Vad är tidsbestämda dräktiga möss?Tidsbestämda dräktiga möss och råttor är viktiga forskningsverktyg med tillämpningar inom utvecklingsforskning, genteknik och vävnadskulturer. De är det mest effektiva sättet att få fram en kohort av embryon, foster eller valpar med en exakt definierad, matchad ålder. Men vad exakt är tidsbestämda dräktiga möss?

Vad är tidsbestämda dräktiga möss och råttor?

En tidsbestämd dräktig hona är en mus eller råtta med ett exakt känt parningsdatum. Detta gör det möjligt att antingen skörda embryon eller foster vid en önskad gestationsålder eller att producera kullar som föds på en önskad dag.
Dessa tidsbestämda parningar åstadkoms genom att ställa in parningar på en viss dag och kontrollera om det finns tecken på kopulation nästa dag. Honor som visar tecken på kopulation (spermaproppar hos möss, positiva vaginalutstryk hos råttor) isoleras. På så sätt lokaliseras parning – och förmodligen befruktning – till en viss tjugofyratimmarsperiod.
Vid Taconic Biosciences kallas den dag då spermier upptäcks hos honorna för ”spermiepositivt datum” och anses vara dag ett av dräktigheten (alla tidsbestämda dräktiga modeller ska beställas efter det spermiepositiva datumet).
Under dräktighetens tidiga skeden är det svårt att bekräfta dräktigheten genom visuell observation eller palpation. Vid fjorton dagar kan dräktighet bekräftas genom visuell observation och palpation av in utero ungar.

Embryonisk diapause hos tidsbestämda dräktiga möss och råttor

Flera metoder används för att bestämma dräktighetsåldern, inklusive utveckling, vikt, storlek och utseende, men kullstorleken påverkar dessa faktorer. En utmärkt referens finns online på UNSW för råttor och möss.
Utvecklingen av embryon och foster sker vanligtvis längs en väldefinierad tidslinje, forskare observerar ibland att en skörd verkar bestå av embryon eller foster som är yngre än vad den kända dräktighetslängden skulle antyda.
Embryonisk diapause kan vara den troliga boven i de fall då embryon eller foster verkar yngre än förväntat. Embryonal diapause är ett tillfälligt stopp i den embryonala utvecklingen som inträffar före blastocystimplantationen. Detta kan framkallas av stressfaktorer i miljön eller av moderens insatser, t.ex. amning1. Som ett resultat av detta kan den faktiska embryoutvecklingstakten variera från den nominella gestationsåldern.

Företrädda stammar och bestånd för tidsbestämd parning

Modell Avelsålder Kullstorlek Typisk dräktighet
Swiss Webster 8 veckor 11 valpar 19 – 20 dagar
Black 6 8 veckor 7 valpar 18 – 20 dagar
Sprague Dawley® 8 – 10 veckor 10 valpar 21 – 23 dagar

Råttor

Den utmärkta reproduktiva prestandan hos Sprague Dawley®-modellen gör den till det föredragna valet när det gäller att generera tidsbestämda dräktiga honråttor. Embryon från tidsbestämda dräktiga Sprague-Dawley®-råttor används vid studier av embryonal utveckling, teratologi och reproduktionstoxikologi samt i experiment där man använder fostervävnad från specifika embryonala åldrar.

Möss

Den utbredda schweiziska Webstermusen har också en överlägsen reproduktionsprestanda och är ett utmärkt val för experiment där en utbredd musmodell är acceptabel. Om en inavelsstam krävs används vanligen Black 6-musen. Tidsdräktiga Swiss Webster-möss ger vanligen en större avkastning på embryon/foster jämfört med Black 6, som har mindre kullstorlekar.

Användningar av tidsdräktiga möss och råttor

Tidsdräktiga djur används i stor utsträckning inom genteknik, utveckling av vävnadskulturer och utvecklingsforskning. Förmågan att skörda embryon och foster vid särskilda gestationsstadier är avgörande för dessa studier.

  • Embryoskörd (vanligtvis efter superovulation och tidsbestämd parning) är ett kritiskt steg i skapandet av genetiskt modifierade djurmodeller. Zygoter används vanligtvis för pronukleär mikroinjektion (inklusive CRISPR-genredigering), medan blastocyster skördas vid en senare tidpunkt och används som donatorembryon för injektion av modifierade embryonala stamceller.
  • Mus- och råttembryon och -foster används vanligen för att generera primära vävnadskulturer, t.ex. neuronala kulturer eller fibroblaster från musembryon.
  • Timed dräktiga möss och råttor används vanligen för att studera effekten av diet eller andra insatser under dräktigheten och på den resulterande avkomman.
taconic biosciences webbseminarierSe Taconic Biosciences webbseminarier:

  • Den viktigaste musen i världen – din guide till C57BL/6-musen
  • Snabbt genererande av mus- och råttmutanter med hjälp av CRISPR/Cas i encellsembryon

.