Koagulationstester utförs för att påvisa förekomsten av lupus antikoagulant som kan förlänga tiden för fosfolipidbaserade koagulationstester.
Närvaron av lupus antikoagulant är mycket specifik för APS och det finns ett starkt samband mellan det senare och trombotiska händelser eller fosterförlust.
Antalen av falskt positiva och falskt negativa resultat är dock ganska höga.
Många faktorer kan påverka bristen på sensitivitet och specificitet hos dessa tester, inklusive variabler före analys, analys och efter analys.

Diagnostiska kriterier för cirkulerande lupus antikoagulant

Fyra sådana kriterier finns och sammanfattas nedan.

Tabell II: Kriterier för laboratoriediagnos av lupus antikoagulant

1. Förlängning av fosfolipidberoende koagulationstesttider

2. Demonstration av hämning i ett test med blandade patienter/normal plasma

3. Demonstration att förlängd koagulationstid är fosfolipidberoende: förkortning eller korrigering av initialt förlängd koagulationstid genom tillsats av överskottsfosfolipid (konfirmationstest)

4. Uteslutning av specifika hämmare som är riktade mot koagulationsfaktorer (e.t.ex. anti-faktor VIII-antikroppar)

Preanalytiska variabler vid screening för cirkulerande lupus antikoagulantia

Det preanalytiska skedet är avgörande för diagnosen av APS.
Närvaron av kvarvarande trombocyter i plasma kan påverka koagulationstester som är beroende av trombocytavledda fosfolipider; sådana fosfolipider kan neutralisera de antifosfolipidantikroppar som finns i provet och ge falskt negativa resultat. Det rekommenderas därför att dubbel centrifugering utförs som omfattar en första centrifugering vid 2 000 g i 15 minuter vid rumstemperatur, följt av en andra centrifugering vid över 2 500 g i 10 minuter för att erhålla plasma som innehåller färre än 10 000 trombocyter/µL.

Välja tester

Många fosfolipidberoende tester har föreslagits.
På grund av varierande känslighet mellan olika tester samt bristen på standardisering av vissa tester har International Society on Thrombosis and Hemostasis (ISTH) utfärdat riktlinjer för valet av tester som ska användas.
Två separata testsystem som använder olika principer bör användas.
Diluted Russell viper venom time (DRVVT) bör användas i alla fall. Detta test anses vara specifikt och robust för upptäckt av lupus antikoagulantia.
Det andra testet som ska utföras är APTT med kiseldioxid som aktivator på grund av dess känslighet. Användning av kaolin eller ellaginsyra som aktivator rekommenderas inte, inte heller användning av utspädd tromboplastintid, av tester baserade på ekarin- eller textarintid eller kaolinkoagulationstid.

Blandningsstudie

Den poolade plasma som används ska framställas i enlighet med de vanliga metoderna. Dubbel centrifugering krävs för att erhålla plasma som innehåller mindre än 10 000 trombocyter/µL och som har en aktivitet nära 100 % för alla faktorer. Kommersiell poolad plasma, antingen lyofiliserad eller fryst, kan användas under förutsättning att den uppfyller de nödvändiga villkoren och har validerats för detta ändamål.
Blandningstestet måste innefatta ett förhållande 1:1 mellan testplasma och poolad normal plasma utan förinkubation.
Trombintidstester före blandningsstudien skulle kunna påvisa förekomsten av heparin eller andra hämmare i provet. Vissa reagenser, särskilt de som används i DRVVT-tester, innehåller dock en heparinhämmare, vilket gör att testet kan utföras i prover som innehåller upp till 0,8 IE anti-Xa/mL.

Bekräftelsetester

Dessa innefattar utvärdering av korrigering av koagulationstiden för plasmaprovet i närvaro av överskott av fosfolipid. Tvåskiktsfosfolipider eller fosfolipider med hexagonal fas bör användas. Omvänt rekommenderas inte användning av frysta upptinade trombocyter på grund av variation mellan olika partier.

Exkludering av specifika hämmare riktade mot koagulationsfaktorer

Det är viktigt att screena för en specifik hämmare riktad mot en viss koagulationsfaktor (i första hand faktor VIII eller faktor IX), eftersom förekomsten av sådana hämmare kan utsätta patienterna för en hög och potentiellt livshotande blödningsrisk, vilket kräver omedelbar hantering av specialiserade team. Detta test omfattar analys av faktorn i fråga och, vid behov, specifik screening för och analys av inhibitorn.