Az időzített vemhes egerek és patkányok fontos kutatási eszközök, amelyeket a fejlődési kutatásban, a géntechnológiában és a szövetkultúrák létrehozásában alkalmaznak. Ezek a leghatékonyabb módja annak, hogy pontosan meghatározott, megfelelő életkorú embriók, magzatok vagy kölykök kohorszát nyerjük. De mik is pontosan az időzített vemhes egerek?
Mi az időzített vemhes egér és patkány?
Az időzített vemhes nőstény egér vagy patkány pontosan ismert párosodási dátummal rendelkezik. Ez lehetővé teszi vagy az embriók vagy magzatok begyűjtését a kívánt vemhességi korban, vagy a kívánt napon született alom előállítását.
Ezek az időzített párosítások úgy valósulnak meg, hogy a párosodást egy adott napra állítják be, és másnap ellenőrzik a párzás bizonyítékát. Azokat a nőstényeket, amelyek a kopuláció bizonyítékát mutatják (spermadugó egereknél, pozitív hüvelykenet patkányoknál), elkülönítik. Ez a párosodást – és feltehetően a fogamzást – egy adott huszonnégy órás időszakhoz köti.
A Taconic Biosciencesnél a nőstényekben a spermiumok kimutatásának napját “spermapozitív dátumnak” nevezik, és a vemhesség első napjának tekintik (Minden időzített vemhes modellt a spermapozitív dátum szerint kell megrendelni).
A vemhesség korai szakaszában nehéz vizuális megfigyeléssel vagy tapintással megerősíteni a vemhességet. Tizennégy napos korban a vemhesség a méhen belüli kölykök vizuális megfigyelésével és tapintásával igazolható.
Embryonális diapause időzített vemhes egerekben és patkányokban
A vemhességi kor meghatározására több módszert is alkalmaznak, beleértve a fejlődést, a súlyt, a méretet és a megjelenést, azonban az alom mérete befolyásolja ezeket a tényezőket. Az UNSW-nél online elérhető egy kiváló referencia patkányokra és egerekre vonatkozóan.
Az embriók és magzatok fejlődése általában egy jól meghatározott idővonal mentén halad, a kutatók időnként megfigyelik, hogy egy termés látszólag fiatalabb embriókból vagy magzatokból áll, mint amennyit az ismert terhességi hossz sugallna.
Az embrionális diapause lehet a valószínű bűnös azokban az esetekben, amikor az embriók vagy magzatok a vártnál fiatalabbnak tűnnek. Az embrionális diapause az embrionális fejlődés átmeneti leállása, amely a blasztociszta beültetése előtt következik be. Ezt környezeti stresszorok vagy az anyai beavatkozás, például a laktáció idézheti elő1. Ennek eredményeként az embrió tényleges fejlődési üteme eltérhet a névleges gesztációs kortól.
Az időzített párosításhoz előnyben részesített törzsek és állományok
Modell | Tenyészkor | Az alom mérete | Típusos vemhesség |
Swiss Webster | 8 hét | 11 kölyök | 19… 20 nap |
Fekete 6 | 8 hét | 7 kölyök | 18 – 20 nap |
Sprague Dawley® | 8 – 10 hét | 10 kölyök | 21 – 23 nap |
Patkányok
A Sprague Dawley® modell kiváló szaporodási teljesítménye miatt kedvelt választás az időzített vemhes nőstény patkányok előállítására. Az időzített vemhes Sprague-Dawley® patkányokból származó embriókat az embrionális fejlődés, a teratológia és a reproduktív toxikológia tanulmányozására, valamint meghatározott embrionális korú magzati szöveteket felhasználó kísérletekben használják.
Egerek
A tenyésztett svájci Webster egér szintén kiváló reprodukciós teljesítményt nyújt, és kiváló választás olyan kísérletekhez, amelyekben elfogadható a tenyésztett egérmodell. Ha beltenyésztett törzsre van szükség, általában a Black 6 egeret használják. Az időzített vemhes Swiss Webster egerek általában nagyobb embrió/magzati hozamot biztosítanak, mint a Black 6, amelynek kisebb az alom mérete.
A időzített vemhes egerek és patkányok alkalmazásai
A időzített vemhes állatokat széles körben használják a géntechnológia, a szövettenyészetek fejlesztése és a fejlődési kutatások során. Az embriók és magzatok meghatározott terhességi stádiumokban történő kitermelésének képessége kritikus jelentőségű e vizsgálatok szempontjából.
- Az embriók kitermelése (általában szuperovulációt és időzített párosítást követően) kritikus lépés a genetikailag módosított állatmodellek létrehozásában. A zigótákat általában pronukleáris mikroinjekcióhoz (beleértve a CRISPR génszerkesztést) használják, míg a blasztocisztákat egy későbbi időpontban szedik le, és donorembrióként használják fel a módosított embrionális őssejtek befecskendezéséhez.
- Az egér- és patkányembriókat és magzatokat általában elsődleges szövettenyészetek, például neurontenyészetek vagy egérembrió fibroblasztok létrehozására használják.
- A vemhes egereket és patkányokat általában arra használják, hogy tanulmányozzák a vemhesség alatti étrend vagy más inputok hatását a vemhesség alatt és a keletkező utódokra.
- A világ legfontosabb egere – Útmutató a C57BL/6 egérhez
- Eger és patkány mutánsok gyors előállítása CRISPR/Cas segítségével egysejtű embriókban
.
Vélemény, hozzászólás?