1.Indledning

Forholdet mellem hæmatokrit (Hct) og hæmoglobin (Hb) har længe været almindeligt accepteret til 2,941, og det er blevet forenklet til 3,0 i den daglige kliniske praksis. Dette tal kan anvendes for de personer, der har normal morfologi af røde blodlegemer (RBC). I tilfælde af alfa-thalassemias har patienterne altid mikrocytiske, hypokrome, anisopoikilocytiske røde blodlegemer, og deres gennemsnitlige Hct/Hb-forhold er for nylig fundet at være 3,5+0,2 (fra 3,25 til 4,12), hvilket er helt forskelligt fra 3,02+0,08 (fra 2,86 til 3,17) for den normale kontrol. Årsagen til det høje Hct/Hb-forhold blandt patienterne med alfa-thalassemias formodes at være effekten af en ensartet overhydrering af deres RBC’er, mens RBC’erne hos patienterne med beta-thalassæmi/Hb E-sygdom har en heterogen hydrering.
Diagnosen af alfa-thalassemiasygdommene, som omfatter H, Hb H -Constant-Spring (CS), HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart og HbEFBart-CS sygdomme, stilles for det meste afhængigt af fundet af båndene af Hb H og/eller Hb Bart med eller uden Hb CS eller Hb E fra de forskellige Hb-analysemetoder, hvilket kan tage et par timer eller dage at gennemføre testen. Hvis tallet for det høje Hct/Hb-forhold kan bruges til at skelne alfa-thalassemias fra andre thalassemias og/eller hæmoglobinopatier med nøjagtighed, vil det være mere bekvemt og hurtigere for klinikerne at planlægge behandlingen af patienterne. Formålet med denne undersøgelse er at verificere gyldigheden af Hct/Hb-forholdet ved et cutpoint på 3,25 eller derover til diagnosticering af alfa-thalassemiasygdomme, dvs. Hb H, H-CS, HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart og HbEFBart-CS-sygdomme hos patienter med klinisk og/eller hæmatologisk mistænkelig thalassæmi.

2.Patienter Og Metode

Denne tværsnitsundersøgelse rekrutterede patienter med 20 år eller ældre, der kom på hæmatologisk klinik, afdeling for medicin, Maharat Nakhon Ratchasima Hospital, med klinisk eller hæmatologisk mistanke om thalassæmi, dvs, kronisk hæmolytisk anæmi, hepatosplenomegali, thalassemiskfacy, lav MCV, lav MCH eller mikrocytisk hypokrom anisopoikilocytotisk morfologi af røde blodlegemer på den perifere blodprøve. Alle patienter blev rutinemæssigt undersøgt for CBC med den automatiserede hæmatologiske analysator (Sysmex, XT 1800i®) og Hb-analyse ved hjælp af HPLC-metoden (Bio-Rad-instrument). Resultaterne af Hb-analysen, som blev fortolket af en veluddannet medicinsk tekniker og en hæmatolog, blev anvendt som guldstandard. Alfa-thalassemierne omfattede: Hb H, Hb H-CS, HbAEBart, HbAEBart-CS, HbEFBart og HbEFBart-CS-sygdomme.

Værdien af Hct/Hb-forholdet blev beregnet ud fra den CBC, der blev udført samme dag som Hbanalysen. Forholdet på 3,25 eller mere blev brugt som cut-off point for at være positiv for alfa-thalassemias.
Patienter, der havde samtidige kroniske lever- eller nyresygdomme, graviditet eller tidligere transfusion i mindre end 3 måneder, blev udelukket. Undersøgelsen blev godkendt af den etiske komité på Maharat Nakhon Ratchasima hospitalet.

