Kutánní mykózy u pěstitelů rýže ve státě Anambra v Nigérii

Abstrakt

Rýže je jednou z nejdůležitějších potravinářských plodin na světě a její pěstování je hlavní činností ve státě Anambra v Nigérii. Tito pěstitelé rýže jsou vystaveni různým činitelům, které je predisponují ke kožním mykózám. Cílem této práce bylo vyšetřit pěstitele rýže na léze svědčící pro kožní mykózy a izolovat a identifikovat houbové původce spojené s infekcí. Tento průzkum byl proveden v období od listopadu 2009 do června 2011 ve státě Anambra v Nigérii. Klinické vzorky odebrané od 201 zemědělců s lézemi naznačujícími kožní mykózy byly zpracovány a organismy identifikovány. K získání dalších potřebných údajů byly použity dotazníky, které byly statisticky vyhodnoceny. Z 2 580 vyšetřených zemědělců pěstujících rýži bylo 201 (7,79 %) s pozitivními lézemi. Zjištěné organismy zahrnovaly Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp., Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum a Penicillium pinophilum. Na konci této práce bylo zjištěno, že nejrozšířenější je onychomykóza, přičemž nedermatofytní plísně se nyní stávají velmi důležitými původci kožních mykóz u pěstitelů rýže.

1. Úvod

Pěstování rýže je jedním z hlavních zaměstnání v severní části státu Anambra v Nigérii. Tato obilnina, která je jednou z nejdůležitějších potravinářských plodin na světě, se pěstuje buď v bažinatých nížinných oblastech s dostatkem vody, nebo na náhorní plošině či v kopcovitých oblastech, kde přirozené srážky poskytují dostatečné množství vody . Přípravu půdy, orbu pole, používání hnoje, hnojiv, pesticidů a herbicidů, setí rýžových semen, přesazování sazenic rýže a sklizeň provádějí tito zemědělci ručně, což je předurčuje ke kožním mykózám.

Kožní mykózy jsou patogenní houbové infekce, které postihují zrohovatělé vrstvy kůže a jejích příloh (nehty, vlasy). Nepostihují živé tkáně. Tyto infekce způsobují především dermatofyty a kvasinky. Kromě uznávaných patogenů se v současnosti stávají významnými kožními mykózami i plísně, které nejsou dermatofyty .

V poslední době se objevují zprávy o děsivém nárůstu výskytu plísňových infekcí. Terrell , Meis a Verweij a Rolston je dávají do souvislosti s lékařskou léčbou, stavy oslabené imunity, podvýživou, některými operacemi a těžkými kovy, jako je rtuť. Mezi další faktory, které mohou predisponovat k plísňovým infekcím, patří podle Gugnaniho , Shenoie a kol. a Oyeky a Ezeho osobní hygiena, stísněné bydlení a špatné hygienické podmínky, velikost rodiny, věk, teplé vlhké klima, socioekonomický status a cestování do zahraničí. K houbovým infekcím jsou náchylní také zemědělští pracovníci, kteří jsou vystaveni různým dráždivým činitelům, konkrétně bahnu, kravskému hnoji nebo jiným druhům hnoje, hnojivům, herbicidům, pesticidům, prachu a půdě (která je považována za rezervoár většiny patogenních organismů včetně dermatofytních a nedermatofytních plísní) .

Houbové infekce způsobené dermatofytními a nedermatofytními plísněmi byly v Nigérii a po celém světě hojně uváděny jako problém veřejného zdraví . To však stále nelze přeceňovat, protože nakažlivost mezi zvířecími komunitami; vysoké náklady na léčbu, obtížná kontrola a důsledky pro veřejné zdraví vysvětlují jejich velký význam . Proto bylo cílem této studie podat zprávu o dermatofytních a nedermatofytních plísních spojených s kožními mykózami mezi pěstiteli rýže ve státě Anambra v Nigérii.

2. Materiál a metoda

Dva tisíce pět set osmdesát (2 580) pěstitelů rýže včetně dospělých a dětí bylo vyšetřeno na léze naznačující kožní mykózy. Léze byly hodnoceny z hlediska svědění, šupinatění, rozpraskání, zarudnutí kůže a dystrofie nehtů. Pomocí dotazníků byly získány informace o pohlaví, věku, místě léze, úrovni vzdělání, velikosti rodiny, charakteru bydlení rodin, přítomnosti domácích/domácích zvířat v domě a délce trvání léze, pokud zemědělec používá hnůj, hnojivo, herbicidy nebo pesticidy.

