Les souris et les rats gestants chronométrés sont des outils de recherche importants, avec des applications dans la recherche sur le développement, le génie génétique et la génération de cultures de tissus. Ils constituent le moyen le plus efficace d’obtenir une cohorte d’embryons, de fœtus ou de petits dont l’âge est précisément défini et apparié. Mais qu’est-ce qu’une souris enceinte programmée ?
Qu’est-ce qu’une souris ou un rat enceinte programmée ?
Une femelle enceinte programmée est une souris ou un rat dont la date d’accouplement est connue avec précision. Cela permet soit de récolter des embryons ou des fœtus à un âge gestationnel souhaité, soit de produire des portées nées à un jour souhaité.
Ces accouplements chronométrés sont réalisés en mettant en place des accouplements un jour précis et en vérifiant les preuves de copulation le jour suivant. Les femelles qui présentent des signes de copulation (bouchons de sperme chez les souris, frottis vaginaux positifs chez les rats) sont isolées. Cela permet de localiser l’accouplement – et vraisemblablement la conception – à une période particulière de vingt-quatre heures.
A Taconic Biosciences, le jour de la détection des spermatozoïdes chez les femelles est appelé « date de sperme positif » et est considéré comme le premier jour de la gestation (Tous les modèles gravides chronométrés doivent être commandés par la date de sperme positif).
Au cours des premiers stades de la grossesse, il est difficile de confirmer la grossesse par observation visuelle ou palpation. A quatorze jours, la grossesse peut être confirmée par observation visuelle et palpation des petits in utero.
Diapause embryonnaire chez les souris et les rats en gestation chronométrée
Plusieurs méthodes sont utilisées pour déterminer l’âge gestationnel, notamment le développement, le poids, la taille et l’apparence, cependant la taille de la portée influence ces facteurs. Une excellente référence est disponible en ligne à l’UNSW pour les rats et les souris.
Le développement des embryons et des fœtus se déroule généralement le long d’une ligne de temps bien définie, les chercheurs observent parfois qu’une récolte semble être composée d’embryons ou de fœtus plus jeunes que la longueur gestationnelle connue ne le suggère.
La diapause embryonnaire peut être le coupable probable dans ces cas où les embryons ou les fœtus semblent plus jeunes que prévu. La diapause embryonnaire est un arrêt temporaire du développement embryonnaire qui se produit avant l’implantation du blastocyste. Elle peut être induite par des facteurs de stress environnementaux ou par des apports maternels tels que la lactation1. Par conséquent, le taux réel de développement de l’embryon peut varier par rapport à l’âge gestationnel nominal.
Souches et stocks préférés pour l’accouplement programmé
| Modèle | Age d’élevage | Taille de la portée | Gestation typique |
| Swiss Webster | 8 semaines | 11 chiots | 19 – 20 jours |
| Noir 6 | 8 semaines | 7 chiots | 18 – 20 jours |
| Sprague Dawley® | 8 – 10 semaines | 10 chiots | 21 – 23 jours |
Rats
L’excellente performance reproductive du modèle Sprague Dawley® en fait un choix privilégié pour la génération de rats femelles gravides synchronisées. Les embryons de rats Sprague-Dawley® gestants chronométrés sont utilisés dans l’étude du développement embryonnaire, de la tératologie et de la toxicologie de la reproduction, ainsi que dans les expériences utilisant des tissus fœtaux d’âges embryonnaires spécifiques.
Souris
La souris Swiss Webster consanguine présente également des performances reproductives supérieures et constitue un excellent choix pour les expériences dans lesquelles un modèle de souris consanguine est acceptable. Si une souche consanguine est requise, la souris Black 6 est couramment utilisée. Les souris Swiss Webster à gestation chronométrée fournissent généralement des rendements embryons/fœtus plus élevés que la Black 6, qui a des portées plus petites.
Applications des souris et des rats à gestation chronométrée
Les animaux à gestation chronométrée sont largement utilisés dans le génie génétique, le développement de cultures de tissus et la recherche sur le développement. La capacité de récolter des embryons et des fœtus à des stades gestationnels particuliers est essentielle pour ces études.
- La récolte d’embryons (généralement après superovulation et accouplement programmé) est une étape critique dans la création de modèles animaux génétiquement modifiés. Les zygotes sont généralement utilisés pour la micro-injection pronucléaire (y compris l’édition de gènes CRISPR), tandis que les blastocystes sont récoltés à un moment ultérieur et utilisés comme embryons donneurs pour l’injection de cellules souches embryonnaires modifiées.
- Les embryons et les fœtus de souris et de rat sont couramment utilisés pour générer des cultures de tissus primaires, comme les cultures neuronales ou les fibroblastes d’embryons de souris.
- Les souris et les rats en gestation chronométrée sont couramment utilisés pour étudier l’impact du régime alimentaire ou d’autres apports pendant la grossesse et sur la progéniture qui en résulte.
Voyez les webinaires de Taconic Biosciences :
- La souris la plus importante au monde – Votre guide de la souris C57BL/6
- Génération rapide de mutants de souris et de rats par CRISPR/Cas dans des embryons à une cellule
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