3.Resultater

Der var 300 patienter med klinisk eller hæmatologisk mistanke om thalassemias. Deres alder varierede fra 20 til 81 år, gennemsnit 38,5 + 15,6 år. Forholdet mellem mænd og kvinder var 125 til 175. Deres gennemsnit for Hb-koncentration, Hct, MCV og MCH var henholdsvis 8,0 + 2,7 g%, 25,9 + 8,2 %, 64,7 + 8,9 fl og 20,0 + 1,8 pg. Af 300 patienter var der 130 med alfa-thalassemiasygdomme og 170 ikke-alfa-thalassemiasygdomme, som bestod af 101 med beta-thalassæmi/hæmoglobin E-sygdom og 69 med hæmoglobin E-sygdom. Det samlede gennemsnitlige Hct / Hb-forhold var 3,260 + 0,368. Hct/Hb-forholdet på 3,25 eller mere blev fundet hos 126 ud af 130 med alfa-thalassemier og 15 i ikke-alpha-thalassemigruppen; alle 15 blev fundet i beta-thalassæmi / Hb E-sygdom, ingen i Hb E-sygdomsgruppen. Den blev fundet negativ hos 4 personer med alfa-thalassemiasygdomme og hos 155 personer med ikke-alfa-thalassæmi; 86 personer med beta-thalassæmi/Hb E-sygdom og 69 personer med Hb E-sygdom.
Af alle 69 patienter med Hb E-sygdom var det gennemsnitlige Hct/Hb-forhold 2,87+0,14, desuden havde ingen et forhold tæt på 3,25 eller nukleerede røde blodlegemer (NRBC).
Tabel 1

×

Tabel1.

Luk

Sensitiviteten, specificiteten, den positive prædiktive værdi (PPV), den negative prædiktive værdi (NPV), den positive likelihood ratio (PLR) og den negative likelihood ratio (NLR) blev beregnet til at være 96.9 % (95 % konfidensinterval eller CI: 92,3-99,1), 91,2 % (95 % CI: 85,9-95,0), 89,4 % (95 % CI: 83,1-93,9), 97,5 % (95 % CI: 93,7-99,3), 11,0 (95 % CI: 6,8-17,8) og 0,03 (95 % CI: 0,01-0,09), henholdsvis.
Ud af 126 alfa-thalassemia-patienter med positivt testresultat havde 5 nukleerede røde blodlegemer (NRBC), der varierede fra 1 til 320 celler, median 6celler/100 WBC i det perifere blod, mens ingen af de 4 alfa-thalassemia-patienter med negativt testresultat havde NRBC.

Tabel 2

×

Tabel2

Luk

Fra beta-thalassæmi/Hb E-patienter, havde alle 15 tilfælde med positivt testresultat NRBC, fra 2 til 480, median 132.5 celler/100 WBC, mens 14 ud af 86 med beta thalassæmi /Hb E med negativt testresultat (16,3 %) havde NRBC, der varierede fra 3 til 248 celler, median 51,0/100 WBC. Førstnævnte havde NRBC i langt højere grad end sidstnævnte med statistisk signifikans (p-værdi
Hvis de patienter, der havde NRBC, alle blev udelukket fra hver gruppe, kunne man få den nye kontingenstabel. Sensitiviteten, specificiteten, PPV og NPV for et Hct/Hb-forhold på 3,25 eller derover til diagnosticering af alfa-thalassemias kunne beregnes på ny, efter at patienterne med NRBC i alle grupper var blevet udelukket på følgende måde: Hhv. 96,8 %, 100 %, 100 % og 97,2 %.