2.1. Léze a jejich výskyt Odběr klinického vzorku

Léze byly očištěny 70% alkoholem a sterilním skalpelem byly asepticky odebrány seškraby z blízkosti postupujících okrajů těchto lézí. Vzorky nehtů na rukou a nohou byly odebrány pomocí nehtových klipů po očištění nehtů 70% alkoholem. Vzorky byly odebrány do odběrových kapes, přeneseny do mikrobiologické laboratoře Nnamdi Azikiwe University, Awka, Nigérie, a zpracovány do 2 h. Stěry byly rovněž odebrány z nehtové ploténky na nohou/prstech po očištění 70% alkoholem pomocí sterilní tampónové tyčinky.

2.2. Vzorky z nehtů na nohou byly odebrány po očištění 70% alkoholem. Zpracování vzorků

Přímé mikroskopické preparáty byly připraveny s 20% KOH pro některé části kožních seškrabů a nehtových odřezků. Zbývající části a tampony z prstů na nohou/prstů byly naočkovány na duplicitní destičky obsahující Sabouraudův dextrózový agar (SDA) (Biotech) doplněný 0,05 mg/ml chloramfenikolu a 0,5 mg/ml cykloheximidu. Další duplikátní destička se samotným 0,05 mg/ml chloramfenikolu byla rovněž naočkována vzorkem. Destičky byly inkubovány při 27 °C po dobu 4 týdnů. Pozitivní destičky s růstem hub byly přečištěny subkultivací různých kolonií na čerstvé SDA suspenze bez antibiotik

2.3. Identifikace izolátů

Izoláty byly identifikovány na základě podrobného studia jejich hrubé a mikroskopické morfologie a porovnány se standardním popisem, který uvedli Campbell a Stewart , Guy St-Germain a Richard a De Hoog a kol. Deset izolátů bylo identifikováno pomocí sekvenování vnitřní transkribované spacerové oblasti ribozomální DNA izolátu v Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Německo.

2.4. Identifikace izolátů a jejich identifikace Statistická analýza

Výsledky a údaje získané z dotazníku rozdaného postiženým pěstitelům rýže byly statisticky analyzovány pomocí chí-kvadrát, Kruskal-Wallisova a Mannova-Whitneyho testu. Výsledky byly testovány na hladině významnosti 0,05.

3. Výsledky

Z celkového počtu 2 580 zemědělců vyšetřených na kožní infekce byly u 201 (7,79 %) osob zjištěny léze svědčící o plísňové infekci. Odebrané vzorky byly pozitivní na KOH a kultivaci. KOH nátěr ukázal u některých vzorků fragmenty septovaných hyf a u jiných neseptované. Mezi studovanou populací s kožní infekcí bylo 78 (38,81 %) mužů, zatímco 123 (61,19 %) žen. Devadesát (44,78 %) z 201 vzorků pocházelo z infekce nehtů na rukou, 45 (22,39 %) z infekce nehtů na nohou, 27 (13,43 %) z infekce holé kůže, 20 (9,95 %) z infekce nohou, 12 (5,97 %) z infekce pavučiny prstů/nohou a 7 (3,48 %) z infekce kůže hlavy. Tabulka 1 ukazuje rozdělení kožních mykóz podle místa infekce, pohlaví a věku pěstitelů rýže. Analýza případů infekce podle věku pěstitelů rýže ukázala, že infekce statisticky významně souvisela s věkem () a byla zaznamenána více ve věkové skupině 16-30 let (47,76 %), následované věkovou skupinou 31-45 let (35,82 %) (tabulka 1). Infekce byla také častěji zaznamenána v rodinách žijících v přeplněných obydlích (), u zemědělců, kteří sdíleli společné prostory (), a u těch, kteří chovali domácí/domácí zvířata ().

Ze vzorků bylo získáno celkem 225 houbových izolátů, které se skládaly ze 48 (21,33 %) dermatofytů (tabulka 2) a 177 (78,67 %) nedermatofytních plísní (tabulka 3). Nejčastěji izolovanými dermatofyty byly T. rubrum (11,11 %) a A. candidus (16,44 %). Izoláty identifikované v Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Německo, patřily k druhům Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum a Fusarium.

4. Diskuse

Předkládaná studie slouží ke zdůraznění významu plísňových infekcí pro veřejné zdraví u pěstitelů rýže ve státě Anambra v Nigérii. Infekce nehtů na rukou a nohou byla častější než infekce ostatních částí těla a častější u žen. Vyšší výskyt této infekce u žen lze přičíst skutečnosti, že ženy používají při pěstování a sklizni rýže více prstů než muži. To se shoduje se zprávami El Sayeda a kol. a Souzy a kol. Souza a kol. uvádějí, že 72,25 % případů onychomykózy z jejich studie v Japonsku bylo u žen, zatímco Kazemi a Charles uvádějí vyšší výskyt této infekce u mužů, i když jejich studie nebyly provedeny mezi pěstiteli rýže. To potvrzují i zjištění Blanka a kol. a Shenoiho a kol. kteří zaznamenali vysokou míru infekce nehtů mezi dělníky na rýžových polích v Indii.

