Abstract

El grano de arroz es uno de los cultivos alimentarios más importantes del mundo, y su cultivo es una de las principales ocupaciones del estado de Anambra, Nigeria. Estos arroceros están expuestos a diversos agentes que los predisponen a las micosis cutáneas. El objetivo de este trabajo era examinar a los arroceros en busca de lesiones sugestivas de micosis cutáneas y aislar e identificar los agentes fúngicos asociados a la infección. Este estudio se llevó a cabo entre noviembre de 2009 y junio de 2011 en el estado de Anambra, Nigeria. Se procesaron muestras clínicas recogidas de 201 agricultores con lesiones sugestivas de micosis cutáneas y se identificaron los organismos. Se utilizaron cuestionarios para obtener otros datos necesarios y se analizaron estadísticamente. De los 2.580 arroceros examinados, 201 (7,79%) presentaron lesiones positivas. Los organismos recuperados fueron Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp, Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum y Penicillium pinophilum. Al final de este trabajo, se observó que la onicomicosis es la más prevalente y que los mohos no dermatofitos se están convirtiendo en agentes muy importantes de las micosis cutáneas entre los cultivadores de arroz.

1. Introducción

El cultivo del arroz es una de las principales ocupaciones en el norte del estado de Anambra, Nigeria. Este cereal, que es uno de los cultivos alimentarios más importantes del mundo, se cultiva en zonas bajas y pantanosas con abundante agua o en una meseta o región montañosa donde la lluvia natural proporciona una cantidad adecuada de agua. La preparación de la tierra, el arado del campo, el uso de estiércol, fertilizantes, plaguicidas y herbicidas, la siembra de las semillas de arroz, el trasplante de las plántulas de arroz y la cosecha se realizan manualmente por estos agricultores, lo que les predispone a las micosis cutáneas.

Las micosis cutáneas son infecciones fúngicas patógenas que afectan a las capas queratinizadas de la piel y sus apéndices (uñas, pelo). No afectan a los tejidos vivos. Estas infecciones están causadas principalmente por dermatofitos y levaduras. Además de los patógenos aceptados, los mohos no dermatofitos están adquiriendo importancia en las micosis cutáneas.

Se ha informado de un aumento alarmante de la incidencia de las infecciones fúngicas en los últimos tiempos. Terrell, Meis y Verweij, y Rolston las han relacionado con tratamientos médicos, condiciones de inmunidad comprometida, desnutrición, ciertas cirugías y metales pesados como el mercurio. Otros factores que pueden predisponer a las infecciones fúngicas, según Gugnani, Shenoi et al. y Oyeka y Eze, son la higiene personal, el hacinamiento y las malas condiciones sanitarias, el tamaño de la familia, la edad, el clima cálido y húmedo, la situación socioeconómica y los viajes internacionales. Los trabajadores agrícolas expuestos a diversos agentes irritantes, como el barro, el estiércol de vaca u otros tipos de abono, los fertilizantes, los herbicidas, los plaguicidas, el polvo y el suelo (que se considera un reservorio de la mayoría de los organismos patógenos, incluidos los hongos dermatofitos y no dermatofitos) también están predispuestos a contraer infecciones fúngicas.

Las infecciones fúngicas causadas por hongos dermatofitos y no dermatofitos han sido ampliamente señaladas como un problema de salud pública en Nigeria y en todo el mundo. Sin embargo, no se puede exagerar, ya que la naturaleza contagiosa entre las comunidades de animales, el alto coste del tratamiento, la dificultad de control y las consecuencias para la salud pública explican su gran importancia. Por lo tanto, este estudio fue diseñado para informar sobre los mohos dermatofitos y no dermatofitos asociados con las micosis cutáneas entre los agricultores de arroz en el Estado de Anambra, Nigeria.

