Nukleoli

Nukleoli sisältyy solun tumaan.

Nukleoli (monikossa nukleolit) on eukaryoottisolujen tuman suuri, erillinen, pallomainen osa-alue, joka on ribosomaalisen RNA:n (rRNA:n) synteesin ja ribosomaalisten alayksiköiden kokoonpanon paikka. Nukleoliin viitataan joskus ”kalvottomana organellina” tai ”ydinkalvottomana organellina” organellin käsitteen laajemmassa merkityksessä; nukleoleilla ei kuitenkaan ole kalvoa, eivätkä ne siten ole organelleja teknisemmässä merkityksessä rakenteina, jotka on suljettu erikseen oman lipidikalvonsa sisään. Useimmissa kasvi- ja eläinsoluissa on yksi tai useampi nukleoli, mutta joillakin solutyypeillä ei ole yhtään.

Nukleoli on erittäin dynaaminen rakenne, jonka osat hajaantuvat mitoosin alkaessa ja kootaan uudelleen solunjakautumisen päätyttyä. Tämä monimutkainen rakenne toimii yhteistyössä muiden ydinkomponenttien kanssa tarjotakseen solulle arvokkaan tehtävän. Kun tämä monimutkainen yhteensovittaminen ihmissoluissa kuitenkin häiriintyy, esimerkiksi virusinfektion, synnynnäisten mutaatioiden tai lisääntyneen aktiivisuuden vuoksi, seurauksena voi olla useita ihmisen sairauksia.

Yleiskatsaus

Kaavio tyypillisestä eläinsolusta, jossa näkyvät alisoluiset komponentit. Organellit:
(1) nukleoli
(2) tuma
(3) ribosomit (pienet pisteet)
(4) vesikkeli
(5) karkea endoplasminen retikulum (ER)
(6) Golgin apparaatti
(7) sytoskeletti
(8) sileä endoplasminen retikulum (ER)
(9). mitokondriot
(10) vakuoli
(11) sytoplasma
(12) lysosomi
(13) sentriolit sentrosomin sisällä

Nukleoli on suuri ja erillinen ydinrakenne, joka on hyvin järjestäytynyt ja josta puuttuu kalvo. Nukleoluksen tärkein tehtävä on ribosomin komponenttien (rRNA, ribosomiproteiinit) biogeneesi ja kokoaminen. Tätä ribosomaalisen DNA:n (rDNA) transkription paikkaa on kutsuttu ”ribosomia tuottavaksi koneeksi” (Alberts ym. 1989). Nukleoli voidaan visualisoida elektronimikroskopian avulla, kun taas organisoitumista ja dynamiikkaa voidaan tutkia fluoresoivien proteiinimerkintöjen ja FRAP:n (Fluorescent Recovery after Photobleaching, fluoresoiva palautuminen valonhäviämisen jälkeen) avulla.

Valomikroskoopilla tarkasteltuna ei-mitoottisessa solussa nukleoli on ytimen selvin rakenne (Alberts ym. 1989). Solunjakautumisen alkuvaiheessa nukleolit kuitenkin pirstoutuvat (niitä ei enää näy metafaasissa). Telopaasin ja interfaasin välisessä siirtymävaiheessa ne kerääntyvät uudelleen kromatiinialueiden ympärille, joissa rDNA:n transkriptio käynnistyy uudelleen. RDNA-sekvenssit koodaavat ribosomien rRNA-molekyylejä (ribosomaalinen RNA).

Kalvon sitomisen sijasta nukleoli näyttää rakentuvan keskeneräisten ribosomin esiasteiden spesifisestä yhteenliittämisestä muodostaen suuren verkoston (Alberts ym. 2004). Nukleolista voidaan erottaa kolme aluetta: fibrillaarinen keskus (joka sisältää DNA:ta, jota ei aktiivisesti transkriboida), tiheä fibrillaarinen komponentti (sisältää transkriboitavia RNA-molekyylejä) ja granulaarinen komponentti (sisältää kypsyviä ribosomaalisia prekursoripartikkeleita) (Alberts ym. 1989). Tämä jälkimmäinen alue auttaa tekemään rajan ympäröivään nukleoplasmaan selväksi, vaikka kalvo puuttuu.

