Abstract

Ris är en av världens viktigaste livsmedelsgrödor och dess odling är en viktig sysselsättning i Anambra State, Nigeria. Dessa risodlare utsätts för olika agens som predisponerar dem för kutana mykoser. Syftet med detta arbete var att undersöka risodlare efter skador som tyder på kutan mykos och att isolera och identifiera svampmedel som är förknippade med infektionen. Undersökningen genomfördes mellan november 2009 och juni 2011 i delstaten Anambra i Nigeria. Kliniska prover som samlades in från 201 jordbrukare med lesioner som tyder på kutan mykos behandlades och organismerna identifierades. Frågeformulär användes för att få andra nödvändiga uppgifter och analyserades statistiskt. Av de 2 580 risodlare som undersöktes uppvisade 201 (7,79 %) positiva lesioner. De organismer som återfanns var Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus och Scopulariopsis sp, Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum och Penicillium pinophilum. I slutet av detta arbete observerades att onychomykos var den mest förekommande med icke-matofytiska mögelsvampar som nu blir mycket viktiga agenter för kutana mykoser bland risodlare.

1. Introduktion

Risodling är ett av de viktigaste yrkena i den norra delen av delstaten Anambra i Nigeria. Detta spannmål, som är en av världens viktigaste livsmedelsgrödor, odlas antingen i sumpiga låglandsområden med gott om vatten eller på en platå eller i kuperade områden där naturlig nederbörd ger tillräcklig mängd vatten. Förberedelse av marken, plöjning av fältet, användning av gödsel, gödningsmedel, bekämpningsmedel och herbicider, sådd av risfrön, utplantering av risplantor och skörd görs manuellt av dessa jordbrukare, vilket gör att de riskerar att drabbas av kutana mykoser.

Kutana mykoser är patogena svampinfektioner som drabbar hudens keratinerade skikt och dess bilagor (naglar, hår). Den påverkar inte de levande vävnaderna. Dessa infektioner orsakas huvudsakligen av dermatofyter och jästsvampar. Förutom de accepterade patogenerna börjar nu icke-matofytiska mögel att få betydelse för kutana mykoser .

Det har rapporterats om en skrämmande ökning av förekomsten av svampinfektioner på senare tid. Dessa har av Terrell , Meis och Verweij , och Rolston kopplats till medicinska behandlingar, immunsvaga tillstånd, undernäring, vissa operationer och tungmetaller som kvicksilver. Andra faktorer som kan göra en person utsatt för svampinfektioner enligt Gugnani , Shenoi et al. och Oyeka och Eze är personlig hygien, trångboddhet och dåliga sanitära förhållanden, familjens storlek, ålder, varmt och fuktigt klimat, socioekonomisk status och utlandsresor. Jordbruksarbetare som utsätts för olika irriterande ämnen, nämligen lera, kogödsel eller andra typer av gödsel, gödningsmedel, herbicider, bekämpningsmedel, damm och jord (som anses vara en reservoar för de flesta patogena organismer, inklusive dermatofyter och icke-matofytsvampar) är också predisponerade för svampinfektion .

Svampinfektioner som orsakas av dermatofyter och icke-matofytsvampar har rapporterats i stor utsträckning som ett folkhälsoproblem i Nigeria och över hela världen . Detta kan dock inte överbetonas eftersom deras smittsamma karaktär bland djursamhällen, höga behandlingskostnader, svårighet att kontrollera och konsekvenserna för folkhälsan förklarar deras stora betydelse. Därför utformades denna studie för att rapportera om dermatofyter och icke-matofyter som är associerade med kutana mykoser bland risodlare i Anambra State, Nigeria.

2. Material och metod

Två tusen femhundraåttio (2580) risodlare, inklusive vuxna och barn, undersöktes för lesioner som tyder på kutana mykoser. Läsionerna utvärderades med avseende på klåda, fjällning, sprickbildning, hudrodnad och dystrofi på naglarna. Frågeformulär användes för att få information om kön, ålder, lokalisering av lesioner, utbildningsnivå, familjestorlek, typ av familjens boende, förekomst av husdjur/husdjur i huset och varaktighet av lesioner, om jordbrukaren använder stallgödsel, gödselmedel, herbicider eller bekämpningsmedel.

2.1. Insamling av kliniska prover

Lesionerna rengjordes med 70 % alkohol och skrapningar samlades aseptiskt in från nära de framskjutande kanterna på dessa lesioner med steril skalpell. Fingernagel- och tånagelprover samlades in med hjälp av nagelklämmor efter att naglarna hade rengjorts med 70 % alkohol. Proverna samlades in i provtagningsfickor, överfördes till mikrobiologilaboratoriet, Nnamdi Azikiwe University, Awka, Nigeria, och behandlades inom 2 timmar. Svabbar samlades också in från tånaglar/fingernaglar efter rengöring med 70-procentig alkohol med hjälp av sterila svabbpinnar.