2. Materiales y Método

Dos mil quinientos ochenta (2.580) agricultores de arroz, incluyendo adultos y niños, fueron examinados en busca de lesiones sugestivas de micosis cutánea. Las lesiones se evaluaron en función del picor, la descamación, la fisuración, el enrojecimiento de la piel y la distrofia de las uñas. Se utilizaron cuestionarios para obtener información sobre el sexo, la edad, la localización de la lesión, el nivel educativo, el tamaño de la familia, la naturaleza del alojamiento de las familias, la presencia de mascotas/animales domésticos en la casa y la duración de la lesión, si el agricultor utiliza estiércol, fertilizantes, herbicidas o pesticidas.

2.1. Recogida de muestras clínicas

Las lesiones se limpiaron con alcohol al 70% y se recogieron asépticamente raspados de los bordes de avance de estas lesiones con bisturí estéril. Las muestras de las uñas de los dedos de las manos y de los pies se recogieron utilizando pinzas para uñas después de haberlas limpiado con alcohol al 70%. Las muestras se recogieron en bolsas de muestreo, se trasladaron al laboratorio de microbiología de la Universidad Nnamdi Azikiwe, Awka, Nigeria, y se procesaron en un plazo de 2 horas. Procesamiento de las muestras

Se prepararon portaobjetos para microscopía directa con KOH al 20% para algunas porciones de raspados de piel y recortes de uñas. Las porciones restantes y los hisopos de la red de los dedos de los pies y de las manos se inocularon en placas duplicadas que contenían Agar Dextrosa Sabouraud (SDA) (Biotech) suplementado con 0,05 mg/mL de cloranfenicol y 0,5 mg/mL de cicloheximida. También se inoculó otra placa duplicada con 0,05 mg/mL de cloranfenicol solo con la muestra. Las placas se incubaron a 27°C durante 4 semanas. Las placas positivas con crecimiento fúngico se purificaron subcultivando las diferentes colonias en slants SDA frescos sin antibióticos.

2.3. Los aislados se identificaron sobre la base de un estudio detallado de sus morfologías macroscópicas y microscópicas y se compararon con la descripción estándar dada por Campbell y Stewart, Guy St-Germain y Richard, y De Hoog et al. Diez de los aislados se identificaron mediante la secuenciación de la región del espaciador transcrito interno del ADN ribosómico del aislado en el Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlín, Alemania.

2.4. Análisis estadístico

Los resultados y datos obtenidos del cuestionario distribuido a los arroceros afectados se analizaron estadísticamente mediante las pruebas de chi-cuadrado, Kruskal-Wallis y Mann-Whitney. Los resultados se sometieron a la prueba del nivel de significación de 0,05.

3. Resultados

De un total de 2.580 agricultores examinados para detectar infecciones cutáneas, 201 (7,79%) personas presentaban lesiones sugestivas de infección fúngica. Las muestras recogidas fueron positivas por KOH y cultivo. El montaje KOH mostró fragmentos de hifas septadas en algunas muestras y no septadas en otras. Entre la población del estudio con infección cutánea, 78 (38,81%) eran varones, mientras que 123 (61,19%) eran mujeres. Noventa (44,78%) de las 201 muestras procedían de la infección de las uñas de los dedos, 45 (22,39%) de las uñas de los pies, 27 (13,43%) de la infección de la piel glabra, 20 (9,95%) de la infección de los pies, 12 (5,97%) de la infección de la red de los dedos y 7 (3,48%) de la infección del cuero cabelludo. La tabla 1 muestra la distribución de las micosis cutáneas según el lugar de la infección, el sexo y la edad de los arroceros. El análisis de los casos de infección según la edad de los arroceros mostró que la infección era estadísticamente significativa con la edad () y se registró más en el grupo de edad de 16 a 30 años (47,76%), seguido del grupo de edad de 31 a 45 años (35,82%) (Tabla 1). La infección también se notificó más entre las familias que vivían en alojamientos hacinados (), los agricultores que compartían instalaciones () y los que tenían mascotas/animales domésticos ().

