ellenőrzött sertések csak orrtól orráig érintkeztek egymással, a fertőzött sertések többsége 5 hét után ontotta ki a S. Typhimuriumot. Ezek az eredmények alátámaszthatják azt a hipotézist, hogy a szennyezett ürülék a karámok közötti keresztszennyeződés fő forrása .

A S. Agonanal+ visszanyerése a C3 bejáratánál négy egymást követő napon gyűjtött levegőmintákból az I. kísérletben alátámasztja azt a feltételezést, hogy az őrszemsertések a fertőzést a C2-ből származó szennyezett levegő befogadása után szerezték. Az a tény, hogy a II. kísérletben a S. Typhimuriumnal+ nem volt kimutatható a levegőből vett mintákból, nem cáfolja a levegő útján történő átvitel hipotézisét. Bár a briliáns zöld agar más szelektív táptalajokkal összehasonlítva jobb eredményeket ad a Salmonella levegőmintákból történő izolálásában, nem szabad elfelejteni, hogy a specifikus patogén baktériumok izolálása az állattartó létesítmények környezeti levegőjéből mindig nehéz, és az eredmények gyakran negatívak a szaprofita mikroorganizmusokkal való kiterjedt szennyeződés esetén.

Az izolálással és PCR-rel egyaránt elemzett 387 mintát figyelembe véve, a két vizsgálat között jelentős egyezés volt. Az itt talált kappa együttható (0-77) megerősíti a feldúsított Rappaport-Vassiliadis leves sikeres használatát a PCR-hez szükséges DNS-templát forrásaként, mint a sertés bélsármintákban a Salmonella kimutatási érzékenységének javítására szolgáló kiegészítő módszert . Azt feltételezték, hogy a dúsítás lehetővé teszi a gátló anyagok hígulását és a szalmonella számának növekedését a bélsárban . Tizenkilenc minta volt pozitív PCR-rel és negatív izolálással, míg 21 minta volt pozitív izolálással és negatív PCR-rel. Ezek az eltérő eredmények és az a tény, hogy a baktériumok izolálása szükséges a transzmissziós hipotézis megerősítéséhez a kísérleti vizsgálatokban, azt sugallják, hogy a dúsítóleveskultúra PCR csak támogató diagnosztikai eszközként használható, és nem helyettesítheti a baktériumok izolálását.

Az itt alkalmazott kísérleti elrendezés nem teszi lehetővé a szalmonella inváziós helyeire vonatkozó következtetéseket az őrsertésekben. A szalmonella visszaszerzésének gyakorisága mindkét kísérletben, azaz a C3-ban a környezet gyors szennyeződése az őrszemmalacok szalmonella-kiválásának azonosítása előtt arra utalhat, hogy ezek az állatok a szalmonellát lenyelés útján szerezték be, valószínűleg a C2-ből származó aeroszolokkal szennyezett környezeti felületekről, beleértve a takarmányt is. Ezt a hipotézist alátámasztja az a tény, hogy a vágási korú sertések gyorsan fertőződhetnek, ha viszonylag kis számú S. Typhimuriumnak vannak kitéve a környezetben.

Másrészt nem zárható ki a szalmonella belélegzésének hipotézise az őrszemsertések által. Fedorka-Cray és munkatársai nyelőcsőtágított sertésekkel kimutatták, hogy a S. Typhimurium a klasszikus orális beoltási útvonaltól eltérő úton is gyorsan felhalmozódhat a bélben, és megvilágították a NALT jelentőségét, mint a S. Typhimurium sertésekben való bejutásának fontos portálját. Ezek a szövetek a táplálék- és ürülékrészecskékben jelen lévő baktériumok számára is fontos behatolási helyeket jelenthetnek, mivel a sertések viselkedése biztosítja, hogy az ilyen részecskék általában a táplálkozás és a gyökerezés során az orrüregbe jutnak .

Érdekes, hogy a S. Agonanal+ izolálása a P6-ból származó tüdő- és májmintákból, valamint az emésztőrendszerből származó szövetekből szisztémás fertőzésre utal. Sertésekben gyakran dokumentáltak szisztémás fertőzéseket az intranazális légzőszervi úton történő beoltást alkalmazó kísérletek során, de általában nem írták le az orális expozíciót alkalmazó kísérletek során . Az expozíció sorrendje – orális-légúti vs. légúti-szájüregi – szintén befolyásolhatja az immunválaszt, ami viszont befolyásolhatja a betegség súlyosságát .

