Des tests de coagulation sont effectués pour démontrer la présence d’un anticoagulant lupique capable de prolonger le temps des tests de coagulation à base de phospholipides.
La présence d’un anticoagulant lupique est hautement spécifique du STA et il existe une forte association entre ce dernier et les événements thrombotiques ou la perte fœtale.
Cependant, les nombres de faux positifs et de faux négatifs sont assez élevés.
De nombreux facteurs peuvent affecter le manque de sensibilité et de spécificité de ces tests, notamment les variables pré-analytiques, analytiques et post-analytiques.
Critères de diagnostic du lupus anticoagulant circulant
Quatre de ces critères existent et sont résumés ci-dessous.
1. Allongement des temps de test de coagulation dépendant des phospholipides
2. Mise en évidence d’une inhibition dans un test mixte patient/plasma normal
3. Mise en évidence que le temps de coagulation prolongé est phospholipide-dépendant : raccourcissement ou correction du temps de coagulation initialement prolongé par l’ajout d’un excès de phospholipides (test de confirmation)
4. Exclusion des inhibiteurs spécifiques dirigés contre les facteurs de coagulation (par ex.par exemple les anticorps anti-facteur VIII)
Variables pré-analytiques dans le dépistage de l’anticoagulant lupique circulant
L’étape pré-analytique est cruciale pour le diagnostic du STA.
La présence de plaquettes résiduelles dans le plasma peut affecter les tests de coagulation qui dépendent des phospholipides dérivés des plaquettes ; ces phospholipides peuvent neutraliser les anticorps antiphospholipides présents dans l’échantillon et produire des faux négatifs. Il est donc recommandé d’effectuer une double centrifugation comprenant une première centrifugation à 2 000g pendant 15 minutes à température ambiante, suivie d’une seconde centrifugation à plus de 2 500g pendant 10 minutes afin d’obtenir un plasma contenant moins de 10 000 plaquettes/µL.
Choix des tests
De nombreux tests dépendants des phospholipides ont été proposés.
En raison de la sensibilité variable entre les tests ainsi que du manque de standardisation de certains tests, la Société internationale de thrombose et d’hémostase (ISTH) a publié des directives concernant le choix des tests à utiliser.
Deux systèmes de tests distincts utilisant des principes différents doivent être utilisés.
Le temps de venin de vipère de Russell dilué (DRVVT) doit être utilisé dans tous les cas. Ce test est considéré comme spécifique et robuste pour la détection des anticoagulants lupiques.
Le second test à réaliser est le TCA utilisant la silice comme activateur en raison de sa sensibilité. L’utilisation de kaolin ou d’acide ellagique comme activateur n’est pas recommandée, de même que l’utilisation du temps de thromboplastine dilué, des tests basés sur les temps d’écarine ou de textarine, ou du temps de coagulation de kaolin.
Etude de mélange
Le plasma groupé utilisé doit être préparé selon les méthodes habituelles. Une double centrifugation est nécessaire afin d’obtenir un plasma contenant moins de 10 000 plaquettes/µL et ayant une activité proche de 100% pour tous les facteurs. Le plasma poolé commercial, lyophilisé ou congelé, peut être utilisé à condition qu’il réponde aux conditions requises et qu’il ait été validé à cette fin.
L’essai de mélange doit impliquer un rapport de 1:1 entre le plasma à tester et le plasma normal poolé sans pré-incubation.
La détermination du temps de thrombine avant l’étude de mélange pourrait démontrer la présence dans l’échantillon d’héparine ou d’autres inhibiteurs. Cependant, certains réactifs, notamment ceux utilisés dans les tests DRVVT, contiennent un inhibiteur de l’héparine, permettant de réaliser le test dans des échantillons contenant jusqu’à 0,8 UI d’anti-Xa/mL.
Tests de confirmation
Ils impliquent l’évaluation de la correction du temps de coagulation de l’échantillon de plasma en présence d’un excès de phospholipide. Il convient d’utiliser des phospholipides bicouches ou des phospholipides à phase hexagonale. A l’inverse, l’utilisation de plaquettes congelées-décongelées n’est pas recommandée en raison des variations inter-lots.
Exclusion des inhibiteurs spécifiques dirigés contre les facteurs de coagulation
Le dépistage d’un inhibiteur spécifique dirigé contre un facteur de coagulation donné (principalement le facteur VIII ou le facteur IX) est essentiel, car la présence de tels inhibiteurs peut exposer les patients à un risque hémorragique élevé et potentiellement mortel nécessitant une prise en charge immédiate par des équipes spécialisées. Ce test implique le dosage du facteur en question et, si nécessaire, un dépistage et un dosage spécifiques de l’inhibiteur.
Laisser un commentaire