Sen vuoksi, että nukleolit suorittavat ribosomien tuotannon ja kypsymisen, niiden sisällä on suuri määrä ribosomeja. Ribosomien biogeneesin lisäksi nukleoleilla uskotaan olevan muitakin tehtäviä solujen toiminnassa. Lisäksi viimeaikaisten tutkimusten mukaan nukleoli vastaa myös erilaisten merkittävien pienten RNA-lajien salakuljetuksesta. Nukleoli auttaa niitä niiden kypsymisprosessissa ja matkalla lopulliseen solukohteeseensa. Lisäksi vaikka nukleoli muuttuu näkymättömäksi solun jakautumisen aikana, viimeaikaisissa tutkimuksissa on havaittu, että ne osallistuvat solusyklin säätelyyn. Useita sen ei-perinteisiä rooleja ovat muun muassa vuorovaikutus viruskomponenttien kanssa, kasvainsuppressorien ja onkogeenien toiminnan säätely, signaalitunnistuspartikkelien kokoaminen, pienten RNA-säikeiden modifiointi, ikääntymisen säätely ja telomeraasin toiminnan modulointi.

Varhaiset sytologit olivat niin kiinnostuneita helposti havaittavista nukleoleista, että eräässä katsauksessa vuodelta 1898 lueteltiin noin 700 viitteitä (Alberts ym. 1989). Sytologit osoittivat 1940-luvulla, että nukleolit sisältävät suuria pitoisuuksia RNA:ta ja proteiineja (Alberts ym. 1989). Vuonna 1964 John Gurdon ja Donald Brown löysivät solunukleolit afrikkalaisesta kynsisammakosta Xenopus laevis. He havaitsivat, että 25 prosentilla sammakon munista ei ollut nukleolia ja että tällaiset munat eivät olleet kykeneviä elämään. Puolella munista oli yksi nukleoli ja 25 prosentilla kaksi nukleolia. He päättelivät, että nukleoluksella oli elämän kannalta välttämätön tehtävä. Vuonna 1966 Max L. Birnstiel ja Hugh Wallace osoittivat hybridisaatiokokeilla, että nukleolit koodaavat ribosomaalista DNA:ta.

Nukleolien morfologia

Nukleolit koostuvat tyypillisesti kolmesta morfologisesti erilaisesta alueesta, jotka voidaan visualisoida elektronimikroskopialla (EM) (Hernandez-Verdun 2006a; 2006b; Olson ja Dundr 2005; Raška ym. 2006; Thiry ja Lafontaine 2005):

1. Fibrillar Center (FC):

• heikosti värjäytynyt EM:llä havainnoitaessa
• koostuu ”fibrilleistä” (± 50Ǻ Ø:ssä)
• pol I:n ja UBF:n läsnäolo
• moninkertainen määrä FC:itä samassa ytimessä
• määrältään vain 1 – 2 prosenttia ytimessä olevan ytimen kokonaistilavuudesta

2. Dense Fibrillar Center tai Dense Fibrillar Component (DFC):

• kerrotaan FC:n ympärillä
• kokoontuu ”tiheästi pakatuista fibrilleistä” (30-50 Ǻ Ø)
• sisältää suuren osan nukleolista, ± 17 prosenttia, ja se kuvastaa karkeasti nukleolien sitoutumista ribosomien biogeneesiin

3. Granulaarinen alue tai granulaarinen komponentti (GR):

• alue, joka käsittää sekä FC:n että DFC:n
• kokoontuu rakeista, joiden Ø on 150-200 Ǻ
• rakeinen alue, joka on rikas RNP-hiukkasten läsnäolosta johtuen
• ja jonka osuus on noin 75 prosenttia, se vie suurimman osan nukleolin kokonaistilavuudesta
• vaikkakaan nukleoli ei ole kalvosidonnainen, GC:n läsnäolosta johtuen raja ympäröivään kromatiiniin ja nukleoplasmaan on yleensä selvä.