Az állatok kora, az állatok eredete, az átlagos páratartalom és a hőmérséklet közötti különbségek nem teszik lehetővé a két kísérlet közötti közvetlen összehasonlítást. A két kísérlet közötti legfontosabb különbség az állatok eltérő immunállapotában rejlik a beoltás előtt (4. táblázat). Az A gazdaságból származó állatok átlagos MCOD értéke (I. kísérlet) mindössze 0-056 volt, míg a B gazdaságból származó állatok esetében (II. kísérlet) 0-187 volt. A II. kísérletben három állat (P7, P8 és P9) mutatott a vizsgálat standard határértékénél (0-169) magasabb MCOD-t, ami az anyai szalmonella elleni antitestek jelenlétére utal. Annak ellenére, hogy a S. Typhimuriumnal+-t izolálták a II. kísérletben egy őrsertéstől (P12) gyűjtött szövetekből, a laktogén immunitás jelenléte magyarázhatja az őrsertések szalmonellaürítésének hiányát a kísérleti időszak alatt. Valójában az anyai szalmonella elleni antitestek jelenléte védheti a malacokat az első hetekben .

Két őrszemmalacnál (P6 és P12) a szalmonella elleni antitestek megnövekedett titerét mutatták ki. Ezek az eredmények megerősítik a sertések aeroszolos expozícióját követő humorális immunválasz kimutatására vonatkozó korábbi eredményeket .

A II. kísérletben a fertőzött sertéseknél tapasztalt titercsökkenés az anyai antitestek kimerülésének tudható be a fertőzést követően. Érdekes módon az I. kísérletben a fertőzött sertéseknél az antitesttiterek nem emelkedtek jelentősen. Az ilyen alacsony szerológiai válasz a sertések viszonylag alacsony életkorának és a viszonylag rövid kísérleti időszaknak tulajdonítható. Valójában kimutatták, hogy a szerokonverzió jelentősen változik a beoltott sertések között (6-37 nap), és a szerokonverzió általában 30 DPI körül éri el a csúcspontját. Természetes módon fertőzött sertéseknél a fertőzés és a szerokonverzió közötti késleltetés még hosszabb is lehet.

A modern sertéstenyésztési rendszerekben a szalmonella epidemiológiájának ismerethiánya és összetettsége jelenti a legnagyobb problémát e baktériumok elleni védekezésben a gazdaságokban. Számos jelentés jelent meg a takarmányozás, a termelési rendszerek, a menedzsment és a szállítási/légúti stratégiák sertésekben előforduló szalmonella csökkentésére gyakorolt hatásáról, és a fertőzés széklet-orális ciklusát általában a járványügyi elemzés alapjául veszik. Másrészt kevés figyelmet fordítottak a szalmonella aeroszolokon keresztül történő terjedésére, szennyeződésére és fertőzésére a sertésekben. Még tisztázásra vár, hogy ez az átviteli útvonal is aggodalomra adhat-e okot a szalmonella epidemiológiájában az intenzív sertéstenyésztési rendszerekben. A baromfi esetében azonban már bebizonyosodott, hogy a szennyezett aeroszolok fontos szerepet játszanak a szalmonella átvitelében, és az aeroszolos porszint csökkentésére irányuló módszereket sikeresen alkalmazták e kórokozó átvitelének csökkentésére keltetőszekrényekben és brojlertenyésztő létesítményekben.

Ebben az értelemben az aeroszolok csökkentésére összpontosító környezeti és gazdálkodási fejlesztések fontos szerepet játszhatnak a sertésekben előforduló szalmonellafertőzés megelőzésében is. A sertéseknél a betegség levegő útján történő átvitelének csökkentése érdekében az egy állatra jutó légtérfogatnak, valamint a szellőzésnek és a páratartalomnak megfelelőnek kell lennie, és el kell kerülni a tenyészsertések nagy állománysűrűségét és az állatok túlzott mozgását . Érdemes megjegyezni, hogy ezek az intézkedések nemcsak a fertőző aeroszolokat csökkentik, hanem hozzájárulnak az állatok stresszének csökkentéséhez is. Ezenkívül az olaj vagy olaj és víz keverékének permetezése a környezetbe hatékonyan csökkentheti a por koncentrációját a sertésistállókban . Végül, mivel a takarmány a levegőben szálló por fő forrása, a takarmányozási stratégiákat is figyelembe kell venni, mint az istállókban lévő por csökkentésének lehetőségeit. A fermentált folyékony takarmányozást összefüggésbe hozták a sertésekben a szalmonella előfordulásának csökkenésével, valószínűleg az e takarmányokban jelen lévő nagy mennyiségű szerves savak és a nagyszámú tejsavtermelő baktérium együttes hatásának eredményeként. Másrészt figyelembe kell venni a csökkent portermelést is, amikor ezt a takarmányozási módszert alkalmazzák.

Végeredményben a S. Agona és a S. Typhimurium rövid távú levegő útján történő átvitele lehetséges elválasztott sertésekben. További tanulmányokat kell végezni az aeroszol és a por csökkentésének hatásáról a Salmonella ellenőrzésére az intenzív sertéstenyésztési rendszerekben.