Infekce skalpů byla pozorována pouze u dětí a pravděpodobně mohla být přenesena prostřednictvím infikovaných rukou jejich matek a dalších příbuzných. Muži (71,43 %) měli více infekcí než ženy (28,57 %). Oyeka učinil stejné pozorování a spojil ho s nízkou osobní hygienou mužů ve srovnání s jejich ženskými protějšky.

U zemědělců ve věkovém rozmezí 16-30 let bylo zaznamenáno více infekcí než u ostatních věkových skupin a lze to vysvětlit tím, že tato věková skupina se aktivněji věnuje pěstování rýže než mladší a starší věkové skupiny a má tendenci se více potit.

Přenosnost houbových infekcí mezi rodinnými příslušníky byla v Nigérii hojně uváděna a podporuje výsledky této studie, kde byla zaznamenána vyšší míra infekce v rodinách žijících v přeplněných obydlích (), v rodinách, které sdílely zařízení (), a v rodinách, které chovaly domácí/domácí zvířata (). Tato zařízení a zvířata mohou fungovat jako rezervoár hub/spór, jejichž prostřednictvím se infekce může snadno přenést na zemědělce.

Důležitým zjištěním učiněným během této studie bylo, že zemědělci pěstující rýži nepoužívali při zemědělských pracích holínky ani rukavice na ruce, protože holínky se podle těchto zemědělců boří do bláta a snižují rychlost práce. Nepoužívání ochranných oděvů na nohy a ruce vystavuje tyto zemědělce původcům infekcí. Podobné pozorování učinil i Shenoi et al . U těchto zemědělců byla také pozorována nedostatečná osobní hygiena, což je faktor, o kterém je známo, že predisponuje osoby ke všem druhům infekcí včetně plísňových infekcí .

Trichophyton rubrum byl v této studii nejčastěji zjištěným dermatofytem (11,11 %). Jednalo se o jediný houbový organismus získaný ze všech míst těla s výjimkou pavučinky na prstech. To se shoduje s pracemi jiných výzkumníků, kteří uváděli T. rubrum jako nejčastějšího etiologického původce dermatofytóz různých částí těla . Tato studie také prokázala, že kromě kožních plísní způsobujících dermatofyty se velmi významnými etiologickými původci kožních infekcí stávají i nedermatofytní plísně. V této studii bylo zjištěno, že nedermatofytní plísně byly izolovány častěji (78,67 %) než obvyklé dermatofyty (31,33 %), zejména u onychomykózy. Ačkoli někteří pracovníci uváděli, že většinu případů onychomykózy tvoří dermatofyty, epidemiologické studie rovněž prokázaly, že Aspergillus sp. jsou novými houbovými původci onychomykózy nehtů na nohou. V současné době se řadí na druhé místo za Scopulariopsis sp. a poté za Fusarium solani u nedermatofytních onychomykóz . Aspergillus sp. byl v této studii nejčastěji izolovanou nedermatofytní plísní, následoval Scopulariopsis sp. a pak Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum a Eupenicillium javanicum, které byly izolovány v této práci, se podle literatury na infekci kůže nepodílely. Uvádí se, že byly často izolovány z půdy a podílejí se na produkci a sacharizaci různých průmyslových enzymů, jako je B-D-manáza, endoglukanáza, -glukosidáza a pektináza, a na sacharizaci polysacharidů ječné, ovesné a pšeničné slámy a Solka-Floc . Schopnost těchto organismů produkovat výše uvedené enzymy by mohla vysvětlovat jejich schopnost rozkládat také zrohovatělé části kůže. Vysokou frekvenci izolace nedermatofytních plísní, jak byla pozorována v této studii, lze přičíst jejich pravidelné izolaci z vody, vzduchu, půdy a vegetace, jak zaznamenali Oyeka a Okoli a Cribier a Bakshi . To zvyšuje pravděpodobnost, že se dostanou do kontaktu s lidskou kůží, což vede ke vzniku oportunní infekce.

5. Závěr

Na konci této studie bylo zjištěno, že nejčastěji se vyskytují kožní plísňové infekce nehtů. Je proto třeba dbát na kontrolu šíření této infekce, protože tito zemědělci sdílejí veřejné služby s masami. Bylo také zjištěno, že kromě dermatofytů jsou nyní velmi důležitými etiologickými původci kožních infekcí, zejména onychomykóz, i nedermatofytní plísně. Budou provedeny další testy ke stanovení patogenity Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum a Eupenicillium javanicum získaných v této práci.

Poděkování

Autoři by rádi poděkovali Dr. Yvonne Graeser z Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlín, Německo, která pomohla při identifikaci izolátů hub.

.