Nukleoluksen merkittävä (lisä)komponentti on kromatiini, joka tunkeutuu organelliin ympäröivästä nukleoplasmasta.

Nukleoplasman ja nukleoluksen sisäosien välillä on jatkuva yhteys nukleolikanavien verkoston kautta. Näin molekyylipainoltaan jopa 2000 kDa:n makromolekyylit jakautuvat helposti koko nukleoliin.

Nukleoliin on tunnistettu vielä yksi rakenne, jota kutsutaan nukleolivakuoliksi. Nukleoluksessa on useita nukleolaarisia vakuoleja, mutta on edelleen epäselvää, onko niillä jokin toiminnallinen tai rakenteellinen tarkoitus.

Vaikka nukleoluksen ”kolmiosainen’ organisaatio” (FC, DFC, GC) on yleisesti hyväksytty, on ehdotettu, että tätä erityistä organisaatiota havaitaan vain korkeammissa eukaryooteissa ja että se kehittyi kaksiosaisesta organisaatiosta siirryttäessä anamniooteista amniootteihin. Heijastaen rDNA:n intergeenisen alueen huomattavaa lisääntymistä alkuperäinen fibrillaarinen komponentti olisi jakautunut FC:ksi ja DFC:ksi (Thiry ja Lafontaine 2005).

Nukleoli ja rDNA:n transkriptio/rRNA:n prosessointi/ribosomikokoonpano

Nukleolien kokoonpano tapahtuu ei-sattumanvaraisesti. Nukleoli muodostuu tiettyjen geneettisten lokusten ympärille, joita kutsutaan nukleoliorganisaatioalueiksi (NOR). Aiemmin McClintockin ”nukleolaariseksi organisoivaksi elementiksi” kuvaama NOR koostuu rRNA-geenien tandemtoistoista, joita on useita kopioita koko genomissa. Esimerkiksi ihmisen genomissa on yli 200 kopiota rRNA-geeniä, ja ne ovat keskittyneet viiteen eri kromosomiin. Tyypillisessä eukaryootissa rRNA-geeni koostuu promoottorista, sisäisestä ja ulkoisesta transkriptoidusta spacerista (ITS/ETS), rRNA:ta koodaavista sekvensseistä (18S, 5.8S, 28S) ja ulkoisesta ”ei-” transkriptoidusta spacerista (Alberts ym. 2002).

Ribosomibiogeneesissä tarvitaan kolme eukaryoottista RNA-polymeraasia (pol I, II, III), jotka toimivat koordinoidusti. Alkuvaiheessa rRNA-geenit transkriboidaan yhtenä yksikkönä nukleoluksessa RNA pol I:n toimesta. Jotta tämä transkriptio tapahtuisi, tarvitaan useita pol I:een assosioituneita tekijöitä ja rDNA-spesifisiä transaktiotekijöitä. Hiivassa tärkeimpiä ovat UAF (upstream activating factor, ylävirran aktivoiva tekijä), TBP (tata-box binding protein, tata-laatikkoa sitova proteiini) ja CF (core factor, ydintekijä), jotka sitovat promoottorielementtejä ja muodostavat esi-initiaatiokompleksin (pre-initiation complex, PIC), jonka pol I puolestaan tunnistaa.

Ihmisillä samanlainen PIC muodostuu SLI:stä, promoottorin selektiivisyystekijästä, joka koostuu TBP:stä ja TBP-assosioituneista tekijöistä (TBP-associated factors, TAF), IF:stä, transkription initiaatiotekijästä, ja UBF:stä, ylävirtaan sitoutuvasta tekijästä.

