Abstract
O grão de arroz é uma das culturas alimentares mais importantes do mundo, e o seu cultivo é uma ocupação importante no Estado de Anambra, Nigéria. Estes agricultores de arroz estão expostos a vários agentes que os predispõem a micoses cutâneas. O objetivo deste trabalho foi o de rastrear os orizicultores para detectar lesões sugestivas de micoses cutâneas e de isolar e identificar agentes fúngicos associados à infecção. Este levantamento foi realizado entre novembro de 2009 e junho de 2011 no estado de Anambra, Nigéria. Foram processadas amostras clínicas coletadas de 201 agricultores com lesões sugestivas de micoses cutâneas e identificados os organismos. Foram utilizados questionários para obter outros dados necessários e foram analisados estatisticamente. Dos 2.580 produtores de arroz rastreados, 201 (7,79%) apresentaram lesões positivas. Os organismos recuperados incluíram Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp., Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum, e Penicillium pinophilum. No final deste trabalho, observou-se que a onicomicose era a mais prevalente com os moldes não-dermatofitosos, tornando-se agora agentes muito importantes de micoses cutâneas entre os produtores de arroz.
1. Introdução
A cultura do arroz é uma das principais ocupações na parte norte do estado de Anambra, Nigéria. Este cereal, que é uma das culturas alimentares mais importantes do mundo, é cultivado quer em áreas pantanosas de terras baixas com muita água, quer num planalto ou em regiões montanhosas onde a precipitação natural fornece uma quantidade adequada de água. A preparação da terra, o arado do campo, usando esterco, fertilizantes, pesticidas e herbicidas, a sementeira de sementes de arroz, o transplante de mudas de arroz e a colheita são feitos manualmente por estes agricultores que os predispõem a micoses cutâneas.
Micoses cutâneas são infecções fúngicas patogênicas que afetam as camadas queratinizadas da pele e seus apêndices (unhas, cabelos). Não afecta os tecidos vivos. Estas infecções são causadas principalmente por dermatófitos e leveduras. Além dos patógenos aceitos, os moldes não dermatófitos estão se tornando significativos nas micoses cutâneas .
Têm havido relatos de aumento assustador na incidência de infecções fúngicas nos últimos tempos. Estes têm sido ligados por Terrell , Meis e Verweij , e Rolston a tratamentos médicos, condições imuno-comprometidas, desnutrição, certas cirurgias, e metais pesados como o mercúrio. Outros fatores que podem predispor a infecções fúngicas segundo Gugnani , Shenoi et al. , e Oyeka e Eze incluem higiene pessoal, vida lotada e más condições sanitárias, tamanho da família, idade, clima quente e úmido, status socioeconômico, e viagens internacionais. Trabalhadores agrícolas que estão expostos a vários agentes irritantes, a saber, lama, esterco de vaca ou outros tipos de esterco, fertilizantes, herbicidas, pesticidas, poeira e solo (que é considerado um reservatório da maioria dos organismos patogênicos, incluindo fungos dermatófitos e não dermatófitos) também são predispostos a infecções fúngicas .
Infecções fúngicas causadas por moldes dermatófitos e não dermatófitos foram amplamente relatadas como sendo um problema de saúde pública na Nigéria e em todo o mundo. Isto, no entanto, nunca é demais salientar, pois a natureza contagiosa entre as comunidades animais; o elevado custo do tratamento, a dificuldade de controlo e as consequências para a saúde pública explicam a sua grande importância. Assim, este estudo foi concebido para relatar os moldes dermatófitos e não dermatófitos associados a micoses cutâneas entre os produtores de arroz do Estado de Anambra, Nigéria.
2. Materiais e Método
Dois mil, quinhentos e oitenta (2.580) produtores de arroz, incluindo adultos e crianças, foram rastreados para lesões sugestivas de micoses cutâneas. As lesões foram avaliadas para prurido, escamação, fissuras, vermelhidão da pele e distrofia das unhas. Questionários foram utilizados para obter informações sobre sexo, idade, localização da lesão, nível educacional, tamanho da família, natureza do alojamento familiar, presença de animais de estimação/animais domésticos na casa e duração da lesão, se o agricultor utiliza esterco, fertilizante, herbicidas ou pesticidas.
