Timede drægtige mus og rotter er vigtige forskningsredskaber, der kan anvendes inden for udviklingsforskning, genteknologi og vævskulturer. De er den mest effektive måde at opnå en kohorte af embryoner, fostre eller hvalpe med en præcist defineret, matchet alder på. Men hvad er tidsmæssigt gravide mus?
Hvad er tidsmæssigt gravide mus og rotter?
En tidsmæssigt gravid hunmus er en mus eller rotte med en præcis kendt parringsdato. Dette gør det muligt enten at høste embryoner eller fostre ved en ønsket gestationsalder eller at producere kuld, der fødes på en ønsket dag.
Disse tidsbestemte parringer opnås ved at oprette parringer på en bestemt dag og kontrollere for tegn på parring den næste dag. Hunner, der viser tegn på parring (sædpropper hos mus, positive vaginale udstrygninger hos rotter), isoleres. Dette fastlægger parring – og formodentlig befrugtning – til en bestemt 24-timers periode.
På Taconic Biosciences kaldes dagen for påvisning af sædceller hos hunnerne for “sædpositiv dato” og betragtes som første dag i drægtigheden (alle tidsbestemte drægtige modeller skal bestilles efter den sædpositive dato).
I de tidlige stadier af drægtigheden er det vanskeligt at bekræfte drægtigheden ved visuel observation eller palpation. Efter 14 dage kan drægtighed bekræftes ved visuel observation og palpation af in utero hvalpe.
Embryonisk diapause hos timede drægtige mus og rotter
Der anvendes flere metoder til at bestemme gestationsalderen, herunder udvikling, vægt, størrelse og udseende, men kuldstørrelsen påvirker disse faktorer. En fremragende reference er tilgængelig online på UNSW for rotter og mus.
Udviklingen af embryoner og fostre forløber typisk langs en veldefineret tidslinje, forskere observerer lejlighedsvis, at en høst synes at bestå af embryoner eller fostre yngre end den kendte gestationslængde ville antyde.
Embryonisk diapause kan være den sandsynlige skyldige i de tilfælde, hvor embryoner eller fostre synes yngre end forventet. Embryonal diapause er et midlertidigt stop i den embryonale udvikling, som indtræder før blastocystimplantationen. Dette kan fremkaldes af miljømæssige stressfaktorer eller moderens input som f.eks. amning1. Som følge heraf kan den faktiske udviklingshastighed for embryonet variere fra den nominelle gestationsalder.
Foretrukne stammer og besætninger til tidsbestemt parring
| Model | Afdrætsalder | Kuldstørrelse | Typisk drægtighed | |
| Swiss Webster | 8 uger | 11 hvalpe | 19 – 20 dage | |
| Black 6 | 8 uger | 7 hvalpe | 18 – 20 dage | |
| Sprague Dawley® | 8 – 10 uger | 10 hvalpe | 21 – 23 dage |
Rotter
Den fremragende reproduktionsevne hos Sprague Dawley®-modellen gør den til et foretrukket valg til fremstilling af timede drægtige hunrotter. Embryoner fra timede drægtige Sprague-Dawley®-rotter anvendes til undersøgelse af embryonal udvikling, teratologi og reproduktionstoksikologi samt i forsøg, hvor der anvendes fostervæv fra bestemte embryonale aldre.
Mus
Den outbred schweiziske Webster-mus har også en overlegen reproduktionsydelse og er et fremragende valg til forsøg, hvor en outbred musemodel er acceptabel. Hvis der er behov for en indavlet stamme, anvendes almindeligvis Black 6-musen. Tidsmæssigt drægtige Swiss Webster-mus vil typisk give et større embryo-/fosterudbytte sammenlignet med Black 6, som har mindre kuldstørrelser.
Anvendelser af tidsmæssigt drægtige mus og rotter
Tidsmæssigt drægtige dyr anvendes i vid udstrækning inden for genteknologi, udvikling af vævskulturer og udviklingsforskning. Evnen til at høste embryoner og fostre på bestemte gestationsstadier er afgørende for disse undersøgelser.
- Embryohøst (normalt efter superovulation og tidsbestemt parring) er et kritisk skridt i skabelsen af genetisk modificerede dyremodeller. Zygoter anvendes typisk til pronuklear mikroinjektion (herunder CRISPR-genredigering), mens blastocyster høstes på et senere tidspunkt og anvendes som donorembryoner til injektion af modificerede embryonale stamceller.
- Mus- og rotteembryoner og -fostre anvendes almindeligvis til at generere primære vævskulturer, f.eks. neuronale kulturer eller fibroblaster fra musebryonale embryoner.
- Timed drægtige mus og rotter anvendes almindeligvis til at undersøge virkningen af kosten eller andre input under drægtigheden og på det resulterende afkom.
Se Taconic Biosciences’ webinarer:
- Den vigtigste mus i verden – din guide til C57BL/6-musen
- Hurtig generering af mutanter af mus og rotter ved hjælp af CRISPR/Cas i encellede embryoner
- Den vigtigste mus i verden – din guide til C57BL/6-musen
- Hurtig generering af mutanter af mus og rotter ved hjælp af CRISPR/Cas i encellede embryoner
Skriv et svar