Sitio de la infección Número de muestras recogidas Sexo Edad
Hombres Mujeres <15 16-30 31-45 >45
Uñas 90 (44.78%) 19 71 1 48 32 9
Uñas de los pies 45 (22.39%) 20 25 23 16 6
Piel labial 27 (13.43%) 10 17 15 8 4
Pie 20 (9.95%) 16 4 6 10 4
Red de dedos 12 (5.97%) 8 4 4 6 2
Escala 7 (3.48%) 5 2 7
Total (no) 201 78 123 8 96 72 25
Total (%) 100 38.81 61.19 3.98 47.76 35.82 12.44
Tabla 1
Distribución de las micosis cutáneas según el lugar de la infección, el sexo y la edad de los arroceros.

De las muestras se recuperó un total de 225 hongos aislados, que comprendían 48 (21,33%) dermatofitos (Tabla 2) y 177 (78,67%) mohos no dermatofitos (Tabla 3). T. rubrum (11,11%) y A. candidus (16,44%) fueron los mohos dermatofitos y no dermatofitos más frecuentemente aislados, respectivamente. Los aislados identificados en el Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlín, Alemania, pertenecían a las especies Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum y Fusarium.

Especies de dermatofitos Número de aislados Porcentaje de aparición (%)
Microsporum audouinii 5 2.22
Microsporum ferrugineum 2 0,89
Trichophyton megnini 6 2.67
Trichophyton tonsurans 10 4,44
Trichophyton rubrum 25 11.11
Total 48 21.33
Tabla 2
Especies de mohos dermatofitos aislados y su porcentaje de aparición.

Especies de no dermatofitos Número de aislados Porcentaje de aparición (%)
Aspergillus terrus 24 10.67
Aspergillus candidus 37 16,44
Aspergillus scleriotorum 26 11.56
Aspergillus niger 11 4,89
Aspergillus flavus 26 11.56
Scopulariopsis sp. 18 8
Chrysosporium sp. 12 5.33
Eupenicillium javanicum 2 0,89
Fusarium sp. 11 4.89
Penicillium aculeatum 4 1,77
Penicillium pinophilum 6 2.67
Total 177 78.67
Tabla 3
Especies de mohos no dermatofitos aislados y su porcentaje de aparición.

4. Discusión

El presente estudio sirve para subrayar la importancia para la salud pública de la infección fúngica entre los cultivadores de arroz del estado de Anambra, Nigeria. La infección de las uñas de los dedos de las manos y de los pies fue mayor que la de otras partes del cuerpo y más prevalente en las mujeres. La mayor prevalencia de esta infección entre las mujeres puede atribuirse al hecho de que las mujeres utilizan más los dedos en el cultivo y la cosecha del arroz que los hombres. Esto coincide con los informes de El Sayed et al. y Souza et al. . Souza et al. informaron de que el 72,25% de los casos de onicomicosis de su estudio en Japón eran de mujeres, mientras que Kazemi y Charles informaron de una mayor prevalencia de esta infección entre los varones, aunque sus estudios no se realizaron entre cultivadores de arroz. Esto también está respaldado por los hallazgos de Blank et al. y Shenoi et al., que informaron de una alta tasa de infección de las uñas entre los trabajadores de los arrozales en la India.

La infección del cuero cabelludo sólo se observó en niños y probablemente podría haberse transmitido a través de las manos infectadas de sus madres y otros parientes. Los hombres (71,43%) presentaban más infecciones que las mujeres (28,57%). Oyeka hizo la misma observación y la relacionó con la escasa higiene personal de los varones en comparación con sus homólogas femeninas.

Los agricultores de entre 16 y 30 años registraron más infecciones que otros grupos de edad y podría explicarse por el hecho de que este grupo de edad participa más activamente en el cultivo del arroz que los grupos de edad más jóvenes y mayores y tienden a sudar más.

