I IgG4-RD-patienter fandt vi ingen IgG4+ ANA, men vi påviste IgG1+ og IgG2+ ANA (Fig. 1 og 2). Vi fandt også, at IgG4+ ANA var meget sjældent, hvorimod IgG1/2/3+ ANA blev påvist i systemiske autoimmune sygdomme (Fig. 2 og 3). Autoantistoffer med cytoplasmiske mønstre i Fluoro-HepANA™-testen er ikke nøjagtig ANA; “anti-cytoplasmiske” antistoffer – f.eks. anti-SS-A/Ro, anti-aminoacyl-tRNA-syntetase og anti-signalgenkendelsespartikel-antistoffer – er kendt i SS og PM. Underklasse-baserede ANA-tests fandt IgG1/2/3+ anti-cytoplasmatiske antistoffer, men ikke IgG4 (fig. 2, 3).
IgG4+ ANA er meget sjældne i systemiske autoimmune sygdomme, muligvis fordi IgG4/IgG-forholdet i serum er lavt, mindre end 5 %, i disse sygdomme (tabel 2). IgG4+ ANA blev imidlertid ikke påvist på trods af høje IgG4/IgG-forhold i serum (43 %) i IgG4-RD. Dette antyder, at IgG4 ikke selv bruges til at lave ANA.
Flere undersøgelser har undersøgt ANA-subklasser i systemiske autoimmune sygdomme. Zouali et al. rapporterede, at i SLE og blandet bindevævssygdom var anti-dobbeltstrenget DNA (dsDNA)-antistof IgG1/3-dominant, og anti-RNP var IgG2-dominant . Anti-Sm, anti-RNP og anti-dsDNA i SLE , anti-SS-A/Ro og anti-SS-B/La i SS og anti-Scl-70 i SSc er angiveligt IgG1-dominante. ANA af IgG4-typen blev imidlertid næppe påvist i alle ovennævnte rapporter. Rigopoulou et al. undersøgte tilfælde af primær biliær cirrose og fandt, at ANA var IgG1/3-dominant, men at IgG4 ikke blev påvist ved subklassebaseret IIF . Årsagen til, at ANA af IgG2-typen var bemærkelsesværdigt hyppig i vores undersøgelse, mens IgG1 og IgG3 var fremherskende i tidligere undersøgelser, kan være, at affiniteten af det andet antistof var forskellig i de forskellige undersøgelser. I den underklassebaserede ANA-test kan titrene ikke sammenlignes nøjagtigt mellem underklasserne, da de sekundære antistoffer er forskellige. I tidligere undersøgelser blev ANA af IgG2-typen også påvist på moderate niveauer, mens ANA af IgG4-typen konstant var negativ eller på lave niveauer. I vores undersøgelse blev IgG4-type ANA også næppe påvist.
Autoimmun pancreatitis (AIP) er en organspecifik lidelse, der ses ved IgG4-RD. Forskellige autoantistoffer, såsom anti-laktoferrin- og anti-carbonsyreanhydrase II-antistoffer, ses ved AIP. Asada et al. fandt anti-pancreas sekretorisk trypsinininhibitor (PSTI) antistof i AIP og viste, at titrene af anti-PSTI antistof bevægede sig parallelt med IgG4-niveauerne i serum . IgG4-niveauerne ændrer sig parallelt med IgG4-RD-sygdomsaktivitet, som det er rapporteret i mange undersøgelser, herunder vores tidligere undersøgelse . Asada et al. mente, at anti-PSTI kunne være en vigtig faktor i patofysiologien . Imidlertid viste immunoblotting af underklasser med anti-IgG1 eller anti-IgG4 som sekundære antistoffer, at underklassen ikke var IgG4, men IgG1. Muligvis er IgG4-type autoantistoffer vanskelige at producere hos IgG4-RD-patienter.
