Co jsou časované březí myši?Časované březí myši a potkani jsou důležitými výzkumnými nástroji s využitím ve vývojovém výzkumu, genetickém inženýrství a při vytváření tkáňových kultur. Jsou nejefektivnějším způsobem, jak získat kohortu embryí, plodů nebo mláďat s přesně definovaným, odpovídajícím věkem. Ale co přesně jsou časované březí myši?

Co jsou časované březí myši a potkani?

Časovaná březí samice je myš nebo potkan s přesně známým datem páření. To umožňuje buď odběr embryí nebo plodů v požadovaném gestačním věku, nebo produkci mláďat narozených v požadovaný den.
Těchto časovaných páření se dosahuje tak, že se v určitý den nastaví páření a následující den se kontrolují důkazy kopulace. Samice, které vykazují známky kopulace (spermatické zátky u myší, pozitivní vaginální stěry u potkanů), jsou izolovány. Tím je páření – a pravděpodobně i početí – vymezeno na konkrétní čtyřiadvacetihodinové období.
V Taconic Biosciences se den detekce spermatických buněk u samic nazývá „datum pozitivních spermií“ a považuje se za první den březosti (všechny časované březí modely by měly být objednány podle data pozitivních spermií).
V raných fázích březosti je obtížné potvrdit březost vizuálním pozorováním nebo pohmatem. Ve čtrnácti dnech lze březost potvrdit vizuálním pozorováním a palpací mláďat in utero.

Embryonální diapauza u časovaných březích myší a potkanů

K určení stáří březosti se používá několik metod, včetně vývoje, hmotnosti, velikosti a vzhledu, avšak velikost vrhu tyto faktory ovlivňuje. Vynikající reference pro potkany a myši je k dispozici online na UNSW.
Vývoj embryí a plodů obvykle probíhá podle přesně definované časové osy, vědci občas pozorují, že se sklizeň zdá být tvořena embryi nebo plody mladšími, než by odpovídalo známé délce gestace.
Embryonální diapauza může být pravděpodobným viníkem v těch případech, kdy se embrya nebo plody jeví mladší, než se očekává. Embryonální diapauza je dočasné zastavení embryonálního vývoje, ke kterému dochází před implantací blastocysty. Může být vyvolána environmentálními stresory nebo vlivem matky, například kojením1. V důsledku toho se může skutečná rychlost vývoje embrya lišit od nominálního gestačního věku.

Preferované kmeny a stáda pro časované páření

Model Věk chovu Velikost vrhu Typická březost
Swiss Webster 8 týdnů 11 mláďat 19 -. 20 dní
Černý 6 8 týdnů 7 mláďat 18 – 20 dní
Sprague Dawley® 8 – 10 týdnů 10 mláďat 21 – 23 dní

Krysy

Vynikající reprodukční vlastnosti modelu Sprague Dawley® z něj činí preferovanou volbu pro generování časovaných březích samic potkanů. Embrya z časovaných březích potkanů Sprague-Dawley® se používají při studiu embryonálního vývoje, teratologie a reprodukční toxikologie, jakož i při pokusech využívajících fetální tkáň z určitého embryonálního věku.

Myši

Vyšlechtěná švýcarská myš Webster má rovněž vynikající reprodukční výkonnost a je vynikající volbou pro pokusy, při nichž je přijatelný vyšlechtěný myší model. Pokud je požadován inbrední kmen, běžně se používá myš Black 6. Časované březí myši Swiss Webster obvykle poskytují větší výtěžnost embryí/plodů ve srovnání s kmenem Black 6, který má menší velikost vrhu.

Použití časovaných březích myší a potkanů

Časovaná březí zvířata se hojně používají v genetickém inženýrství, při vývoji tkáňových kultur a ve vývojovém výzkumu. Možnost odebírat embrya a plody v určitých gestačních stadiích je pro tyto studie zásadní.

  • Odběr embryí (obvykle po superovulaci a časovaném páření) je kritickým krokem při vytváření geneticky modifikovaných zvířecích modelů. Zygoty se obvykle používají pro pronukleární mikroinjekci (včetně editace genů CRISPR), zatímco blastocysty se sklízejí v pozdějším časovém bodě a používají se jako dárcovská embrya pro injekci modifikovaných embryonálních kmenových buněk.
  • Myší a potkaní embrya a plody se běžně používají k vytváření primárních tkáňových kultur, například neuronálních kultur nebo myších embryonálních fibroblastů.
  • Běžně se používají březí myši a potkani ke studiu vlivu stravy nebo jiných vstupů během těhotenství a na výsledné potomstvo.
webináře společnosti Taconic BiosciencesSledujte webináře společnosti Taconic Biosciences:

  • Nejdůležitější myš na světě – váš průvodce myší C57BL/6
  • Rychlé generování mutantů myší a potkanů pomocí CRISPR/Cas v jednobuněčných embryích

.