La transmisibilidad de las infecciones fúngicas entre los miembros de la familia se ha notificado ampliamente en Nigeria y respalda los resultados de este estudio, en el que se notificó una mayor tasa de infección entre las familias que vivían en alojamientos atestados (), las que compartían instalaciones () y las que tenían mascotas/animales domésticos (). Estas instalaciones y animales pueden actuar como reservorios de hongos/esporas a través de los cuales la infección puede transferirse fácilmente a los agricultores.

Una observación importante realizada durante este estudio fue que los cultivadores de arroz no utilizaban botas ni guantes de mano durante sus trabajos agrícolas, ya que las botas se hunden en el barro y reducen su velocidad de trabajo según estos agricultores. La no utilización de prendas protectoras para los pies y las manos expone a estos agricultores a los agentes infecciosos. Shenoi et al. hicieron una observación similar. También se observó la escasa higiene personal de estos agricultores, que es un factor conocido por predisponer a las personas a todo tipo de infecciones, incluidas las fúngicas.

Trichophyton rubrum fue el dermatofito más frecuentemente recuperado (11,11%) en este estudio. Fue el único organismo fúngico recuperado en todas las zonas del cuerpo, excepto en la membrana de los dedos de las manos y de los pies. Esto coincide con el trabajo de otros investigadores que informaron de que T. rubrum era el agente etiológico más común de las dermatofitosis de diferentes partes del cuerpo. Este estudio también demostró que, además de las infecciones cutáneas causadas por hongos dermatofitos, los mohos no dermatofitos se están convirtiendo en agentes etiológicos muy importantes de las infecciones cutáneas. En este estudio se observó que los mohos no dermatofitos se aislaron con mayor frecuencia (78,67%) que los dermatofitos habituales (31,33%), especialmente en la onicomicosis. Aunque algunos autores han señalado que los dermatofitos son los responsables de la mayoría de los casos de onicomicosis, los estudios epidemiológicos también han demostrado que Aspergillus sp. es un agente fúngico emergente de la onicomicosis de las uñas de los pies. Actualmente ocupa el segundo lugar, después de Scopulariopsis sp. y de Fusarium solani, en las onicomicosis no dermatofíticas. Aspergillus sp. fue el moho no dermatofito más aislado en este estudio, seguido de Scopulariopsis sp. y luego de Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum y Eupenicillium javanicum, que se aislaron en este trabajo, no habían estado implicados en la infección de la piel según la literatura. Se ha informado de que se aíslan con frecuencia del suelo y están implicados en la producción y sacarificación de diferentes enzimas industriales como la B-D-manasa, la endoglucanasa, la -glucosidasa y la pectinasa, así como en la sacarificación de polisacáridos de la cebada, la avena y la paja de trigo, y el Solka-Floc. La capacidad de estos organismos para producir las enzimas mencionadas podría explicar su capacidad para degradar también las zonas queratinizadas de la piel. La alta frecuencia en el aislamiento de mohos no dermatofitos observada en este estudio podría atribuirse a su aislamiento regular del agua, el aire, el suelo y la vegetación, como registraron Oyeka y Okoli y Cribier y Bakshi . Esto hace que sus posibilidades de entrar en contacto con la piel humana sean elevadas, dando lugar a infecciones oportunistas.

5. Conclusión

Al final de este estudio, se observó que la infección fúngica cutánea de las uñas era la más prevalente. Por lo tanto, hay que tener cuidado para controlar la propagación de esta infección, ya que estos agricultores comparten los servicios públicos con las masas. También se observó que, además de los dermatofitos, los mohos no dermatofitos son ahora agentes etiológicos muy importantes de la infección cutánea, especialmente en la onicomicosis. Se realizarán más pruebas para determinar la patogenicidad de Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum y Eupenicillium javanicum recuperados en este trabajo.

Agradecimientos

Los autores desean dar las gracias a la Dra. Yvonne Graeser del Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlín, Alemania, que ayudó a identificar los hongos aislados.