Ribosomigeenin transkription tuloksena syntyy pitkä esiaste-molekyyli (45S pre-rRNA), joka sisältää vielä ITS:n (internal transcripted sapcer) ja ETS:n (external transcripted spaced). Jatkokäsittely, johon liittyy metylaatio ja endo-/eksonukleaasiaktiivisuus, on siis tarpeen 18S rRNA-, 5,8S- ja 28S rRNA-molekyylien tuottamiseksi. RNA:ta muokkaavat entsyymit tuodaan omiin tunnistuskohteisiinsa vuorovaikutuksessa ohjaavien RNA:iden kanssa, jotka sitovat näitä erityisiä sekvenssejä. Opas-RNA:t kuuluvat pienten nukleolaaristen RNA:iden (snoRNA:iden) luokkaan, jotka ovat kompleksoituneet proteiinien kanssa ja ovat olemassa pieninä nukleolaaris-ribonukleoproteiinipartikkeleina (RNP:t) (snoRNP:t).

Kun rRNA on prosessoitu, rRNA-molekyylit ovat valmiita koottaviksi ribosomeiksi. Tähän biogeneesiin tarvitaan kuitenkin ylimääräinen RNA-molekyyli, 5S rRNA. Hiivassa 5S rDNA:n sekvenssi on lokalisoitunut ulkoiseen ”ei-transkriboituun” spaceriin, ja RNA pol III transkriboi sen nukleoluksessa. Korkeammissa eukaryooteissa ja kasveissa tilanne on monimutkaisempi, sillä 5S rDNA-sekvenssi sijaitsee NOR:n ulkopuolella ja transkriboituu nukleoplasmassa, minkä jälkeen se tuodaan nukleoliin osallistumaan ribosomin kokoamiseen. Tähän kokoonpanoon eivät osallistu ainoastaan rRNA, vaan myös ribosomiproteiinit. Näitä r-proteiineja koodaavat geenit transkriboidaan pol II:n toimesta nukleoplasmassa ”perinteistä” proteiinisynteesireittiä (transkriptio, pre-mRNA:n prosessointi, kypsän mRNA:n vienti ytimeen ja translaatio sytoplasman ribosomeilla). Kypsät r-proteiinit tuodaan sitten takaisin nukleoliin. RRNA:n ja r-proteiinien yhdistyminen ja kypsyminen johtaa ribosomin 40S- ja 60S-alayksiköiden muodostumiseen. Nämä viedään ydinhuokoskompleksien kautta sytoplasmaan, jossa ne jäävät vapaiksi tai assosioituvat endoplasmiseen retikulumiin (Alberts ym. 2002; Cooper ja Hausman 2007).

Nukleolaarinen organisoituminen ja dynamiikka

Moninaiset nukleolaariset proteiinit ja pienet nukleolaariset RNA:t (snoRNA:t) assosioituvat muodostaakseen prosessointikoneiston, jota tarvitaan ribosomin biogeneesissä. Ne osallistuvat syntyvien rRNA-transkriptien modifiointiin metylaation (2′-O-metylaatio/pseudouridylaatio) ja pre-RNA:n endonukleolyyttisen pilkkomisen kautta. Nämä prosessointivaiheet rajoittuvat pääasiassa DFC:hen (dense fibrillar component, tiheä fibrillaarinen komponentti), mikä käy ilmi näiden snoRNP:iden (small-nuclear-ribonucleoprotein particles, pienet nukleiini-ribonukleoproteiinihiukkaset) läsnäolosta, jotka muodostavat proteiineja, esimerkiksi fibrillariinia, nukleoliinia ja U3 snoRNA:ta. Proteiini B23 ja NOP52, jotka osallistuvat prosessoinnin myöhempiin vaiheisiin. ovat lokalisoituneet GC:hen (granulaarinen komponentti).