2.2. Behandling av prover

Direktmikroskopiska objektglas förbereddes med 20 % KOH för vissa delar av hudskrap och nagelavklipp. De återstående delarna och svabbarna från tå- och fingervävnader inokulerades i duplikatplattor som innehöll Sabouraud Dextrose Agar (SDA) (Biotech) kompletterad med 0,05 mg/ml kloramfenikol och 0,5 mg/ml cykloheximid. En annan dubbelplatta med enbart 0,05 mg/ml kloramfenikol inokulerades också med provet. Plattorna inkuberades vid 27 °C i 4 veckor. Positiva plattor med svamptillväxt renades genom att subkulturera de olika kolonierna i färska SDA-slants utan antibiotika.

2.3. Identifiering av isolat

Isolaten identifierades på grundval av en detaljerad studie av deras grova och mikroskopiska morfologi och jämfördes med den standardbeskrivning som ges av Campbell och Stewart , Guy St-Germain och Richard och De Hoog et al. Tio av isolaten identifierades genom sekvensering av den interna transkriberade spacer-regionen i isolatens ribosomala DNA vid Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Tyskland.

2.4. Statistisk analys

Resultaten och uppgifterna från frågeformuläret som delades ut till de drabbade risodlarna analyserades statistiskt med hjälp av chi-square-, Kruskal-Wallis- och Mann-Whitney-test. Resultaten testades för signifikansnivån 0,05.

3. Resultat

Av totalt 2 580 jordbrukare som undersöktes för hudinfektioner visade sig 201 (7,79 %) personer ha lesioner som tyder på svampinfektion. De insamlade proverna var positiva genom KOH och odling. KOH-monteringen visade fragment av septatala hyfer i vissa prover och icke-septatala i andra. Bland studiepopulationen med hudinfektion var 78 (38,81 %) män medan 123 (61,19 %) var kvinnor. Nittio (44,78 %) av de 201 proverna kom från fingernagelinfektion, 45 (22,39 %) från tånagel, 27 (13,43 %) från infektion av kala hud, 20 (9,95 %) från fotinfektion, 12 (5,97 %) från infektion av finger-/tånagelväggar och 7 (3,48 %) från hårbotteninfektion. Tabell 1 visar fördelningen av kutana mykoser beroende på infektionsplats, kön och ålder hos risodlarna. Analysen av infektionsfallen enligt risodlarnas ålder visade att infektionen var statistiskt signifikant med åldern () och registrerades oftare i åldersgruppen 16-30 år (47,76 %), följt av åldersgruppen 31-45 år (35,82 %) (tabell 1). Infektion rapporterades också oftare bland familjer som bodde i trånga bostäder (), jordbrukare som delade lokaler () och de som höll husdjur ().

Infektionsställe Antal insamlade prover Kön Ålder
Män Kvinnor <15 16-30 31-45 >45
Fingernaglar 90 (44.78%) 19 71 1 48 32 9
Tånaglar 45 (22.39%) 20 25 23 16 6
Hud med gulaktig hud 27 (13.43%) 10 17 15 8 4
Fot 20 (9.95%) 16 4 6 10 4
Finger/tåspets 12 (5.97%) 8 4 4 6 2
Skalp 7 (3.48%) 5 2 7
Total (nej) 201 78 123 8 96 72 25
Total (%) 100 38.81 61.19 3.98 47.76 35.82 12.44
Tabell 1
Fördelning av kutana mykoser enligt infektionsställe, kön och ålder hos risodlare.

Totalt 225 svampisolat, bestående av 48 (21,33 %) dermatofyter (tabell 2) och 177 (78,67 %) icke-matofytiska mögelsvampar (tabell 3), återfanns från proverna. T. rubrum (11,11 %) och A. candidus (16,44 %) var de mest frekvent isolerade dermatofyterna respektive icke-matofyterna. De isolat som identifierades vid Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Tyskland, tillhörde Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum och Fusarium-arter.

Species of dermatophytes Number of isolates Förekomst i procent (%)
Microsporum audouinii 5 2.22
Microsporum ferrugineum 2 0,89
Trichophyton megnini 6 2.67
Trichophyton tonsurans 10 4.44
Trichophyton rubrum 25 11.11
Total 48 21.33
Tabell 2
Species of dermatophyte molds isolated and their percentage occurrence.

Arter av icke-matofyter Antal av isolat Förekomst i procent (%)
Aspergillus terrus 24 10.67
Aspergillus candidus 37 16.44
Aspergillus scleriotorum 26 11.56
Aspergillus niger 11 4,89
Aspergillus flavus 26 11.56
Scopulariopsis sp. 18 8
Chrysosporium sp. 12 5.33
Eupenicillium javanicum 2 0,89
Fusarium sp. 11 4.89
Penicillium aculeatum 4 1,77
Penicillium pinophilum 6 2.67
Total 177 78.67
Tabell 3
Arter av icke-matofytiska mögel som isolerats och deras procentuella förekomst.