2,1. Coleta de espécimes clínicos
As lesões foram limpas com álcool a 70%, e as raspas foram coletadas assepticamente de perto das bordas de avanço destas lesões com bisturi estéril. Amostras de unhas dos dedos das mãos e dos pés foram coletadas com clipes de unhas após a limpeza das unhas com álcool a 70%. As amostras foram coletadas em bolsas de amostra, transferidas para o laboratório de microbiologia da Universidade Nnamdi Azikiwe, Awka, Nigéria, e processadas dentro de 2 h. Também foram coletadas amostras de esfregaços de dedo do pé e da mão após a limpeza com álcool a 70% com varas de esfregaço estéreis.
2,2. Processamento do espécime
Lâminas preparadas com 20% de KOH para algumas porções de raspas de pele e aparas de unhas. As porções restantes e os cotonetes de dedo do pé/da mão foram inoculados em placas duplicadas contendo Sabouraud Dextrose Agar (SDA) (Biotech) suplementado com 0,05 mg/mL de cloranfenicol e 0,5 mg/mL de ciclo-heximida. Outra placa duplicada com 0,05 mg/mL apenas de cloranfenicol foi também inoculada com a amostra. As placas foram incubadas a 27°C durante 4 semanas. Placas positivas com crescimento fúngico foram purificadas por subcultura das diferentes colônias em slants frescos de SDA sem antibióticos.
2,3. Identificação de Isolados
Isolados foram identificados com base em um estudo detalhado de suas morfologias bruta e microscópica e comparada com a descrição padrão dada por Campbell e Stewart , Guy St-Germain e Richard , e De Hoog et al. . Dez dos isolados foram identificados utilizando a sequência da região interna do espaçador transcrito do DNA ribossômico do isolado no Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlim, Alemanha.
2.4. Análise estatística
Os resultados e dados obtidos a partir do questionário distribuído aos produtores de arroz afetados foram analisados estatisticamente utilizando os testes qui-quadrado, Kruskal-Wallis, e Mann-Whitney. Os resultados foram testados para um nível significativo de 0,05.
De um total de 2.580 agricultores testados para infecções cutâneas, 201 (7,79%) pessoas apresentaram lesões sugestivas de infecção fúngica. As amostras coletadas foram positivas por KOH e cultura. O monte de KOH mostrou fragmentos de hifas sépticas em algumas amostras e não sépticas em outras. Entre a população do estudo com infecção cutânea, 78 (38,81%) eram homens, enquanto 123 (61,19%) eram mulheres. Noventa (44,78%) das 201 amostras eram de infecção de unhas dos dedos, 45 (22,39%) de unhas dos pés, 27 (13,43%) de infecção de pele glabra, 20 (9,95%) de infecção de pés, 12 (5,97%) de infecção de dedos/teia e 7 (3,48%) de infecção de couro cabeludo. A Tabela 1 mostra a distribuição das micoses cutâneas de acordo com o local da infecção, sexo e idade dos produtores de arroz. A análise dos casos de infecção de acordo com a idade dos produtores de arroz mostrou que a infecção foi estatisticamente significativa com a idade () e foi registrada mais na faixa etária de 16-30 anos (47,76%), seguida pela faixa etária de 31-45 anos (35,82%) (Tabela 1). A infecção também foi relatada mais entre as famílias que viviam em alojamentos lotados (), agricultores que partilhavam instalações () e aqueles que tinham animais de estimação/animais domésticos ().
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Um total de 225 isolados fúngicos, compreendendo 48 (21,33%) dermatófitos (Tabela 2) e 177 (78,67%) moldes não dermatófitos (Tabela 3) foram recuperados das amostras. T. rubrum (11,11%) e A. candidus (16,44%) foram os moldes de dermatófitos e não dermatófitos mais freqüentemente isolados, respectivamente. Os isolados identificados no Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlim, Alemanha, pertenciam às espécies Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum e Fusarium.
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4. Discussão
O presente estudo serve para enfatizar a importância da saúde pública da infecção fúngica entre os produtores de arroz no estado de Anambra, Nigéria. A infecção do dedo e da unha do pé era mais frequente do que a de outras partes do corpo e mais prevalente nas fêmeas. A maior prevalência desta infecção entre as fêmeas pode ser atribuída ao fato de que as fêmeas usam mais os dedos no cultivo e colheita de arroz do que os machos. Isto concorda com os relatos de El Sayed et al., e Souza et al. . Souza et al. relataram que 72,25% dos casos de onicomicose de seu estudo no Japão ocorreram entre as fêmeas, enquanto Kazemi e Charles relataram maior prevalência desta infecção entre os machos, apesar de seus estudos não terem sido realizados entre os orizicultores. Isto também é apoiado pelos achados de Blank et al. e Shenoi et al. que relataram uma alta taxa de infecção nas unhas entre os trabalhadores do arrozal na Índia.
