Abstrakt

Ris er en af verdens vigtigste fødevareafgrøder, og dyrkning af ris er en vigtig erhvervsmæssig aktivitet i Anambra State, Nigeria. Disse risbønder er udsat for forskellige agenser, der prædisponerer dem for kutane mykoser. Formålet med dette arbejde var at screene risbønder for læsioner, der tyder på kutane mykoser, og at isolere og identificere svampeagenser, der er forbundet med infektionen. Denne undersøgelse blev gennemført mellem november 2009 og juni 2011 i Anambra State, Nigeria. Kliniske prøver indsamlet fra 201 landmænd med læsioner, der tyder på kutane mykoser, blev behandlet og organismerne identificeret. Der blev anvendt spørgeskemaer til at indhente andre nødvendige data, som blev statistisk analyseret. Ud af de 2 580 risbønder, der blev screenet, viste 201 (7,79 %) positive læsioner. De genvundne organismer omfattede Microsporum audouinii, Microsporum ferrugineum, Trichophyton megnini, Trichophyton tonsurans, Trichophyton rubrum, Aspergillus terrus, Aspergillus candidus, Aspergillus scleriotorum, Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Scopulariopsis sp.., Chrysosporium sp., Eupenicillium javanicum, Fusarium sp., Penicillium aculeatum og Penicillium pinophilum. Ved afslutningen af dette arbejde blev det konstateret, at onychomycosis var den mest udbredte med ikke-matofytiske skimmelsvampe, der nu er blevet meget vigtige agenter for kutane mykoser blandt risbønder.

1. Indledning

Risdyrkning er et af de vigtigste erhverv i den nordlige del af Anambra State, Nigeria. Dette korn, som er en af verdens vigtigste fødevareafgrøder, dyrkes enten i sumpede lavlandsområder med masser af vand eller på et plateau eller i kuperede områder, hvor den naturlige nedbør giver tilstrækkelig mængde vand . Forberedelse af jorden, pløjning af marken, anvendelse af gødning, gødning, pesticider og herbicider, såning af risfrø, udplantning af risfrø og høst foretages manuelt af disse landmænd, hvilket disponerer dem for kutane mykoser.

Kutane mykoser er patogene svampeinfektioner, der påvirker de keratiniserede lag af huden og dens vedhæng (negle, hår). Det påvirker ikke de levende væv. Disse infektioner er hovedsagelig forårsaget af dermatofytter og gærsvampe. Ud over de anerkendte patogener er ikke-matofytiske skimmelsvampe nu ved at få betydning for kutane mykoser .

Der har været rapporter om en skræmmende stigning i forekomsten af svampeinfektioner i den seneste tid. Disse er af Terrell , Meis og Verweij og Rolston blevet sat i forbindelse med medicinske behandlinger, immunsvækkede tilstande, underernæring, visse operationer og tungmetaller som kviksølv. Andre faktorer, der ifølge Gugnani , Shenoi et al. og Oyeka og Eze kan disponere for svampeinfektioner, omfatter personlig hygiejne, trange boligforhold og dårlige sanitære forhold, familiestørrelse, alder, varmt fugtigt klima, socioøkonomisk status og udlandsrejser. Landarbejdere, der udsættes for forskellige irriterende stoffer, nemlig mudder, kogødning eller andre typer gødning, gødning, herbicider, pesticider, støv og jord (som betragtes som reservoir for de fleste patogene organismer, herunder dermatofyte og nondermatofyte svampe), er også disponeret for svampeinfektion .

Svampeinfektioner forårsaget af dermatofyte og nondermatofyte skimmelsvampe var blevet udførligt rapporteret som et folkesundhedsproblem i Nigeria og over hele verden . Dette kan dog stadig ikke overvurderes, da den smitsomme karakter blandt dyresamfund; høje behandlingsomkostninger, vanskelighed ved kontrol og de folkesundhedsmæssige konsekvenser forklarer deres store betydning . Derfor blev denne undersøgelse designet til at rapportere de dermatofyte og nondermatofyte skimmelsvampe, der er forbundet med kutane mykoser blandt risbønder i Anambra State, Nigeria.