Tämä osoittaa, että nukleolien järjestäytyminen on hyvin säänneltyä ja riippuvaista rRNA:n prosessoinnin vaiheista. Nämä havainnot ovat johtaneet myös hypoteesiin, että rDNA:n transkription on tapahduttava FC:ssä (fibrillaarisessa keskuksessa) tai FC:n ja DFC:n välisessä liitoskohdassa, koska pre-RNA-transkriptiot liikkuvat vektorimaisesti ulospäin, kun niitä prosessoidaan kypsiksi rRNA:ksi.

Jos tarkastellaan ribosomin biogeneesiin tarvittavien proteiinien ja RNA:iden kokonaisuutta, voidaan olettaa, että nukleoli muodostuu yksinkertaisesti siksi, että tietyt rDNA-geenien transkriptioon osallistuvat proteiinit sitoutuvat kohdealueisiinsa ja että niiden ympärillä tapahtuu kaikkien nasenttien rRNA:iden modifikaatioon osallistuvien elementtien spontaani kokoontuminen. Järjestäytyminen tapahtuu siis ribosomin biogeneesin seurauksena.

Tästä erityisestä kokoonpanoprosessista on käytetty useita kokeellisia lähestymistapoja yksityiskohtaisen kuvan saamiseksi. Tärkeimpiä ovat fluoresoivan proteiinin merkitseminen, jossa kiinnostava proteiini fuusioidaan fluoresoivaan proteiiniin, kuten ”vihreään fluoresoivaan proteiiniin” (GFP), ja fluoresoiva talteenotto valovärjäytymisen jälkeen (FRAP), jossa proteiini merkitään fuusioivalla proteiinilla, minkä jälkeen tutkimusalueen fluoresoivat molekyylit valkaistaan laserilla. Tutkittavan alueen fluoresenssin voimakkuus palautuu, koska valkaistut molekyylit diffusoituvat ulospäin ja valkaisemattomat molekyylit sisäänpäin. Edellisen lähestymistavan avulla voidaan seurata fluoresoivan kompleksin liikettä (3D+aika) ja jälkimmäisen avulla voidaan mitata fluoresoivan proteiinin viipymäaika (tietyllä alueella vietetty aika) (toisin sanoen solunsisäisen liikkuvuuden mittaaminen).

Kummatkin kokeelliset menetelmät nojautuvat kykyyn merkitä koko joukko nukleoliin assosioituvia proteiineja, kuten nukleolaarisia proteiineja, histoneja, DNA:ta sitovia proteiineja, transkriptiotekijöitä ja spliceosomeja. Merkittyjen proteiinien jäljittämisen ja viipymäajan mittaamisen avulla voitiin osoittaa nukleoliproteiinien nopeat assosiaatio-/dissosiaatioasteet muiden nukleolikomponenttien kanssa, proteiinien jatkuva vaihtuminen nukleolin ja nukleoplasman välillä interfaasin aikana sekä näiden nukleoliproteiinien osallistuminen muiden ydinalueiden kanssa. On esimerkiksi havaittu, että Cajalin kappaleet (CB) sisältävät runsaasti pieniä ydin- ja nukleolaarisia ribonukleoproteiineja ja että ne sisältävät useita nukleolaariseen prosessointiin liittyviä proteiineja, kuten fibrillariinia. Siksi on ehdotettu, että nukleolien ja Cajalin kappaleiden välillä pitäisi olla toiminnallinen yhteys (Hernandez-Verdun 2006a, 2006b).

