O que são Modelos de Roedores Grávidas Cronometrados?

Ratos e ratos grávidos cronometrados são importantes ferramentas de pesquisa, com aplicações em pesquisa de desenvolvimento, engenharia genética e geração de culturas de tecidos. Eles são a forma mais eficiente de obter uma coorte de embriões, fetos ou filhotes com uma idade precisamente definida e acasalada. Mas o que são exatamente ratos grávidos cronometrados?

O que são ratos e ratos grávidos cronometrados?

Uma fêmea grávida cronometrada é um rato ou rato com uma data de acasalamento precisamente conhecida. Isto permite a colheita de embriões ou fetos em idade gestacional desejada, ou a produção de ninhadas nascidas num dia desejado.
Estes acasalamentos cronometrados são realizados através do estabelecimento de acasalamentos num dia específico e verificação de evidências de cópula no dia seguinte. As fêmeas que apresentam evidência de cópula (tampas de esperma em ratos, esfregaços vaginais positivos em ratos) são isoladas. Este facto aponta o acasalamento – e presumivelmente a concepção – para um período particular de vinte e quatro horas.
No Taconic Biosciences, o dia de detecção de espermatozóides nas fêmeas é chamado de “data positiva de espermatozóides” e é considerado o primeiro dia de gestação (todos os modelos de gravidez cronometrada devem ser ordenados pela data positiva de espermatozóides).
Durante os estágios iniciais da gravidez, é difícil confirmar a gravidez por observação visual ou palpação. Aos 14 dias, a gravidez pode ser confirmada pela observação visual e palpação de filhotes in utero.

Diapausa embrionária em ratos e ratos grávidos cronometrados

Métodos transversais são usados para determinar a idade gestacional incluindo desenvolvimento, peso, tamanho e aparência, porém o tamanho da ninhada influencia esses fatores. Uma excelente referência está disponível online na UNSW para ratos e camundongos.
O desenvolvimento de embriões e fetos normalmente prossegue ao longo de uma linha temporal bem definida, os pesquisadores ocasionalmente observam que uma colheita parece consistir de embriões ou fetos mais jovens do que o comprimento gestacional conhecido sugere.
Diapausa embrionária pode ser o provável culpado naqueles casos em que embriões ou fetos aparecem mais jovens do que o esperado. A diapausa embrionária é uma parada temporária no desenvolvimento embrionário que ocorre antes da implantação do blastocisto. Isto pode ser induzido por factores de stress ambiental ou por factores maternos, como a lactação1. Como resultado, a taxa real de desenvolvimento embrionário pode variar a partir da idade gestacional nominal.

Estirpes e Estirpes Preferidas para Acasalamento Temporizado

Ratos

O excelente desempenho reprodutivo do modelo Sprague Dawley® torna-o uma escolha preferida para gerar ratos fêmeas grávidas cronometradas. Embriões de ratos Sprague-Dawley® de gestação temporizada são usados no estudo do desenvolvimento embrionário, teratologia e toxicologia reprodutiva, bem como em experimentos usando tecido fetal de idades embrionárias específicas.

Ratos

O camundongo suíço Webster® de raça avançada também tem desempenho reprodutivo superior e é uma excelente escolha para experimentos nos quais um modelo de camundongo de raça avançada é aceitável. Se for necessária uma linhagem consanguínea, o rato Black 6 é normalmente utilizado. Ratos Webster suíços prenhes com tempo de gestação normalmente fornecem maior produção de embriões/fetus em comparação com o Black 6, que tem ninhadas menores.

Aplicações de ratos e ratos prenhes com tempo de gestação

Animais prenhes com tempo de gestação são usados extensivamente em engenharia genética, desenvolvimento de culturas de tecidos, e pesquisa de desenvolvimento. A capacidade de colher embriões e fetos em determinados estágios gestacionais é crítica para estes estudos.

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• Geração Rápida de Ratos e Mutantes de Ratos pelo CRISPR/Cas em Embriões de Uma Célula