2. Materialer og metode

To tusind, fem hundrede og firs (2,580) risbønder, herunder voksne og børn, blev screenet for læsioner, der tyder på kutane mykoser. Læsionerne blev vurderet for kløe, skældannelse, fissurering, rødme af huden og dystrofi af neglene. Der blev anvendt spørgeskemaer til at indhente oplysninger om køn, alder, læsionens placering, uddannelsesniveau, familiestørrelse, arten af familiens bolig, tilstedeværelse af kæledyr/husdyr i huset og læsionens varighed, hvis landmanden bruger gødning, gødning, herbicider eller pesticider.

2.1. Indsamling af kliniske prøver

Læsionerne blev renset med 70 % alkohol, og skrab blev aseptisk indsamlet fra nær de fremskudte kanter af disse læsioner med en steril skalpel. Fingernegle- og tånegleprøver blev indsamlet ved hjælp af negleklemmer, efter at neglene var blevet renset med 70 % alkohol. Prøverne blev indsamlet i prøvetagningslommer, overført til mikrobiologisk laboratorium, Nnamdi Azikiwe University, Awka, Nigeria, og behandlet inden for 2 timer. Der blev også indsamlet svaberprøver fra tå- og fingernegle efter rengøring med 70 % alkohol ved hjælp af en steril svaberpind.

2.2. Behandling af prøver

Direkte mikroskopiobjektsglas blev fremstillet med 20% KOH for nogle dele af hudskrab og negleklip. De resterende dele og tå/fingervævsswabs blev inokuleret i duplikatplader indeholdende Sabouraud Dextrose Agar (SDA) (Biotech) suppleret med 0,05 mg/mL chloramphenicol og 0,5 mg/mL cycloheximid. En anden duplikatplade med 0,05 mg/mL chloramphenicol alene blev også inokuleret med prøven. Pladerne blev inkuberet ved 27 °C i 4 uger. Positive plader med svampevækst blev renset ved at subkulturere de forskellige kolonier i friske SDA-slants uden antibiotika.

2.3. Identifikation af isolater

Isolater blev identificeret på grundlag af en detaljeret undersøgelse af deres grove og mikroskopiske morfologi og sammenlignet med standardbeskrivelsen givet af Campbell og Stewart , Guy St-Germain og Richard , og De Hoog et al. Ti af isolaterne blev identificeret ved hjælp af sekventering af den interne transskriberede spacer-region af isolatets ribosomale DNA på Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Tyskland.

2.4. Statistisk analyse

Resultaterne og dataene fra det spørgeskema, der blev uddelt til de berørte risbønder, blev statistisk analyseret ved hjælp af chi-square-, Kruskal-Wallis- og Mann-Whitney-test. Resultaterne blev testet for et signifikant niveau på 0,05.

3. Resultater

Ud af i alt 2 580 landmænd, der blev screenet for kutaninfektioner, blev 201 (7,79%) personer fundet at have læsioner, der tyder på svampeinfektion. De indsamlede prøver var positive ved KOH og dyrkning. KOH-monteringen viste fragmenter af septate hyphaer i nogle prøver og ikke-septate i andre. Blandt undersøgelsespopulationen med hudinfektion var 78 (38,81 %) mænd, mens 123 (61,19 %) var kvinder. Halvfems (44,78 %) af de 201 prøver var fra fingernegleinfektion, 45 (22,39 %) fra tånegle, 27 (13,43 %) fra infektion i glat hud, 20 (9,95 %) fra infektion i fødderne, 12 (5,97 %) fra infektion i fingre/tå-neglebånd og 7 (3,48 %) fra infektion i hovedbunden. Tabel 1 viser fordelingen af kutane mykoser efter infektionssted, køn og alder hos risbønderne. Analysen af infektionstilfælde efter risbøndernes alder viste, at infektionen var statistisk signifikant med alderen () og blev registreret i højere grad i aldersgruppen 16-30 år (47,76 %), efterfulgt af aldersgruppen 31-45 år (35,82 %) (tabel 1). Der blev også rapporteret flere infektioner blandt familier, der boede i overfyldte boliger (), landmænd, der delte faciliteter () og dem, der holdt kæledyr/husdyr ().