Monet kokeelliset havainnot viittaavat siihen, että nukleolien muodostavien elementtien rekrytoituminen ei tapahdu sattumanvaraisesti ja että sitä säätelee solusyklin eteneminen. Mitoosin aikana transkriptiokoneisto pysyy tiiviisti yhteydessä rDNA:han. Sykliini B/Cdk1-proteiinikinaasikompleksi (PMF) kuitenkin tukahduttaa transkriptiota. Tämä kompleksi aktivoituu mitoosin alkaessa ja tukahduttaa ydintoimintoja fosforyloimalla useita proteiinikinaaseja tai rakenteellisia proteiineja, jotka osallistuvat solujen uudelleenjärjestelyihin, joita tarvitaan solun oikeaan jakautumiseen. Mitoosin lopussa, kun PMF hajoaa sykliini B:n proteolyyttisen pilkkomisen kautta, nukleolit kerääntyvät uudelleen rDNA-kohtien ympärille vastauksena rDNA-transkription uudelleen käynnistymiseen. Nukleoliproteiinit ovat, toisin kuin transkriptioon osallistuvat proteiinit, lokalisoituneet kromosomien periferiaan solusyklin M-vaiheen aikana. Tämä voidaan visualisoida fluoresoivalla proteiinimerkinnällä. Telofaasista G1:een siirryttäessä suurin osa niistä ryhmittyy Prenucleolar Bodies (PNB) -elimiin. Juuri nämä PNB:t suorittavat translokaation kromosomeista paikkoihin, joissa rDNA-transkriptio on alkanut. PNB:iden ajatellaan toimivan kokoamisalustana ja säiliönä proteiinikomplekseille, jotka vapauttavat prosessointiproteiineja rDNA-transkription paikoissa. Varhaiset prosessointiproteiinit, kuten fibrillariini, rekrytoituvat vastauksena sykliini B/Cdk1-aktiivisuuden vähenemiseen, kun taas myöhäiset prosessointiproteiinit, kuten B23 ja Nop52, rekrytoituvat vastauksena sykliiniriippuvaisen kinaasin (cdk) aktiivisuuteen. Näin eri prosessointiproteiinit voivat vapautua juuri silloin, kun niitä tarvitaan rRNA-synteesin aikana (Hernandez-Verdun 2006a, 2006b).

Nukleoliin liittyvät ihmisen sairaudet

Nukleolin toimintahäiriöön liittyvät ihmisen sairaudet voivat johtua virusinfektioista, lisääntyneestä nukleoliaktiivisuudesta tai yksinkertaisesti synnynnäisistä mutaatioista, jotka vaikuttavat nukleoliproteiineihin.

Jos virus sisältää genomissaan nukleolaarisen kohdentumissignaalin (nucleolar targeting signal, NOS), osa viruspartikkelista ohjataan kohti nukleolia. Näin on ihmisen immuunikatoviruksen (HIV) kohdalla, joka ohjaa HIV-1 Rev -proteiinin nukleoliin. Vuorovaikutuksen kautta B23-nukleoliproteiinin kanssa se täyttää tarkoituksensa säätelemällä HIV-1-mRNA:n spleikkausmallia, sillä se edistää spleikkaamattoman mRNA:n vientiä sytoplasmaan. On ehdotettu, että Rev-proteiini on lokalisoitunut nukleoliin tarjotakseen vaihtoehtoisen translokaatioreitin viruksen (splikoimattomalle/osittain splikoidulle) mRNA:lle nukleoplasmasta sytoplasmaan. Tällä tavoin viruksen mRNA:ta suojataan hajoamiselta (joka normaalisti tapahtuisi solun suojaamiseksi pre(käsittelemättömän)-mRNA:n translaatiolta).

Korostuneella nukleoliaktiivisuudella on vaikutusta ribosomien ylituotantoon, mikä johtaa lopulta tuumorigenesiin ja syöpään. Keskeinen tekijä näissä toimintahäiriöisissä nukleoleissa on proteiini c-myc, c-myc-proto-onkogeenin tuote. Se stimuloi ribosomien biogeneesiä säätelemällä suoraan pol I:tä, vaikuttamalla pol II:n, III:n transkriptioon ja assosioitumalla pre-initiaatiokompleksin SL1-komponenttiin, mikä lisää pol I:n rekrytoinnin tehokkuutta pre-initiaatiokompleksiin.

