¿Qué son los ratones preñados cronometrados?Los ratones y ratas preñados cronometrados son importantes herramientas de investigación, con aplicaciones en la investigación del desarrollo, la ingeniería genética y la generación de cultivos de tejidos. Son la forma más eficaz de obtener una cohorte de embriones, fetos o crías con una edad exactamente definida y ajustada. Pero, ¿qué son exactamente los ratones preñados cronometrados?

¿Qué son los ratones y ratas preñados cronometrados?

Una hembra preñada cronometrada es un ratón o una rata con una fecha de apareamiento conocida con precisión. Esto permite la cosecha de embriones o fetos a una edad gestacional deseada, o la producción de camadas nacidas en un día deseado.
Estos apareamientos cronometrados se llevan a cabo estableciendo apareamientos en un día específico y comprobando la evidencia de copulación al día siguiente. Se aíslan las hembras que muestran indicios de cópula (tapones de esperma en ratones, frotis vaginales positivos en ratas). Esto señala el apareamiento -y presumiblemente la concepción- a un período particular de veinticuatro horas.
En Taconic Biosciences, el día de la detección de espermatozoides en las hembras se denomina «fecha positiva de espermatozoides» y se considera el Día Uno de la gestación (todos los modelos preñados cronometrados deben pedirse por la fecha positiva de espermatozoides).
Durante las primeras etapas de la preñez, es difícil confirmar la preñez por observación visual o palpación. A los catorce días, la gestación puede confirmarse mediante la observación visual y la palpación de las crías in utero.

Diapausa embrionaria en ratones y ratas preñados cronometrados

Se utilizan varios métodos para determinar la edad gestacional, incluyendo el desarrollo, el peso, el tamaño y la apariencia, sin embargo el tamaño de la camada influye en estos factores. Hay una excelente referencia disponible en línea en la UNSW para ratas y ratones.
El desarrollo de los embriones y los fetos procede normalmente a lo largo de una línea de tiempo bien definida, los investigadores observan ocasionalmente que una cosecha parece consistir en embriones o fetos más jóvenes de lo que la duración gestacional conocida sugeriría.
La diapausa embrionaria puede ser la probable culpable en esos casos en que los embriones o los fetos parecen más jóvenes de lo esperado. La diapausa embrionaria es una interrupción temporal del desarrollo embrionario que se produce antes de la implantación del blastocisto. Puede ser inducida por factores de estrés ambiental o por el aporte materno, como la lactancia1. Como resultado, la tasa real de desarrollo del embrión puede variar con respecto a la edad gestacional nominal.

Razas y poblaciones preferidas para el apareamiento cronometrado

Modelo Edad de cría Tamaño de la camada Gestación típica
Swiss Webster 8 semanas 11 cachorros 19 – 20 días . 20 días
Negro 6 8 semanas 7 cachorros 18 – 20 días
Sprague Dawley® 8 – 10 semanas 10 crías 21 – 23 días

Ratas

El excelente rendimiento reproductivo del modelo Sprague Dawley® lo convierte en la opción preferida para generar ratas preñadas cronometradas. Los embriones de ratas Sprague-Dawley® preñadas cronometradas se utilizan en el estudio del desarrollo embrionario, la teratología y la toxicología reproductiva, así como en experimentos en los que se utiliza tejido fetal de edades embrionarias específicas.

Ratones

El ratón suizo Webster de raza externa también tiene un rendimiento reproductivo superior y es una opción excelente para los experimentos en los que se acepta un modelo de ratón de raza externa. Si se requiere una cepa endogámica, se suele utilizar el ratón Black 6. Los ratones Swiss Webster preñados a tiempo suelen proporcionar un mayor rendimiento de embriones/fetos en comparación con el Black 6, que tiene camadas más pequeñas.

Aplicaciones de los ratones y ratas preñados a tiempo

Los animales preñados a tiempo se utilizan ampliamente en la ingeniería genética, el desarrollo de cultivos de tejidos y la investigación del desarrollo. La capacidad de cosechar embriones y fetos en etapas gestacionales concretas es fundamental para estos estudios.

  • La cosecha de embriones (normalmente tras la superovulación y el apareamiento cronometrado) es un paso crítico en la creación de modelos animales modificados genéticamente. Los cigotos se utilizan normalmente para la microinyección pronuclear (incluida la edición de genes CRISPR), mientras que los blastocistos se cosechan en un momento posterior y se utilizan como embriones donantes para la inyección de células madre embrionarias modificadas.
  • Los embriones y fetos de ratón y rata se utilizan habitualmente para generar cultivos de tejidos primarios, como cultivos neuronales o fibroblastos de embrión de ratón.
  • Los ratones y ratas preñados se utilizan habitualmente para estudiar el impacto de la dieta u otros aportes durante el embarazo y en la progenie resultante.
Seminarios web de Taconic BiosciencesVea los seminarios web de Taconic Biosciences:

  • El ratón más importante del mundo – Su guía sobre el ratón C57BL/6
  • Generación rápida de mutantes de ratón y rata mediante CRISPR/Cas en embriones unicelulares