Infektionssted Antal indsamlede prøver Køn Alder
Mænd Hunner <15 16-30 31-45 >45 >45
Fingernegle 90 (44.78%) 19 19 71 1 48 32 9
Tå-negle 45 (22.39%) 20 25 23 16 6
Glabrous hud 27 (13.43%) 10 17 15 8 4
Fod 20 (9.95%) 16 4 6 10 4
Fingre/tåspindelvæv 12 (5.97%) 8 4 4 6 2
Skalp 7 (3.48%) 5 2 7
I alt (nej) 201 78 123 8 96 72 25
Total (%) 100 38.81 61.19 3.98 47.76 35.82 12.44
Tabel 1
Fordeling af kutane mykoser efter smittested, køn og alder hos risbønderne.

I alt 225 svampeisolater, bestående af 48 (21,33%) dermatofytter (tabel 2) og 177 (78,67%) ikke-matofytiske skimmelsvampe (tabel 3), blev genvundet fra prøverne. T. rubrum (11,11 %) og A. candidus (16,44 %) var de hyppigst isolerede henholdsvis dermatofyter og ikke-matofyte skimmelsvampe. De isolater, der blev identificeret på Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatmedizin, Berlin, Tyskland, hørte til Aspergillus scleriotorum, Aspergillus flavus, Aspergillus terrus, Eupenicillium javanicum, Penicillium aculeatum, Penicillium pinophilum og Fusarium-arter.

Arter af dermatofytter Antal af isolater Forekomst i procent (%)
Microsporum audouinii 5 2.22
Microsporum ferrugineum 2 0,89
Trichophyton megnini 6 2.67
Trichophyton tonsurans 10 4,44
Trichophyton rubrum 25 11.11
Total 48 21.33
Tabel 2
Tabel 2
Sorter af isolerede dermatofytsvampe og deres procentvise forekomst.

Arter af ikke-matofytter Antal af isolater Forekomst i procent (%)
Aspergillus terrus 24 10.67
Aspergillus candidus 37 16.44
Aspergillus scleriotorum 26 26 11.56
Aspergillus niger 11 4,89
Aspergillus flavus 26 11.56
Scopulariopsis sp. 18 8
Chrysosporium sp. 12 5.33
Eupenicillium javanicum 2 0,89
Fusarium sp. 11 4.89
Penicillium aculeatum 4 1,77
Penicillium pinophilum 6 2.67
Total 177 78.67
Tabel 3
Species af isolerede ikke-matofyte skimmelsvampe og deres procentvise forekomst.

4. Diskussion

Denne undersøgelse tjener til at understrege den folkesundhedsmæssige betydning af svampeinfektion blandt risbønder i Anambra State, Nigeria. Infektion af finger- og tånegle var mere udbredt end infektion af andre dele af kroppen og var mere udbredt hos kvinder. Den højere forekomst af denne infektion hos kvinder kan tilskrives det faktum, at kvinder bruger flere af deres fingre til risdyrkning og -høst end mænd. Dette stemmer overens med rapporterne fra El Sayed et al. og Souza et al. Souza et al. rapporterede, at 72,25 % af tilfældene af onychomycosis fra deres undersøgelse i Japan var blandt kvinder, mens Kazemi og Charles rapporterede en højere prævalens af denne infektion blandt mænd, selv om deres undersøgelser ikke var blandt risbønder. Dette understøttes også af resultaterne fra Blank et al. og Shenoi et al., som rapporterede en høj forekomst af negleinfektion blandt rismarkarbejdere i Indien.

Scalp-infektion blev kun set hos børn og kan sandsynligvis være blevet overført gennem deres mødres og andre slægtninges inficerede hænder. Mænd (71,43%) havde mere af infektionen end kvinderne (28,57%). Oyeka gjorde den samme observation og forbandt det med lav personlig hygiejne hos mænd sammenlignet med deres kvindelige kolleger.

Bønder i aldersgruppen 16-30 år registrerede flere infektioner end andre aldersgrupper, hvilket kan forklares ved, at denne aldersgruppe er mere aktivt involveret i risdyrkning end de yngre og ældre aldersgrupper og har tendens til at svede mere.