Lisäksi on kuvattu useita synnynnäisiä mutaatioita, jotka vaikuttavat nukleoliproteiineihin: Weinen oireyhtymä, Treacher Collinsin oireyhtymä ja synnynnäinen dyskeratoosin oireyhtymä (Hernandez-Verdun 2006a, 2006b; Raška ym. 2006).

Nukleolaarinen dominanssi

Nukleolaarista dominanssia on osoitettu myös rRNA-geeneille. Joissakin organismeissa, erityisesti kasveissa, kun kaksi ydintä yhdistetään hybridisaation aikana yhdeksi soluksi, kehittyvä organismi voi ”valita” yhden rRNA-geenisarjan transkriptiota varten. Toisen vanhemman rRNA-geenit tukahdutetaan eikä niitä yleensä transkriboida, vaikka tukahdutettujen tai ”alempiarvoisten” rRNA-geenien uudelleenaktivoituminen voi joskus tapahtua. Tätä rRNA-geenien transkription valikoivaa suosimista kutsutaan nukleaariseksi dominanssiksi.

• Alberts, B., D. Bray, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts ja J. D. Watson. Solun molekyylibiologia, 2. painos. New York: Garland Publishing, 1989. ISBN 0824036956.

• Alberts, B., A. Johnson, J. Lewis, M. Raff, K. Roberts ja P. Walter. 2002. Solun molekyylibiologia, 4. painos. New York: Garland Science. ISBN 0815332181.

• Cooper, G. M., ja R. E. Hausman. 2007. The Cell: A Molecular Approach. Washington, DC: ASM Press. ISBN 9780878932191.

• Hernandez-Verdun, D. 2006a. [http://www.springerlink.com/content/75n545v0g3186830 Nucleolus: Rakenteesta dynamiikkaan. Histochem Cell Biol 125: 127-137. Haettu 8. heinäkuuta 2008.

• Hernandez-Verdun, D. 2006b. The nucleolus: Malli ydintoimintojen organisoitumisesta. Histochem Cell Biol 126: 135-148. Haettu 8. heinäkuuta 2008.

• Khadzhiolov, A. A. 1985. Nukleoli ja ribosomien biogeneesi. Wien: Springer-Verlag. ISBN 3211817905.

• Olson, M. O. J. 2004. The Nucleolus. Georgetown, TX: Landes Bioscience/ Eurekah.Com. New York: Kluwer Academic/Plenum Publishers. ISBN 0306478730.

• Olson, M. O. J. ja M. Dundr. 2005. Nukleoluksen liikkuvat osat. Histochem Cell Biol 123: 203-216. Haettu 8. heinäkuuta 2008.

• Raška, I., P. J. Shaw, ja D. Cmarko. 2006. New insights into nucleolar architecture and activity. International Review of Cytology 255: 177-235. Haettu 23. heinäkuuta 2008.

• Thiry, M. ja L. J. Lafontaine. 2005. Nukleoluksen synty: Nukleolaaristen lokeroiden evoluutio. Trends in Cell Biology 15 (4). Haettu 8. heinäkuuta 2008.

• Thiry, M., ja G. Goessens. 1996. The Nucleolus During the Cell Cycle. New York: Springer; Austin, TX: R.G. Landes. ISBN 3540613528.

Kaikki linkit haettu 14.12.2018.

• Nucleolus under electron microscope II.

Akrosomi | Kloroplasti | Cilium/Flagellum | Centrioli | Endoplasminen retikulum | Endoplasminen retikulum | Golgin aparaatti | Lysosomi | Melanosomi | Melanosomi | Mitokondrio | Myofibrilliini. | Nucleus | Parenthesome | Peroxisome | Plastid | Ribosome | Vacuole | Vesicle