4. Diskussion

Denna studie tjänar till att betona folkhälsans betydelse av svampinfektioner bland risodlare i Anambra State, Nigeria. Infektion av finger- och tånaglar var vanligare än infektion av andra delar av kroppen och mer utbredd hos kvinnor. Den högre prevalensen av denna infektion bland kvinnor kan tillskrivas det faktum att kvinnor använder mer av sina fingrar vid risodling och skörd än män. Detta stämmer överens med rapporterna från El Sayed m.fl. och Souza m.fl. Souza et al. rapporterade att 72,25 % av fallen av onychomykos från deras studie i Japan var bland kvinnor, medan Kazemi och Charles rapporterade högre prevalens av denna infektion bland män, även om deras studier inte var bland risodlare. Detta stöds också av resultaten från Blank et al. och Shenoi et al. som rapporterade en hög frekvens av nagelinfektion bland risfältsarbetare i Indien.

Skalpinfektion sågs endast hos barn och kan troligen ha överförts via smittade händer hos deras mödrar och andra släktingar. Män (71,43 %) hade mer av infektionen än kvinnor (28,57 %). Oyeka gjorde samma iakttagelse och kopplade den till männens låga personliga hygien jämfört med deras kvinnliga motsvarigheter.

Lantbrukare i åldersintervallet 16-30 år noterade fler infektioner än andra åldersgrupper och kan förklaras av att denna åldersgrupp är mer aktivt involverad i risodling än de yngre och äldre åldersgrupperna och tenderar att svettas mer.

Transmittsbarhet av svampinfektioner bland familjemedlemmar har rapporterats i stor utsträckning i Nigeria och stöder resultaten av denna studie där högre infektionsfrekvens rapporterades bland familjer som bodde i trånga bostäder (), de som delade lokaler () och de som höll husdjur (). Dessa lokaler och djur kan fungera som reservoar för svampar/sporer genom vilka infektionen lätt kan överföras till jordbrukarna.

En viktig iakttagelse som gjordes under studien var att risodlarna varken använde stövlar eller handskar under sitt jordbruksarbete, eftersom stövlarna sjunker ner i leran och minskar deras arbetshastighet enligt dessa odlare. Om de inte använder skyddande fot- och handskar utsätts dessa jordbrukare för smittämnen. En liknande observation gjordes av Shenoi et al. . Det konstaterades också att jordbrukarna hade dålig personlig hygien, vilket är en faktor som är känd för att utsätta människor för alla typer av infektioner, inklusive svampinfektioner.

Trichophyton rubrum var den vanligaste dermatofyt som återfanns (11,11 %) i denna studie. Det var den enda svamporganismen som återfanns på alla kroppsställen utom på finger- och tånätet. Detta stämmer överens med andra forskares arbete som rapporterade T. rubrum som den vanligaste etiologiska agenten för dermatofytoser på olika delar av kroppen. Denna studie visar också att förutom de dermatofyter som orsakar svampinfektioner i huden, är icke-matofytiska mögelsvampar på väg att bli mycket viktiga etiologiska agenter för hudinfektioner. Icke-matofytiska mögelsvampar befanns vara oftare isolerade (78,67 %) i denna studie än de vanliga dermatofyterna (31,33 %), särskilt vid onychomykos. Även om vissa arbetstagare har rapporterat att dermatofyter står för majoriteten av onychomykosfallen, har epidemiologiska studier också visat att Aspergillus sp. är nya svampagenter vid onychomykos av tånaglar. Den är nu rankad på andra plats efter Scopulariopsis sp. och därefter Fusarium solani vid onychomykos hos icke-matofyter. Aspergillus sp. var den mest isolerade icke-matofytiska mögelsvampen i denna studie, följt av Scopulariopsis sp. och sedan Chrysosporium sp. Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum och Eupenicillium javanicum, som isolerades i detta arbete, hade enligt litteraturen inte varit inblandade i hudinfektioner. De har rapporterats vara ofta isolerade från jord och är inblandade i produktionen och förkalkningen av olika industriella enzymer som B-D-mannas, endoglukanas, -glukosidas och pektinas och i förkalkningen av polysackarider från korn-, havre- och vetehalm samt Solka-Floc . Dessa organismers förmåga att producera de ovannämnda enzymerna kan förklara deras förmåga att även bryta ner hudens keratiniserade områden. Den höga frekvensen av isolering av icke-matofytiska mögel som observerades i denna studie kan tillskrivas deras regelbundna isolering från vatten, luft, jord och vegetation, vilket Oyeka och Okoli samt Cribier och Bakshi har noterat. Detta gör att risken för att de kommer i kontakt med människans hud är stor, vilket ger upphov till opportunistiska infektioner.

5. Slutsats

I slutet av denna studie konstaterades att kutan svampinfektion på naglarna var den vanligaste. Försiktighet måste därför iakttas för att kontrollera spridningen av denna infektion eftersom dessa jordbrukare delar offentliga nyttigheter med massorna. Det noterades också att förutom dermatofyter är icke-matofytiska mögel nu mycket viktiga etiologiska agenter för hudinfektioner, särskilt vid onychomykos. Ytterligare tester kommer att utföras för att fastställa patogeniteten hos Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum och Eupenicillium javanicum som återfanns i detta arbete.

Acknowledgment

Författarna vill tacka Dr. Yvonne Graeser från Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlin, Tyskland, som hjälpte till med att identifiera svampisolaten.