4.Diskussion

Hct/Hb-forholdet på 3,25 eller mere kan for det meste skelne patienter med alfa-thalassemias fra beta-thalassæmi/hb E og Hb E-sygdomme med høj sensitivitet, specificitet, PPV og NPV. Sandsynligvis fordi alfa-thalassemiske RBC’er er ensartet mindre tætte end de normale, mens beta-thalassemiske RBC’er har en bred tæthedsfordeling. Den mindre tæthed af alfa-thalassemiens RBC’er kan forårsage det falsk høje Hct3 og det nedsatte Hb-niveau sammenlignet med både nedsat og forhøjet Hb-niveau af beta-thalassemiske RBC’er.
Alle 15 beta-thalassemia/Hb E-patienter med positivt testresultat har NRBC (100 %) i periferien, og andelen af positive NRBC er signifikant mere almindelig end 16,3 % af beta-thalassemi/Hb E-gruppen med negativt testresultat. Når patienterne med positiv NRBC fra hver gruppe udelukkes, ændres sensitiviteten, specificiteten, PPV og NPV fra henholdsvis 96,9 %, 91,2 %, 89,4 % og 97,5 % til henholdsvis 96,8 %, 100 %, 100 % og 97,2 %. Dette kan forklares ved, at de mange NRBC, som hyppigere findes hos beta-thalassemia/Hb E-patienter, kan forårsage falsk højt Hct bestemt af den automatiserede hæmatologianalysator, hvilket resulterer i et højt Hct/Hb-forhold i nogle tilfælde med beta-thalassemia/Hb E-sygdom.
Dertil kommer, at når Hct/Hb-forholdet for alfa-thalassemia-1-trækkene beregnes, findes det også højt, nemlig 3,317 for mænd og 3,324 for kvinder6 . Hvis det falder sammen med beta-thalassæmi/Hb E, kan det også forårsage det høje Hct /Hb-forhold i denne gruppe. Dette kan være den underliggende årsag til, at nogle få tilfælde af beta-thalassæmi/Hb E-patienter har et falsk positivt testresultat. Den rolle, som alfa-thalassæmi-1 hetrozygositet spiller i tilfælde af beta-thalassæmi/Hb E i dette aspekt, skal afklares i den videre undersøgelse. 4 ud af 130 tilfælde (3,0 %) af alfa-thalassemier har det negative testresultat uden den rette forklaring indtil videre.

5.Resumé

Hct/Hb-forholdet på 3.25 eller mere har en stærk diagnostisk kraft til at skelne alfa-thalassemias fra beta-thalassæmi/Hb E og Hb E-sygdomme i tilfælde af mistænkelig thalassæmi med en sensitivitet, specificitet, positiv prædiktiv værdi, negativ prædiktiv værdi, positiv sandsynlighedsratio og negativ sandsynlighedsratio på 96,9 %, 91,2 %, 89,4 %, 97,5 %, 11,0 og 0,03.

  1. Weatherall MS, Sherry KM. En evaluering af Spuncrit™ infrarød analysator til måling af hæmatokrit. Clin Lab Haem 1997; 19: 183-86.
  2. Insiripong S, Supattarobol T, Jetsrisuparb A. Comparison of hematocrit / hemoglobin ratio’s in subjects with alpha-thalassemia, with subjects having chronic kidney disease and normal subjects. Southeast Asian J Trop Med Public Health 2013; 44: 707-11.
  3. Schrier SL, Rachmilewitz E, Mohandas N. Cellulære og membranegenskaber af alfa- og beta-thalassemiske erythrocytter er forskellige: implikation for forskelle i de kliniske manifestationer. Blood 1989; 74: 2194-202.
  4. Bunyaratvej A, Fucharoen S, Greenbaum A, Mohandas N. Hydrering af røde blodlegemer i alfa- og beta thalassemias er forskellig. En nyttig metode til at skelne mellem disse røde cellefænotyper. Am J ClinPathol 1994; 102: 217-22.
  5. Thomas L. Hæmatokrit (HCT). In: Thomas L, ed. Klinisk laboratoriediagnostik, anvendelse og vurdering af kliniske laboratorieresultater. Frankfurt/Main: TH-Books-Verl.-Ges, 1998: 479-82.
  6. Pornpatkul M, Wasi P, Na-Nakorn S. Hematologic parameters in obligatory alpha-thalassemia. J Med Assoc Thai 1969; 52: 801-11.