Koagulationstests udføres for at påvise tilstedeværelsen af lupus antikoagulant, der kan forlænge tiden for fosfolipidbaserede koagulationstests.
Forekomsten af lupus antikoagulant er meget specifik for APS, og der er en stærk sammenhæng mellem sidstnævnte og trombotiske hændelser eller fostertab.
Hvorimod er antallet af falske positive og falske negative resultater ret højt.
Mange faktorer kan påvirke disse testers manglende sensitivitet og specificitet, herunder præ-analytiske, analytiske og post-analytiske variabler.
Diagnostiske kriterier for cirkulerende lupus antikoagulans
Der findes fire sådanne kriterier, som er opsummeret nedenfor.
1. Forlængelse af fosfolipidafhængige koagulationstesttider
2. Påvisning af hæmning i en test med blandet patient/normal plasma
3. Påvisning af, at forlænget koagulationstid er fosfolipidafhængig: Forkortelse eller korrektion af oprindeligt forlænget koagulationstid ved tilsætning af overskydende fosfolipid (bekræftelsestest)
4. Udelukkelse af specifikke hæmmere rettet mod koagulationsfaktorer (f.eks.f.eks. anti-faktor VIII-antistoffer)
Preanalytiske variabler ved screening for cirkulerende lupus antikoagulans
Den præanalytiske fase er afgørende for diagnosen af APS.
Forekomsten af resterende trombocytter i plasma kan påvirke koagulationstest, der er afhængige af trombocytafledte phospholipider; sådanne phospholipider kan neutralisere antiphospholipidantistoffer, der er til stede i prøven, og give falsk negative resultater. Det anbefales derfor, at der udføres en dobbelt centrifugering, der omfatter en første centrifugering ved 2 000 g i 15 minutter ved stuetemperatur efterfulgt af en anden centrifugering ved over 2 500 g i 10 minutter for at opnå plasma, der indeholder færre end 10 000 trombocytter/µL.
Valg af test
Der er blevet foreslået mange fosfolipidafhængige test.
På grund af varierende følsomhed mellem testene samt manglende standardisering af visse test har International Society on Thrombosis and Hemostasis (ISTH) udsendt retningslinjer vedrørende valg af test, der skal anvendes.
Der bør anvendes to separate testsystemer, der anvender forskellige principper.
Diluted Russell viper venom time (DRVVT) bør anvendes i alle tilfælde. Denne test anses for at være specifik og robust til påvisning af lupus antikoagulanter.
Den anden test, der skal udføres, er APTT med silica som aktivator på grund af dens følsomhed. Anvendelse af kaolin eller ellaginsyre som aktivator anbefales ikke, og det samme gælder anvendelse af fortyndet tromboplastintid, af test baseret på ecarin- eller textarintid eller af kaolin-skoagulationstid.
Blandingsundersøgelse
Det anvendte puljeplasma skal fremstilles efter de sædvanlige metoder. Der kræves dobbelt centrifugering for at opnå plasma, der indeholder færre end 10 000 trombocytter/µL og har en aktivitet tæt på 100 % for alle faktorer. Der kan anvendes kommercielt poolet plasma, enten lyofiliseret eller frosset, forudsat at det opfylder de krævede betingelser og er valideret til dette formål.
Blandingstesten skal omfatte et forhold på 1:1 mellem testplasma og poolet normalt plasma uden forudgående inkubation.
Trombintidstest forud for blandingsundersøgelsen kan påvise tilstedeværelsen af heparin eller andre inhibitorer i prøven. Visse reagenser, især dem, der anvendes i DRVVT-test, indeholder imidlertid en heparinhæmmer, hvilket gør det muligt at udføre testen i prøver, der indeholder op til 0,8 IE anti-Xa/mL.
Bekræftelsestestest
Disse indebærer evaluering af korrektion af koagulationstiden for plasmaprøven i tilstedeværelse af overskydende fosfolipid. Der bør anvendes fosfolipider i to lag eller fosfolipider i hexagonal fase. Omvendt anbefales det ikke at anvende frosset optøede trombocytter på grund af variation mellem batcherne.
Udelukkelse af specifikke inhibitorer rettet mod koagulationsfaktorer
Screening for en specifik inhibitor rettet mod en given koagulationsfaktor (primært faktor VIII eller faktor IX) er afgørende, da tilstedeværelsen af sådanne inhibitorer kan udsætte patienterne for en høj og potentielt livstruende blødningsrisiko, der kræver øjeblikkelig behandling af specialiserede teams. Denne test omfatter analyse af den pågældende faktor og, om nødvendigt, specifik screening for og analyse af inhibitoren.
Skriv et svar