A foszfolipid alapú véralvadási tesztek idejét meghosszabbítani képes lupus antikoaguláns jelenlétének kimutatására véralvadási teszteket végeznek.
A lupus antikoaguláns jelenléte igen specifikus az APS-re, és erős kapcsolat áll fenn az utóbbi és a trombotikus események vagy a magzati veszteség között.
A hamis pozitív és hamis negatív eredmények száma azonban meglehetősen magas.
Ezek a tesztek érzékenységének és specificitásának hiányát számos tényező befolyásolhatja, beleértve a preanalitikai, analitikai és posztanalitikai változókat.

A keringő lupus antikoaguláns diagnosztikai kritériumai

Négy ilyen kritérium létezik, amelyeket az alábbiakban foglalunk össze.

II. táblázat: A lupus antikoaguláns laboratóriumi diagnózisának kritériumai

1. táblázat. A foszfolipid-függő alvadási tesztidők meghosszabbodása

2. A gátlás kimutatása vegyes beteg/normál plazma tesztben

3. Annak kimutatása, hogy a meghosszabbodott alvadási idő foszfolipid-függő: a kezdetben meghosszabbodott alvadási idő lerövidítése vagy korrekciója többlet foszfolipid hozzáadásával (megerősítő teszt)

4. Az alvadási faktorok ellen irányuló specifikus inhibitorok kizárása (pl.pl. VIII. faktor elleni antitestek)

A keringő lupus antikoaguláns szűrésének preanalitikai változói

A preanalitikai szakasz döntő fontosságú az APS diagnózisában.
A vérlemezkék maradványainak jelenléte a plazmában befolyásolhatja a vérlemezkékből származó foszfolipidektől függő alvadási teszteket; az ilyen foszfolipidek semlegesíthetik a mintában jelen lévő antifoszfolipid antitesteket, és hamis negatív eredményt adhatnak. Ezért ajánlott kettős centrifugálást végezni, amely magában foglalja az első centrifugálást 2 000 g-nél 15 percig környezeti hőmérsékleten, majd egy második centrifugálást több mint 2 500 g-nél 10 percig annak érdekében, hogy 10 000-nél kevesebb vérlemezt/µl-nél kevesebb vérlemezt tartalmazó plazmát kapjunk.

Tesztek kiválasztása

Sok foszfolipid-függő tesztet javasoltak.
A tesztek közötti eltérő érzékenység, valamint egyes tesztek szabványosításának hiánya miatt a Nemzetközi Trombózis és Hemosztázis Társaság (ISTH) irányelveket adott ki az alkalmazandó tesztek kiválasztására vonatkozóan.
Két különálló, különböző elveket alkalmazó tesztrendszert kell használni.
A hígított Russell-viperaméreg-időt (DRVVT) minden esetben használni kell. Ezt a tesztet specifikusnak és robusztusnak tartják a lupus antikoagulánsok kimutatására.
A második elvégzendő teszt az APTT, amely érzékenysége miatt szilícium-dioxidot használ aktivátorként. A kaolin vagy az ellagsav használata aktivátorként nem ajánlott, ahogyan a híg tromboplasztin idő, az ecarin vagy textarin időn alapuló tesztek vagy a kaolin alvadási idő használata sem.

Keverési vizsgálat

A felhasznált összevont plazmát a szokásos módszerekkel összhangban kell elkészíteni. Kétszeres centrifugálás szükséges ahhoz, hogy 10 000-nél kevesebb vérlemezt/µl-nél kevesebb vérlemezt tartalmazó plazmát kapjunk, amelynek aktivitása minden faktor esetében közel 100%-os. A kereskedelmi forgalomban kapható, liofilizált vagy fagyasztott összevont plazma is felhasználható, feltéve, hogy megfelel a szükséges feltételeknek és erre a célra validált.
A keverési vizsgálat során a vizsgált plazmának és az összevont normál plazmának 1:1 arányban kell lennie, előinkubálás nélkül.
A keverési vizsgálatot megelőző trombinidő-vizsgálat kimutatja a heparin vagy más inhibitorok jelenlétét a mintában. Egyes reagensek azonban, különösen a DRVVT-vizsgálatokban használtak, tartalmaznak heparin-inhibitort, ami lehetővé teszi a vizsgálat elvégzését olyan mintákban, amelyek legfeljebb 0,8 NE anti-Xa/ml-t tartalmaznak.

Megerősítő vizsgálatok

Ezek a véralvadási idő korrekciójának értékelését foglalják magukban a plazmaminta esetében a felesleges foszfolipid jelenlétében. Kétrétegű foszfolipideket vagy hexagonális fázisú foszfolipideket kell használni. Ezzel szemben a fagyasztott, felengedett vérlemezkék használata a tételek közötti eltérések miatt nem ajánlott.

A véralvadási faktorok ellen irányuló specifikus inhibitorok kizárása

Az adott véralvadási faktor (elsősorban a VIII. vagy IX. faktor) ellen irányuló specifikus inhibitorok szűrése elengedhetetlen, mivel az ilyen inhibitorok jelenléte a betegeket magas és potenciálisan életveszélyes vérzésveszélynek teheti ki, ami azonnali, speciális csapatok általi kezelést igényel. Ez a vizsgálat magában foglalja a kérdéses faktor vizsgálatát, valamint szükség esetén az inhibitor specifikus szűrését és vizsgálatát.