Transmissibilitet af svampeinfektioner blandt familiemedlemmer er i vid udstrækning blevet rapporteret i Nigeria og understøtter resultaterne af denne undersøgelse, hvor der blev rapporteret en højere infektionsrate blandt familier, der boede i overfyldte boliger (), dem, der delte faciliteter () og dem, der holdt kæledyr/husdyr (). Disse faciliteter og dyr kan fungere som reservoir for svampe/sporer, hvorigennem infektionen let kan overføres til landmændene.

En vigtig observation, der blev gjort under denne undersøgelse, var, at risbønderne hverken brugte støvler eller handsker under deres landbrugsarbejde, da støvlerne ifølge disse bønder synker ned i mudderet og nedsætter deres arbejdshastighed. Manglende brug af beskyttende fod- og håndbeklædning udsætter disse landmænd for smittefremkaldende agenser. En lignende observation blev gjort af Shenoi et al. Der blev også observeret dårlig personlig hygiejne blandt disse landmænd, hvilket er en faktor, der er kendt for at udsætte personer for alle former for infektioner, herunder svampeinfektioner.

Trichophyton rubrum var den hyppigst genvundne dermatophyte (11,11%) i denne undersøgelse. Det var den eneste svampeorganisme, der blev fundet på alle steder på kroppen undtagen på fingre/tæer. Dette stemmer overens med andre forskeres arbejde, der rapporterede T. rubrum som den hyppigste ætiologiske agent for dermatofytoser i forskellige dele af kroppen . Denne undersøgelse viste også, at ud over de kutane svampeinfektioner, der forårsager dermatofytter, er ikke-matofytskimmelsvampe ved at blive meget vigtige ætiologiske agenter for hudinfektioner. Ikke-matofytskimmelsvampe blev fundet hyppigere isoleret (78,67 %) i denne undersøgelse end de sædvanlige dermatofytter (31,33 %), især i forbindelse med onychomycose. Selv om nogle forskere har rapporteret, at dermatofytter tegner sig for størstedelen af onychomycosetilfælde, har epidemiologiske undersøgelser også vist, at Aspergillus sp. er nye svampeagenser i forbindelse med onychomycose af tånegle. Den indtager nu andenpladsen efter Scopulariopsis sp. og derefter Fusarium solani i forbindelse med ikke-matofyt onychomycosis . Aspergillus sp. var den hyppigst isolerede nondermatofytskimmel i denne undersøgelse, efterfulgt af Scopulariopsis sp. og derefter Chrysosporium sp.; Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum og Eupenicillium javanicum, som blev isoleret i dette arbejde, havde ifølge litteraturen ikke været involveret i hudinfektion. Det er blevet rapporteret, at de ofte er blevet isoleret fra jord og er involveret i produktion og saccharificering af forskellige industrielle enzymer som B-D-mannase, endoglucanase, -glucosidase og pektinase og i saccharificering af polysaccharider af byg-, havre- og hvedestrå samt Solka-Floc . Disse organismers evne til at producere de ovennævnte enzymer kan forklare deres evne til også at nedbryde hudens keratiniserede områder. Den høje frekvens af isolering af ikke-matofytiske skimmelsvampe, som observeret i denne undersøgelse, kan tilskrives deres regelmæssige isolering fra vand, luft, jord og vegetation som registreret af Oyeka og Okoli og Cribier og Bakshi . Dette gør deres chancer for at komme i kontakt med den menneskelige hud store, hvilket giver anledning til opportunistiske infektioner.

5. Konklusion

I slutningen af denne undersøgelse blev det observeret, at kutan svampeinfektion af neglene var den mest udbredte. Man skal derfor være forsigtig med at kontrollere spredningen af denne infektion, da disse landmænd deler offentlige forsyningsanlæg med masserne. Det blev også bemærket, at ud over dermatofytter er ikke-matofytskimmelsvampe nu meget vigtige ætiologiske agenter for hudinfektion, især i forbindelse med onychomycosis. Der vil blive foretaget yderligere undersøgelser for at bestemme patogeniciteten af Penicillium pinophilum, Penicillium aculeatum og Eupenicillium javanicum, der blev fundet i dette arbejde.

Anerkendelse

Forfatterne ønsker at takke Dr. Yvonne Graeser fra Nationales Konsiliarlabor für Dermatophyten, Institut für Mikrobiologie und Hygiene, Charité-Universitatsmedizin, Berlin, Tyskland, som har hjulpet med at identificere svampeisolaterne.