Derimod viser nogle autoimmune sygdomme efter sigende IgG4-type autoantistoffer. Rock et al. rapporterede, at IgG4 var den mest almindelige (100 %) af anti-desmoglein (Dsg)-1 antistoffer, der blev påvist i sera fra patienter med pemphigus foliaceus, og viste patogeniciteten af IgG4-type anti-Dsg-1 antistof ved hjælp af Balb/c-mus . Anti-Dsg-3-antistof i pemphigus vulgaris var også IgG4-predominant . Beck et al. viste ved immunoblotting, at anti-fosfolipase A2-receptor (PLA2R)-antistof i idiopatisk membranøs nefropati hovedsageligt bestod af IgG4 . IgG4 er angiveligt fremherskende i anti-neutrofilt cytoplasmatisk antistof (ANCA). C-ANCA (IIF), proteinase-3 (PR3)-ANCA (ELISA) og myeloperoxidase (MPO)-ANCA (ELISA) i granulomatose med polyangiitis (GPA) , og MPO-ANCA (ELISA) i propylthiouracil-induceret vaskulitis var IgG1/4-dominant. Andre rapporterede ligeledes, at IgG4 udgjorde størstedelen af C-ANCA (IIF) og PR3-ANCA (ELISA) i vasculitider . Engelmann et al. rapporterede, at anti-cyklisk citrullineret peptid (CCP) antistof var IgG1/4-dominant i RA . IgG4 i vasculitider og RA er dog muligvis ikke patofysiologisk vigtig. I funktionelle analyser af ANCA kan IgG1 og IgG3 PR3-ANCA stimulere neutrofiler , hvorimod IgG4 PR3-ANCA kun var svagt stimulerende for neutrofiler . Hos RA-patienter, der havde HLA-DR4-delte epitoper, fandt Engelmann et al., at IgG3 anti-CCP-antistof var fremherskende, og mente, at IgG3-type antistof kunne være vigtigere i patofysiologien ved RA . Da IgG4 har ringe evne til at aktivere komplementer og antistofafhængig cellulær cytotoksicitet , er det usandsynligt, at IgG4 deltager i mekanismerne for vævsskader i autoimmune sygdomme.
Interessant nok synes der at være patogene og ikke-funktionelle autoantistoffer af IgG4-typen. IgG4-type ANCA anses for at være mindre patogene, sammenlignet med andre underklasse ANCA i ANCA-associeret vaskulitis . Affiniteterne mellem IgG4-type og andre ANCA-subklasser skulle være lige store, men komplementaktiveringsevnen er forskellig, således at IgG4-type ANCA kan spille en mindre vigtig rolle end andre ANCA-subklasser. På den anden side har IgG4 anti-PLA2R-antistof en høj affinitet og anses for at være patogen i idiopatisk membranøs nefropati . Hvorfor IgG4 anti-PLA2R-antistof kan udøve patogenicitet uden evne til komplementaktivering kan skyldes, at patogeniciteten skyldes ødelæggelse af de elektriske barrierer i den glomerulære basalmembran.
Totalt set varierer IgG4-anvendelsesgraden mellem autoantistoffer og mellem sygdomme. IgG4 er associeret med anti-Dsg-1/3-, anti-PLA2R-, anti-CCP-antistoffer og ANCA, men ikke med anti-PTSI-antistof i AIP eller ANA i IgG4-RD og systemiske autoimmune sygdomme (Tabel 3). Denne asymmetri antyder, at IgG4 har ukendte, men bestemte fysiologiske eller patologiske funktioner. Der er behov for yderligere analyser for at kende dens rolle.
I den foreliggende undersøgelse observerede vi, at ANA-mønstre adskilte sig mellem IgG-subklasser i nogle tilfælde (Fig. 3, 4). Når et tilfælde har flere autoantistoffer, adskiller de udnyttede underklasser sig efter autoantigener. Dette kan forklares ved den hypotese, at hver IgG-subklasse foretrækker at dække sit eget spektrum af antigener. Grunden til, at vi næsten ikke fandt IgG4 i ANA, kan være, at IgG4 ikke dækker antigener, der kan påvises med ANA-testen, dvs. nukleare antigener eller beslægtede mikrobielle antigener. Selektiv IgG2-underklassemangel er ofte forbundet med bakteriel infektion med Neisseria meningitidis og Streptococcus pneumoniae , hvorfor IgG2 anses for at spille en rolle i beskyttelsen mod disse bakterier. IgG4’s rolle er ikke blevet forstået i tilstrækkelig grad. Hvis IgG4 er relateret til en eller anden mikroorganismetype, og hvis mikroorganismeantigenerne og autoantigenerne er ens, som med Dsg-1/3, PLA2R, PR3 og citrullinerede proteiner, ville det forklare, hvorfor IgG4-type antistof mod disse proteiner blev dominerende genereret.
Vores resultater antyder, at IgG4-RD ikke er en autoimmun sygdom, og at høje niveauer af serum IgG4 i IgG4-RD kun er uspecifikke. Subklasse-baserede ANA-tests i denne undersøgelse dækkede både nukleare og cytoplasmatiske antigener i HEp-2-celler og kan screene et bredt spektrum af umodificerede ubiquitære antigener. Denne analyse har dog begrænsninger: modificerede antigener som citrullinerede proteiner og organspecifikke antigener er ikke screenet. Antallet af tilfælde er begrænset i denne undersøgelse. Der er fortsat en mulighed for, at der kan findes ukendte autoantistoffer af IgG4-typen i IgG4-RD. Der er behov for en yderligere analyse.
Skriv et svar