Infecção por escândalo foi observada apenas em crianças e provavelmente pode ter sido transmitida através das mãos infectadas de suas mães e outros parentes. Os homens (71,43%) tiveram mais infecção do que as mulheres (28,57%). Oyeka fez a mesma observação e associou-a à baixa higiene pessoal dos machos em comparação com as fêmeas.
Os agricultores na faixa etária de 16-30 anos registraram mais infecções do que os outros grupos etários e poderia ser explicado pelo fato de que este grupo etário está mais ativamente envolvido na cultura do arroz do que os grupos etários mais jovens e mais velhos e tendem a suar mais.
Transmissibilidade de infecções fúngicas entre os membros da família tem sido amplamente relatada na Nigéria e apoia os resultados deste estudo onde foi relatada uma maior taxa de infecção entre as famílias que viviam em acomodações lotadas (), aquelas que compartilhavam instalações () e aquelas que tinham animais de estimação/animais domésticos (). Estas instalações e animais podem funcionar como reservatório de fungos/esporos através dos quais a infecção pode ser facilmente transferida para os agricultores.
Uma observação importante feita durante este estudo foi que os produtores de arroz não usaram botas nem luvas de mão durante o trabalho agrícola, pois as botas afundam na lama e reduzem sua velocidade de trabalho de acordo com esses produtores. A não utilização do pé e da mão protectores expõe estes agricultores a agentes de infecções. Observação semelhante foi feita por Shenoi et al. . Também foi observada uma má higiene pessoal entre estes agricultores que é um factor conhecido por predispor as pessoas a todos os tipos de infecções, incluindo as infecções fúngicas.
Tricofiton rubrum foi o dermatófito mais frequentemente recuperado (11,11%) neste estudo. Foi o único organismo fúngico recuperado de todos os sítios do corpo, excepto da teia dos dedos dos pés e dos pés. Isto concorda com o trabalho de outros pesquisadores que relataram o T. rubrum como o agente etiológico mais comum das dermatofitoses de diferentes partes do corpo. Este estudo também demonstrou que, além da infecção cutânea por fungos causadores de dermatófitos, os moldes não dermatófitos estão se tornando agentes etiológicos muito importantes da infecção da pele. Os moldes não dermatófitos foram mais frequentemente isolados (78,67%) neste estudo do que os dermatófitos habituais (31,33%), especialmente na onicomicose. Embora alguns trabalhadores tenham relatado dermatófitos como sendo responsáveis pela maioria dos casos de onicomicose, estudos epidemiológicos também mostraram que Aspergillus sp. são agentes fúngicos emergentes da onicomicose das unhas dos pés. Está agora em segundo lugar em Scopulariopsis sp. e depois Fusarium solani em onicomicose não dermatofítica. Aspergillus sp. foi o molde não-materiófito mais predominantemente isolado neste estudo, seguido por Scopulariopsis sp. e depois Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum e Eupenicillium javanicum que, de acordo com a literatura, não tinham sido isolados neste trabalho, não tinham estado envolvidos na infecção da pele. Eles foram relatados como sendo freqüentemente isolados do solo e estão envolvidos na produção e sacarificação de diferentes enzimas industriais como B-D-manase, endoglucanase, -glucosidase e pectinase e na sacarificação de polissacarídeos de cevada, aveia e palha de trigo, e Solka-Floc . A capacidade destes organismos de produzir as enzimas acima mencionadas poderia explicar a sua capacidade de também degradar as áreas queratinizadas da pele. A alta freqüência no isolamento de moldes não dermatófitos, como observado neste estudo, poderia ser atribuída ao seu isolamento regular da água, ar, solo e vegetação, como registrado por Oyeka e Okoli e Cribier e Bakshi . Isso faz com que suas chances de entrar em contato com a pele humana sejam altas, dando origem a uma infecção oportunista.
5. Conclusão
Ao final deste estudo, observou-se que a infecção cutânea fúngica das unhas foi a mais prevalente. Portanto, deve-se ter o cuidado de controlar a propagação desta infecção, uma vez que estes agricultores compartilham os serviços públicos com as massas. Também foi observado que, além dos dermatófitos, os moldes não dermatófitos são agora agentes etiológicos muito importantes da infecção da pele, especialmente na onicomicose. Outros testes serão realizados para determinar a patogenicidade de Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum e Eupenicillium javanicum recuperados neste trabalho.
Conhecimento
Os autores desejam agradecer à Dra. Yvonne Graeser da Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlim, Alemanha, que ajudou na identificação dos isolados fúngicos.
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